ГОСТ ISO 11133-2016 Микробиология пищевых продуктов, кормов для животных и воды. Приготовление, производство, хранение и определение рабочих характеристик питательных сред
Приложение J
(обязательное)
Инструкции по установлению условий проведения микробиологических эксплуатационных испытаний для стандартизованных питательных сред
J.1 Область применения
Настоящее приложение предоставляет руководителям проектов рабочих групп по стандартизации инструкции по установлению микробиологических эксплуатационных критериев, методов и контрольных штаммов при создании или пересмотре международных стандартов, касающихся микробиологического анализа (микробиологии пищевых продуктов или воды).
J.2 Общие положения
Микробиологические эксплуатационные требования (эксплуатационные критерии, методы контроля и цели), применимые к стандартизованным питательным средам, должны быть включены в каждый стандарт, касающийся микробиологического анализа.
Данные эксплуатационные требования могут включать:
- заимствованные или при необходимости пересмотренные требования, приведенные в настоящем стандарте, к питательным средам, изложенным в данном приложении; или
- требования, установленные для любой новой питательной среды, в соответствии с нормами, изложенными в данном приложении.
Примечание - Данное установление условий к требованиям проведения микробиологических эксплуатационных испытаний не распространяется на реактивы или среды для подтверждения.
J.3 Эксплуатационные критерии, методы и цели
Оцениваемые критерии (производительность, селективность, специфичность), используемые методы испытаний (качественные и количественные) и поставленные цели должны быть установлены в соответствии с характеристиками каждой питательной среды, как это показано в таблице J.1.
Критерии для питательных сред могут быть следующими:
- форма среды (бульон, агар);
- состав среды (селективная, неселективная);
- функция среды в стандартизованном методе (среда для обогащения, среда для разведения, среда для выявления, среда для подсчета).
Таблица J.1
Среда | Критерий и метод испытания |
Селективный бульон для подсчета | Производительность (метод: количественный) Селективность (качественный) |
Селективный агар для подсчета | Производительность (количественный) Селективность (качественный) Специфичность (качественный) |
Селективный бульон для обогащения | Производительность (качественный) Селективность (качественный) |
Селективный агар для выявления | Производительность (качественный) Селективность (качественный) Специфичность (качественный) |
Неселективный агар для подсчета | Производительность (количественный) |
Неселективный бульон для обогащения | Производительность (качественный) |
Неселективный бульон для разведения | Производительность (количественный) |
Неселективный агар для выявления | Производительность (качественный) |
1 Производительность: целью данного эксплуатационного критерия является проверка способности к удовлетворительному росту целевых штаммов (и морфологии колоний) на агаровых средах.
Цель: результат должен быть равен 2 (удовлетворительный рост) для инокулята с не более 100 КОЕ целевого микроорганизма (см. 8.4.1).
Цель: Значение P Колонии целевого микроорганизма должны иметь характерный внешний вид.
Цель: Не менее 10 колоний целевого микроорганизма наблюдают на селективной среде для выделения, используемой для выявления после инокуляции не более 100 КОЕ.
Цель: результат должен быть равен 2 (удовлетворительный рост) для целевого микроорганизма. Колонии целевого микроорганизма должны иметь характерный внешний вид.
Цель: для разбавителей количество микроорганизмов после периода контактирования должно быть в пределах ±30% от первоначального количества. 2 Селективность: целью данного эксплуатационного критерия является проверка того, что мешающие (нецелевые) штаммы частично или полностью подавляются селективной средой.
Цель: испытуемые (нежелательные) микроорганизмы должны полностью подавляться.
Цель: испытуемые (нежелательные) микроорганизмы должны частично или полностью подавляться.
Цель: нежелательные микроорганизмы на неселективной агаровой среде, используемой для выявления, не должны проявлять никакого роста или их количество должно быть менее 10 КОЕ. 3 Специфичность: целью данного эксплуатационного критерия является проверка того, что мешающие (нецелевые) штаммы, которые не подавлены, не производят характерных колоний.
Цель: колонии испытуемых нецелевых штаммов не имеют характерный внешний вид целевых микроорганизмов в стандартизованном методе. Данные критерии должны быть верифицированы при соблюдении стандартизованных температуры и периода времени инкубирования. | |
J.4 Выбор эксплуатационных контрольных штаммов
J.4.1 Общие положения
Цели различных эксплуатационных критериев и область применения стандартизованных методов должны определить выбор контрольных штаммов:
- целевых штаммов (производительность), выявленных и подсчитанных в рамках данного метода, и
- нецелевых штаммов (селективность, специфичность), являющихся мешающей флорой, которая обычно присутствует в анализируемых пробах.
Необходимо по возможности использовать контрольные штаммы, описанные в приложениях Е и F, которые уже были испытаны на данной среде.
При наличии соответствующего обоснования (генетическая нестабильность, недостаточная воспроизводимость результатов на предыдущих штаммах QC и т.п.) руководитель проекта может внести предложение по модификации требуемых штаммов в соответствии с инструкциями данного подраздела.
J.4.2 Оценка пригодности новых контрольных штаммов
Перед использованием новых штаммов их пригодность для использования в эксплуатационных испытаниях необходимо проверить и задокументировать. Это требует демонстрации воспроизводимости эксплуатационного контроля в не менее двух (а предпочтительно трех) независимых лабораториях при использовании двух или трех различных партий продукции со стандартизованной рецептурой или от различных производителей в каждой лаборатории.