Тест-микроорганизмы и эксплуатационные критерии для питательных сред, которые широко используют в микробиологии воды
Для проведения испытаний отбирают определенные штаммы с целью гарантирования схожести результатов в разных лабораториях и облегчения демонстрации различий между средами (от партии к партии, а также в зависимости от изготовителя). Данные штаммы, приведенные в таблице F.1, прошли всестороннюю оценку с целью гарантирования их пригодности и стабильности при эксплуатации.
В случае, когда приводится более чем один штамм в каждом аспекте эксплуатационных испытаний (производительность, селективность, специфичность), должны как минимум использоваться штаммы, обозначенные символом b. Коммерческие и некоммерческие поставщики предполагают использование дополнительных штаммов, например, указанных в таблице F.1, чтобы более обоснованно гарантировать качество поставляемых питательных сред.
Эти критерии должны быть включены в конкретные стандарты при их разработке и пересмотре в будущем. Валидированной партией питательной среды является партия, которая демонстрирует удовлетворительные эксплуатационные характеристики. Номера штаммов, указанные в таблице F.1, заимствованы из каталога универсальных идентификаторов штаммов, составленных Всемирным центром данных по микроорганизмам (WDCM) [20]. Данный каталог содержит данные о контрольных штаммах, представленных каждым номером WDCM, а также контактные данные о культурных коллекциях. Все приведенные среды описаны в европейских и международных стандартах.
Если имеют место различия в характеристиках штаммов, исследуют возможные воздействия на питательную среду (например, при получении одной и той же среды от различных производителей) и приобретают дополнительную контрольную культуру из коллекции культур, в которой данная культура первоначально находилась. Пользователи могут запрашивать соответствующую информацию, касающуюся изменчивости штаммов, у РГ 5 "Питательные среды" ISО/TК 34/ПК 9 через секретариат ISО/TК 34/ПК 9.
Таблица F.1 - Тест-микроорганизмы и эксплуатационные критерии для питательных сред, широко используемых в микробиологии воды
Селективные среды для подсчета микроорганизмов путем сравнения с неселективной контрольной средой | ||||||||||||||||||
Среда | Тип | Микро- | Между- | Функция | Инкубиро- | Контрольный штамм | Номер WDCM | Контроль- | Метод контроля | Критерии | Характерная реакция | |||||||
Colilert | L | Escherichia соli/ | ISO 9308-2 | Производи- | (20±2) ч/ | Escherichia coli | 00013 | TSA | Количест- | P0,5 | Желтая окраска и флуоресценция (Е. Coli) | |||||||
Селек- | Klebsiella pneumoniae | 00206 | TSA | Количест- | P0,5 | Желтая окраска, такая же или более интенсивная, чем образец сравнения (колиформные бактерии) | ||||||||||||
Pseudomonas aeruginosa | - | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | Более бледная желтая окраска, чем у образца сравнения | |||||||||||||
GVPC | S | Legionella | ISO 11731 и ISO 11731-2 | Производи- | 2-5 сут/ | Legionella pneumophila | 00107 | BCYE | Количест- | P0,5 | Бело-серо-сине- | |||||||
5-10 сут/ | Legionella anisa | 00106 | ||||||||||||||||
Селек- | 3 сут/ (36±2)°С | Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | |||||||||||
Pseudomonas aeruginosa | 00026 или 00025 | - | Качест- | Полное и частичное ингибирование (0-1) | - | |||||||||||||
Escherichia coli | 00026 или 00025 | |||||||||||||||||
Lactose ТТС | S | Escherichia соli/ | ISO 9308-1 | Производи- | (21±3) ч/ | Escherichia coli | 00179 | TSA | Количест- | P0,5 | Желтая окраска среды под мембраной | |||||||
Enterobacter aerogenes | 00175 | |||||||||||||||||
Селек- | Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Специ- | Pseudomonas aeruginosa | 00025 или 00026 | - | Качест- | - | Красные колонии, синяя окраска среды | ||||||||||||
mСР | S | Clostridium perfringens | Директива Совета 98/83/EC | Производи- | (21±3) ч/ (44±1)°С анаэробная атмосфера | Clostridium perfringens | 00007 | TSA или другая неселек- | Количест- | P0,5 | Желтые колонии; тест на фосфатазу положительный | |||||||
Специ- | Clostridium bifermentans | 00079 | - | Качест- | - | Синие колонии; тест на фосфатазу отрицательный | ||||||||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Pseudo- | S | Pseudomonas aeruginosa | ISO 16266 | Производи- | (44±4) ч/ | Pseudomonas aeruginosa | 00024 | TSA | Количест- | P0,5 | Сине-зеленые колонии, флуорес- | |||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | |||||||||||||||||
Slanetz and Bartley | S | Кишечные энтерококки | ISO 7899-2 | Производи- | (44±4) ч/ | Enterococcus faecalis | 00009 | TSA | Количест- | P0,5 | Красно- | |||||||
Enterococcus faecium | 00177 | |||||||||||||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Staphylococcus aureus | 00032 или 00034 | |||||||||||||||||
Sulfite Iron Tryptose Sulfite (TS) | S | Сульфит- | ISO 6461-2 | Производи- | (44±4) ч/ | Clostridium perfringens | 00007 | TSA, агар с кровью или другая несе- | Количест- | P0,5 | Черные колонии | |||||||
Специ- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | - | Отсутствие почернения | ||||||||||||
TSC | S | Clostridium perfringens | ISO 14189 | Производи- | (21±3) ч/ | Clostridium perfringens | 00007 | TSA, агар с кровью или другая несе- | Количест- | P0,5 | Черные колонии | |||||||
Селек- | Bacillus subtilis subsp. spizizenii | 00003 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Селективные среды для подсчета микроорганизмов путем сравнения с партией, принятой ранее (для использования в особых случаях) | ||||||||||||||||||
Colilert | L | Escherichia соli/ | ISO 9308-2 | Производи- | (20±2) ч/ | Escherichia coli | 00013 | Партия среды Colilert ранее вали- | Количест- | P0,7 | Желтая окраска и флуорес- | |||||||
Klebsiella pneumoniae | 00206 | Партия среды Colilert ранее вали- | Количест- | P0,7 | Желтая окраска, такая же или более интенсивная, чем образец сравнения (колиформные бактерии) | |||||||||||||
Селек- | Pseudomonas aeruginosa | 00207 или 00025 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | Более бледная желтая окраска, чем образец сравнения | ||||||||||||
GVPC | S | Legionella | ISO 11731 и ISO 11731-2 | Производи- | 2-5 сут/ | Legionella pneumophila | 00107 | Партия среды GVPC уже валиди- | Количест- | P0,7 | Бело-серо-сине- | |||||||
5-10 сут/ | Legionella anisa | 00106 | ||||||||||||||||
Селек- | 3 сут/ | Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | |||||||||||
Pseudomonas aeruginosa | 00026 или 00025 | - | Качест- | Полное или частичное ингибирование (0-1) | - | |||||||||||||
Escherichia coli | 00012 или 00013 | |||||||||||||||||
Lactose ТТС | S | Escherichia соli/ | ISO 9308-1 | Производи- | (21±3) ч/ | Escherichia coli | 00179 | Партия среды Lactose ТТС уже валиди- | Количест- | P0,7 | Желтая окраска среды под мембраной | |||||||
Enterobacter aerogenes | 00013 | |||||||||||||||||
Селек- | (21±3) ч/ | Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | |||||||||||
Специ- | Pseudomonas aeruginosa | 00025 или 00026 | - | Качест- | - | Красные колонии, синяя окраска среды | ||||||||||||
mСР | S | Clostridium perfringens | Директива Совета 98/83/ЕС | Производи- | (21±3) ч/ | Clostridium perfringens | 00007 | Партия среды mСР уже вали- | Количест- | P0,7 | Желтые колонии; тест на фосфатазу положительный | |||||||
Специ- | Clostridium bifermentans | 00079 | - | Качест- | - | Синие колонии; тест на фосфатазу отрицательный | ||||||||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Pseudo- | S | Pseudomonas aeruginosa | ISO 16266 | Производи- | (44±4) ч/ | Pseudomonas aeruginosa | 00024 | Партия среды Pseudo-
| Количест- | P0,7 | Сине-зеленые колонии, флуорес- | |||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | |||||||||||||||||
Slanetz and Bartley | S | Кишечные энтерококки | ISO 7899-2 | Производи- | (44±4) ч/ | Enterococcus faecalis | 00009 | Партия среды Slanetz and Bartley уже валиди- | Количест- | P0,7 | Красно- | |||||||
Enterococcus faecium | 00177 | |||||||||||||||||
|
|
| Селек- |
| Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||
Staphylococcus aureus | 00032 или 00034 | |||||||||||||||||
Sulfite Iron Tryptose Sulfite (TS) | S | Сульфит- | ISO 6461-2 | Производи- | (44±4) ч/ | Clostridium perfringens | 00007 | Партия среды Sulfite iron или TS уже валиди- | Количест- | P0,7 | Черные колонии | |||||||
Специ- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | - | Отсутствие почернения | ||||||||||||
TSC | S | Clostridium perfringens | ISO 14189 | Производи- | (21±3) ч/ | Clostridium perfringens | 00007 | Партия среды TSC уже вали- | Количест- | P0,7 | Черные колонии | |||||||
Селек- | Bacillus subtilis subsp. spizizenii | 00003 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | ||||||||||||
Неселективные среды для подсчета микроорганизмов | ||||||||||||||||||
YEA | S | Общая микрофлора | ISO 6222 | Производи- | (44±4) ч/ | Escherichia coli | 00012 или 00013 | Партия среды YEA уже вали- | Количест- | P0,7 | - | |||||||
Bacillus subtilis subsp. spizizenii | 00003 | |||||||||||||||||
Bolton Preston | L | Campylobacter | ISO 17995 | Производи- | (44±4) ч/ | Campylobacter jejuni | 00156 | - | Качест- | более 10 колоний на mCCDA | Мелкие, плоские или выпуклые колонии с гладкой поверхностью | |||||||
Campylobacter coli | 00005 | |||||||||||||||||
Селек- | (44±4) ч/ | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Полное ингибирование на TSA (0) | - | |||||||||||
Proteus mirabilis | 00023 | |||||||||||||||||
MUG/ | L | Escherichia соli/ | ISO 9308-3 | Производи- | 48 ч/ | Escherichia coli | 00179 | Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/ЕС приведена в ISO 9308-3:1998, приложение Е | ||||||||||
MUD/ | L | Кишечные энтерококки | ISO 7899-1 | Производи- | (44±4) ч/ | Enterococcus faecalis | 00176 | Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/SF приведена в ISO 7899-1:1998, приложение Е | ||||||||||
Enterococcus hirae | 00089 | |||||||||||||||||
Enterococcus faecium | 00178 | |||||||||||||||||
Селек- | Aerococcus viridans | 00061 | ||||||||||||||||
Lactococcus lactis | 00016 | |||||||||||||||||
Staphylococcus epidermidis | 00132 | |||||||||||||||||
RVS | L | Salmonella | ISO 19250 | Производи- | (24±3) ч/ | Salmonella | 00030 | - | Качест- | >10 колоний на XLD или другой выб- | Колонии, характерные для каждой среды (см. стандарт) | |||||||
Salmonella | 00031 | |||||||||||||||||
+Escherichia coli | 00012 или 00013 | |||||||||||||||||
+Pseudomonas aeruginosa | 00025 | |||||||||||||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Частичное ингибирование не более 100 колоний на TSA | - | ||||||||||||
|
|
| (24±3) ч/ | Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | - | Качест- | менее 10 колоний на TSA | - | |||||||||
Неселективные жидкие среды | ||||||||||||||||||
DRCM | L | Сульфит- | ISO 6461-1 | Производи- | (44±4) ч/ | Clostridium perfringens | 00007 | - | Качест- | Мутность (1-2) | Почернение | |||||||
Специ- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Мутность (0-1) | Отсутствие почернения | ||||||||||||
Раствор хло- рида натрия Пеп- тонный разба- витель Пеп- тонный солевой раствор Раствор Ringer с концен- тра- цией, снижен- ной в 4 раза Фосфат- ный буфер- ный раст- вор | L | Разбавители | ISO 8199 | Разбави- | 45 мин-1 ч/ | Escherichia coli | 00012 или 00013 | TSA | Количест- | ±30% колоний/ | - | |||||||
Селективные среды для выделения | ||||||||||||||||||
mCCDA | S | Campylobacter | ISO 17995 | Производи- | (44±4) ч/ | Campylobacter jejuni | 00156 или 00005 | - | Качест- | Значительный рост (2) | Мелкие, плоские или выпуклые колонии с гладкой поверхностью | |||||||
Campylobacter coli | 00004 | |||||||||||||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012, или 00013, или 00179, или 00090 | - | Качест- | Полное или частичное ингибирование (0-1) | Характерные колонии отсутствуют | ||||||||||||
Staphylococcus aureus | 00032 или 00034 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | |||||||||||||
XLD | S | Salmonella | ISO 19250 | Производи- | (24±3) ч/ | Salmonella Typhimuri- | 00031 | - | Качест- | Значительный рост (2) | Колонии с чер- | |||||||
Селек- | Escherichia coli | 00012 или 00013 | - | Качест- | Рост или частичное ингибирование (0-1) | Желтые колонии | ||||||||||||
Enterococcus faecalis | 00009 или 00087 | - | Качест- | Полное ингибирование (0) | - | |||||||||||||
Многоцелевые среды | ||||||||||||||||||
BPW | L | Разбавитель для подсчета всех микро- | ISO 6887 | Разведение | 45 мин - 1 ч/ | Escherichia coli | 00012 или 00013 | TSA | Количест- | ±30% колоний/ | - | |||||||
Staphylococcus aureus | 00034 | |||||||||||||||||
Предваритель- | ISO 19250 | Производи- | (18±2) ч/ | Salmonella Typhimuri- | 00031 | - | Качест- | Мутность (1-2) | - | |||||||||
Salmonella Enteritidis | 00030 | |||||||||||||||||
Контрольные среды для подсчета микроорганизмов | ||||||||||||||||||
BCYE | S | Подсчет колоний | ISO 11731 и ISO 11731-2 | Производи- | 2-5 сут/ | Legionella pneumophila | 00107 | Партия среды BCYE уже валиди- | Количест- | P0,7 | Бело-серо-сине- | |||||||
TSA | S | Подсчет колоний | - | Производи- | В соответствии с методом, в котором TSA используют в качестве контрольной среды | Escherichia coli | 00012 | Партия среды TSA уже валиди- | Количест- | P0,7 | Колонии, характерные для каждого вида | |||||||
Clostridium Perfringens | 00007 | |||||||||||||||||
Pseudomonas Aeruginosa | 00024 | |||||||||||||||||
Enterococcus faecalis | 00087 | |||||||||||||||||
Полные наименования сред и соответствующие им аббревиатуры сред приведены в таблице F.2. Данный штамм используется как необходимый минимум. Для получения информации о номерах штаммов культурных коллекций и контактной информации следует обратиться по адресу http://www.wfcc.info, где имеется ссылка на каталог контрольных штаммов. Безальтернативный штамм; один из данных штаммов используют как необходимый минимум. L: жидкая среда; S: плотная среда; SS: полужидкая среда. Более подробная информация о контроле качества среды для Legionella, включая хранение контрольных штаммов, приведена в ISO 11731. Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/ЕС приведена в ISO 9308-3:1998, приложении Е; селективность не установлена в данном стандарте. Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/SF приведена в ISO 7899-1:1998, приложении Е. Некоторые национальные ограничения и директивы требуют использования иных сероваров. При выборе сероваров Salmonella ссылаются на соответствующие требования национальных нормативных документов. Рост/мутность характеризуют следующим образом: 0 - отсутствие роста/отсутствие мутности; 1 - незначительный рост/незначительная мутность; 2 - выраженный рост/выраженная мутность (см. 7.4.1.2, 8.4.1). В случае, когда среду BPW используют для двух и более различных применений, проводят как минимум испытание с обогащением Salmonella (если лаборатория проводит испытания данного микроорганизма). Штамм(ы) выбирают в соответствии с методом, в котором TSA используют в качестве контрольной среды. |
________________
* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.
Таблица F.2 - Аббревиатуры питательных сред, приведенных в таблице F.1
Аббревиатура среды | Полное наименование среды | Соответствующий международный стандарт |
BCYE | Буферная агаровая среда с активированным углем и дрожжевым экстрактом | ISO 11731 и ISO 11731-2 |
Bolton | Бульон Болтона | ISO 17995 |
BPW | Буферная пептонная вода | ISO 6887 ISO 19250 |
DRCM | Дифференциальная усиленная среда для клостридий | ISO 6461-1 |
GVPC | Буферная агаровая среда с активированным углем, дрожжевым экстрактом, глицином, ванкомицином, полимиксином В и циклогексимидом | ISO 11731 и ISO 11731-2 |
Lactose TTC | Лактозная агаровая среда с трифенилтетразолия хлоридом и гептадецилсульфатом натрия | ISO 9308-1 |
mCCDA | Модифицированный агар с активированным углем, цефоперазоном и дезоксихолатом | ISO 17995 |
mCP | Мембранная агаровая среда для Clostridium perfringens | Директива Совета 98/83/EC |
MUD/SF | Среда с 4-метилумбеллиферил--D-глюкозидом и SF | ISO 7899-1 |
MUD/EC | Среда с 4-метилумбеллиферил--D-глюкуронидом и ЕС | ISO 9308-3 |
Preston | Бульон Престона | ISO 17995 |
Pseudomonas CN | Агар с цетримидом и налидиксовой кислотой для Pseudomonas | ISO 16266 |
RVS | Соевый пептонный бульон Раппапорта-Вассилиадиса | ISO 19250 |
Slanetz and Bartley | Среда Сланеца и Бартли | ISO 7899-2 |
Sulfite Iron | Агар с сульфитом железа | ISO 6461-2 |
Tryptose Sulfite (TS) | Агар с триптозой и сульфитом | ISO 6461-2 |
TSA | Триптонный соевый агар | - |
TSC | Агар с триптозой, сульфитом и циклосерином (без яичного желтка) | ISO 14189 |
XLD | Агар с ксилозой, лизином и дезоксихолатом | ISO 19250 |
YEA | Агар с дрожжевым экстрактом | ISO 6222 |