Статус документа
Статус документа

ГОСТ ISO 11133-2016 Микробиология пищевых продуктов, кормов для животных и воды. Приготовление, производство, хранение и определение рабочих характеристик питательных сред

Приложение F
(обязательное)

Тест-микроорганизмы и эксплуатационные критерии для питательных сред, которые широко используют в микробиологии воды


Для проведения испытаний отбирают определенные штаммы с целью гарантирования схожести результатов в разных лабораториях и облегчения демонстрации различий между средами (от партии к партии, а также в зависимости от изготовителя). Данные штаммы, приведенные в таблице F.1, прошли всестороннюю оценку с целью гарантирования их пригодности и стабильности при эксплуатации.

В случае, когда приводится более чем один штамм в каждом аспекте эксплуатационных испытаний (производительность, селективность, специфичность), должны как минимум использоваться штаммы, обозначенные символом b. Коммерческие и некоммерческие поставщики предполагают использование дополнительных штаммов, например, указанных в таблице F.1, чтобы более обоснованно гарантировать качество поставляемых питательных сред.

Эти критерии должны быть включены в конкретные стандарты при их разработке и пересмотре в будущем. Валидированной партией питательной среды является партия, которая демонстрирует удовлетворительные эксплуатационные характеристики. Номера штаммов, указанные в таблице F.1, заимствованы из каталога универсальных идентификаторов штаммов, составленных Всемирным центром данных по микроорганизмам (WDCM) [20]. Данный каталог содержит данные о контрольных штаммах, представленных каждым номером WDCM, а также контактные данные о культурных коллекциях. Все приведенные среды описаны в европейских и международных стандартах.

Если имеют место различия в характеристиках штаммов, исследуют возможные воздействия на питательную среду (например, при получении одной и той же среды от различных производителей) и приобретают дополнительную контрольную культуру из коллекции культур, в которой данная культура первоначально находилась. Пользователи могут запрашивать соответствующую информацию, касающуюся изменчивости штаммов, у РГ 5 "Питательные среды" ISО/TК 34/ПК 9 через секретариат ISО/TК 34/ПК 9.


Таблица F.1 - Тест-микроорганизмы и эксплуатационные критерии для питательных сред, широко используемых в микробиологии воды

Селективные среды для подсчета микроорганизмов путем сравнения с неселективной контрольной средой

Среда

Тип

Микро-
организм

Между-
народный стандарт

Функция

Инкубиро-
вание

Контрольный штамм

Номер WDCM

Контроль-
ная среда

Метод контроля

Критерии

Характерная реакция

Colilert

L

Escherichia соli/
колиформные бактерии

ISO 9308-2

Производи-
тельность

(20±2) ч/
(36±2)°С

Escherichia coli

00013

00090

TSA

Количест-
венный

P0,5

Желтая окраска и флуоресценция (Е. Coli)

Селек-
тивность

Klebsiella pneumoniae

00206

TSA

Количест-
венный

P0,5

Желтая окраска, такая же или более интенсивная, чем образец сравнения (колиформные бактерии)

Pseudomonas aeruginosa

-

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

Более бледная желтая окраска, чем у образца сравнения

GVPC

S

Legionella

ISO 11731 и ISO 11731-2

Производи-
тельность

2-5 сут/
(36±2)°С

Legionella pneumophila

00107

00180

BCYE

Количест-
венный

P0,5

Бело-серо-сине-
малиновые колонии с полным ореолом с характерным внешним видом гладкого стекла

5-10 сут/
(36±2)°С

Legionella anisa

00106

Селек-
тивность

3 сут/ (36±2)°С

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Pseudomonas aeruginosa

00026 или 00025

-

Качест-
венный

Полное и частичное ингибирование (0-1)

-

Escherichia coli

00026 или 00025

Lactose ТТС

S

Escherichia соli/
колиформные бактерии

ISO 9308-1

Производи-
тельность

(21±3) ч/
(36±2)°С

Escherichia coli

00179

00012

00013

TSA

Количест-
венный

P0,5

Желтая окраска среды под мембраной

Enterobacter aerogenes

Citrobacter freundii

00175

00006

Селек-
тивность

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Специ-
фичность

Pseudomonas aeruginosa

00025 или 00026

-

Качест-
венный

-

Красные колонии, синяя окраска среды

mСР

S

Clostridium perfringens

Директива Совета 98/83/EC

Производи-
тельность

(21±3) ч/ (44±1)°С анаэробная атмосфера

Clostridium perfringens

00007

00080

00174

TSA или другая неселек-
тивная среда для анаэробных бактерий

Количест-
венный

P0,5

Желтые колонии; тест на фосфатазу положительный

Специ-
фичность

Clostridium bifermentans

00079

-

Качест-
венный

-

Синие колонии; тест на фосфатазу отрицательный

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Pseudo-
monas CN

S

Pseudomonas aeruginosa

ISO 16266

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(36±2)°С

Pseudomonas aeruginosa

00024

00025

00026

TSA

Количест-
венный

P0,5

Сине-зеленые колонии, флуорес-
цирующие в ультрафио-
летовом свете при длине волны 360±20 нм

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

Slanetz and Bartley

S

Кишечные энтерококки

ISO 7899-2

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(36±2)°С

Enterococcus faecalis

00009

00087

00176

TSA

Количест-
венный

P0,5

Красно-
коричнево-
розовые колонии

Enterococcus faecium

00177

00178

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Staphylococcus aureus

00032 или 00034

Sulfite Iron Tryptose Sulfite (TS)

S

Сульфит-
восстанав-
ливающие анаэробные бактерии (клостридии)

ISO 6461-2

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(37±1)°С
анаэробная атмосфера

Clostridium perfringens

00007

00080

TSA, агар с кровью или другая несе-
лективная среда для анаэробных бактерий

Количест-
венный

P0,5

Черные колонии

Специ-
фичность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

-

Отсутствие почернения

TSC

S

Clostridium perfringens

ISO 14189

Производи-
тельность

(21±3) ч/
(44±1)°С анаэробная атмосфера

Clostridium perfringens

00007

00080

00174

TSA, агар с кровью или другая несе-
лективная среда для анаэробных бактерий

Количест-
венный

P0,5

Черные колонии

Селек-
тивность

Bacillus subtilis subsp. spizizenii

00003

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Селективные среды для подсчета микроорганизмов путем сравнения с партией, принятой ранее (для использования в особых случаях)

Colilert

L

Escherichia соli/
колиформные бактерии

ISO 9308-2

Производи-
тельность

(20±2) ч/
(36±2)°С

Escherichia coli

00013

00090

Партия среды Colilert ранее вали-
дирована

Количест-
венный

P0,7

Желтая окраска и флуорес-
ценция (Е. Coli)

Klebsiella pneumoniae

00206

Партия среды Colilert ранее вали-
дирована

Количест-
венный

P0,7

Желтая окраска, такая же или более интенсивная, чем образец сравнения (колиформные бактерии)

Селек-
тивность

Pseudomonas aeruginosa

00207 или 00025

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

Более бледная желтая окраска, чем образец сравнения

GVPC

S

Legionella

ISO 11731 и ISO 11731-2

Производи-
тельность

2-5 сут/
(36±2)°С

Legionella pneumophila

00107

00180

Партия среды GVPC уже валиди-
рована

Количест-
венный

P0,7

Бело-серо-сине-
малиновые колонии с полным ореолом с характерным внешним видом гладкого стекла

5-10 сут/
(36±2)°С

Legionella anisa

00106

Селек-
тивность

3 сут/
(36±2)°С

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Pseudomonas aeruginosa

00026 или 00025

-

Качест-
венный

Полное или частичное ингибирование (0-1)

-

Escherichia coli

00012 или 00013

Lactose ТТС

S

Escherichia соli/
колиформные бактерии

ISO 9308-1

Производи-
тельность

(21±3) ч/
(36±2)°С

Escherichia coli

00179

00012

Партия среды Lactose ТТС уже валиди-
рована

Количест-
венный

P0,7

Желтая окраска среды под мембраной

Enterobacter aerogenes

Citrobacter freundii

00013

00175

00006

Селек-
тивность

(21±3) ч/
(36±2)°С

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Специ-
фичность

Pseudomonas aeruginosa

00025 или 00026

-

Качест-
венный

-

Красные колонии, синяя окраска среды

mСР

S

Clostridium perfringens

Директива Совета 98/83/ЕС

Производи-
тельность

(21±3) ч/
(44±1)°С
анаэробная атмосфера

Clostridium perfringens

00007

00080

00174

Партия среды mСР уже вали-
дирована

Количест-
венный

P0,7

Желтые колонии; тест на фосфатазу положительный

Специ-
фичность

Clostridium bifermentans

00079

-

Качест-
венный

-

Синие колонии; тест на фосфатазу отрицательный

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Pseudo-
monas CN

S

Pseudomonas aeruginosa

ISO 16266

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(36±2)°С

Pseudomonas aeruginosa

00024

00025

00026

Партия среды Pseudo-
monas CN уже валиди-
рована

 

Количест-
венный

P0,7

Сине-зеленые колонии, флуорес-
цирующие в ультрафиоле-
товом свете при длине волны 360±20 нм

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

Slanetz and Bartley

S

Кишечные энтерококки

ISO 7899-2

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(36±2)°С

Enterococcus faecalis

00009

00087

00176

Партия среды Slanetz and Bartley уже валиди-
рована

Количест-
венный

P0,7

Красно-
коричнево-
розовые колонии

Enterococcus faecium

00177

00178

 

 

 

Селек-
тивность

 

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Staphylococcus aureus

00032 или 00034

Sulfite Iron  Tryptose Sulfite (TS)

S

Сульфит-
восстанав-
ливающие анаэробные бактерии (клостридии)

ISO 6461-2

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(37±1)°С анаэробная атмосфера

Clostridium perfringens

00007

00080

Партия среды Sulfite iron или TS уже валиди-
рована

Количест-
венный

P0,7

Черные колонии

Специ-
фичность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

-

Отсутствие почернения

TSC

S

Clostridium perfringens

ISO 14189

Производи-
тельность

(21±3) ч/
(44±1)°С анаэробная атмосфера

Clostridium perfringens

00007

00080

00174

Партия среды TSC уже вали-
дирована

Количест-
венный

P0,7

Черные колонии

Селек-
тивность

Bacillus subtilis subsp. spizizenii

00003

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Неселективные среды для подсчета микроорганизмов

YEA

S

Общая микрофлора

ISO 6222

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(36±2)°С

Escherichia coli

00012 или 00013

Партия среды YEA уже вали-
дирована

Количест-
венный

P0,7

-

Bacillus subtilis subsp. spizizenii

00003

Bolton Preston

L

Campylobacter

ISO 17995

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(37±1)°С
микро-
аэробная атмосфера

Campylobacter jejuni

00156

-

Качест-
венный

более 10 колоний на mCCDA

Мелкие, плоские или выпуклые колонии с гладкой поверхностью

Campylobacter coli

+Escherichia coli

+Proteus mirabilis

00005

00004

00012 или 00013

00023

Селек-
тивность

(44±4) ч/
(37±1)°С
микро-
аэробная атмосфера

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Полное ингибирование на TSA (0)

-

Proteus mirabilis

00023

MUG/
ECg

L

Escherichia соli/
колиформные бактерии

ISO 9308-3

Производи-
тельность

48 ч/
(44±0,5)°С

Escherichia coli

00179

Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/ЕС приведена в ISO 9308-3:1998, приложение Е

MUD/
SFh

L

Кишечные энтерококки

ISO 7899-1

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(44±0,5)°С

Enterococcus faecalis

00176

Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/SF приведена в ISO 7899-1:1998, приложение Е

Enterococcus hirae

00089

Enterococcus faecium

00178

Селек-
тивность

Aerococcus viridans

00061

Lactococcus lactis

00016

Staphylococcus epidermidis

00132

RVS

L

Salmonella

ISO 19250

Производи-
тельность

(24±3) ч/
(41,5±1)°С

Salmonella
Enteritidis

00030

-

Качест-
венный

>10 колоний на XLD или другой выб-
ранной среде

Колонии, характерные для каждой среды (см. стандарт)

Salmonella
Typhimuri-
um

00031

+Escherichia coli

00012 или 00013

+Pseudomonas aeruginosa

00025

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Частичное ингибирование не более 100 колоний на TSA

-

 

 

 

(24±3) ч/
(41,5±1)°С

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

-

Качест-
венный

менее 10 колоний на TSA

-

Неселективные жидкие среды

DRCM

L

Сульфит-
восстанав-
ливающие анаэробные бактерии (клостридии)

ISO 6461-1

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(36±1)°С анаэробная атмосфера

Clostridium perfringens

00007

00080

-

Качест-
венный

Мутность (1-2)

Почернение

Специ-
фичность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Мутность (0-1)

Отсутствие почернения

Раствор хло-

рида натрия

Пеп-

тонный разба-

витель

Пеп-

тонный солевой раствор

Раствор Ringer с концен-

тра-

цией, снижен-

ной в 4 раза

Фосфат-

ный буфер-

ный раст-

вор

L

Разбавители

ISO 8199

Разбави-
тель

45 мин-1 ч/
20-25°С

Escherichia coli

Staphylococcus aureus

00012 или 00013

00034

TSA

Количест-
венный

±30% колоний/
T (±30% от перво-
начального количества)

-

Селективные среды для выделения

mCCDA

S

Campylobacter

ISO 17995

Производи-
тельность

(44±4) ч/
(41,5±1)°С микро-
аэробная атмосфера

Campylobacter jejuni

00156 или 00005

-

Качест-
венный

Значительный рост (2)

Мелкие, плоские или выпуклые колонии с гладкой поверхностью

Campylobacter coli

00004

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012, или 00013, или 00179, или 00090

-

Качест-
венный

Полное или частичное ингибирование (0-1)

Характерные колонии отсутствуют

Staphylococcus aureus

00032 или 00034

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

XLD

S

Salmonella

ISO 19250

Производи-
тельность

(24±3) ч/
(36±2)°С

Salmonella Typhimuri-
um


Salmonella Enteritidis

00031




00030

-

Качест-
венный

Значительный рост (2)

Колонии с чер-
ным центром и слегка прозрач-
ной зоной, окра-
шенной в красно-
ватый цвет из-за изменения цвета среды

Селек-
тивность

Escherichia coli

00012 или 00013

-

Качест-
венный

Рост или частичное ингибирование (0-1)

Желтые колонии

Enterococcus faecalis

00009 или 00087

-

Качест-
венный

Полное ингибирование (0)

-

Многоцелевые среды

BPW

L

Разбавитель для подсчета всех микро-
организмов

ISO 6887

Разведение

45 мин - 1 ч/
20-25°С

Escherichia coli

00012 или 00013

TSA

Количест-
венный

±30% колоний/
Т (±30% первона-
чального количества)

-

Staphylococcus aureus

00034

Предваритель-
ное обогащение для выявления Salmonella

ISO 19250

Производи-
тельность

(18±2) ч/
(36±2)°С

Salmonella Typhimuri-
um

00031

-

Качест-
венный

Мутность (1-2)

-

Salmonella Enteritidis

00030

Контрольные среды для подсчета микроорганизмов

BCYE

S

Подсчет колоний

ISO 11731 и ISO 11731-2

Производи-
тельность

2-5 сут/
(36±2)°С

Legionella pneumophila

00107

Партия среды BCYE уже валиди-
рована

Количест-
венный

P0,7

Бело-серо-сине-
малиновые колонии с полным ореолом с характерным внешним видом гладкого стекла

TSA

S

Подсчет колоний

-

Производи-
тельность

В соответствии с методом, в котором TSA используют в качестве контрольной среды

Escherichia coli

00012

00013

00090

00179

Партия среды TSA уже валиди-
рована

Количест-
венный

P0,7

Колонии, характерные для каждого вида

Clostridium Perfringens

00007

Pseudomonas Aeruginosa

00024

Enterococcus faecalis

00087

Полные наименования сред и соответствующие им аббревиатуры сред приведены в таблице F.2.

Данный штамм используется как необходимый минимум.

Для получения информации о номерах штаммов культурных коллекций и контактной информации следует обратиться по адресу http://www.wfcc.info, где имеется ссылка на каталог контрольных штаммов.

Безальтернативный штамм; один из данных штаммов используют как необходимый минимум.

L: жидкая среда; S: плотная среда; SS: полужидкая среда.

Более подробная информация о контроле качества среды для Legionella, включая хранение контрольных штаммов, приведена в ISO 11731.

Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/ЕС приведена в ISO 9308-3:1998, приложении Е; селективность не установлена в данном стандарте.

Более подробная информация о контроле качества и критериях качества среды MUG/SF приведена в ISO 7899-1:1998, приложении Е.

Некоторые национальные ограничения и директивы требуют использования иных сероваров. При выборе сероваров Salmonella ссылаются на соответствующие требования национальных нормативных документов.

Рост/мутность характеризуют следующим образом: 0 - отсутствие роста/отсутствие мутности; 1 - незначительный рост/незначительная мутность; 2 - выраженный рост/выраженная мутность (см. 7.4.1.2, 8.4.1).

В случае, когда среду BPW используют для двух и более различных применений, проводят как минимум испытание с обогащением Salmonella (если лаборатория проводит испытания данного микроорганизма).

Штамм(ы) выбирают в соответствии с методом, в котором TSA используют в качестве контрольной среды.

________________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.


Таблица F.2 - Аббревиатуры питательных сред, приведенных в таблице F.1

Аббревиатура среды

Полное наименование среды

Соответствующий международный стандарт

BCYE

Буферная агаровая среда с активированным углем и дрожжевым экстрактом

ISO 11731 и ISO 11731-2

Bolton

Бульон Болтона

ISO 17995

BPW

Буферная пептонная вода

ISO 6887

ISO 19250

DRCM

Дифференциальная усиленная среда для клостридий

ISO 6461-1

GVPC

Буферная агаровая среда с активированным углем, дрожжевым экстрактом, глицином, ванкомицином, полимиксином В и циклогексимидом

ISO 11731 и ISO 11731-2

Lactose TTC

Лактозная агаровая среда с трифенилтетразолия хлоридом и гептадецилсульфатом натрия

ISO 9308-1

mCCDA

Модифицированный агар с активированным углем, цефоперазоном и дезоксихолатом

ISO 17995

mCP

Мембранная агаровая среда для Clostridium perfringens

Директива Совета 98/83/EC

MUD/SF

Среда с 4-метилумбеллиферил--D-глюкозидом и SF

ISO 7899-1

MUD/EC

Среда с 4-метилумбеллиферил--D-глюкуронидом и ЕС

ISO 9308-3

Preston

Бульон Престона

ISO 17995

Pseudomonas CN

Агар с цетримидом и налидиксовой кислотой для Pseudomonas

ISO 16266

RVS

Соевый пептонный бульон Раппапорта-Вассилиадиса

ISO 19250

Slanetz and Bartley

Среда Сланеца и Бартли

ISO 7899-2

Sulfite Iron

Агар с сульфитом железа

ISO 6461-2

Tryptose Sulfite (TS)

Агар с триптозой и сульфитом

ISO 6461-2

TSA

Триптонный соевый агар

-

TSC

Агар с триптозой, сульфитом и циклосерином (без яичного желтка)

ISO 14189

XLD

Агар с ксилозой, лизином и дезоксихолатом

ISO 19250

YEA

Агар с дрожжевым экстрактом

ISO 6222