Статус документа
Статус документа

ГОСТ Р 54496-2011 (ИСО 8692:2004) Вода. Определение токсичности с использованием зеленых пресноводных одноклеточных водорослей

Приложение ДЖ
(справочное)

Пример определения эффективной концентрации вещества по замедлению скорости роста клеток водорослей*

_______________

* В бумажном оригинале наименование приложения ДЖ выделено курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.

ДЖ.1 По результатам тестирования анализируемой пробы и подсчета плотности (численности) клеток водорослей каждые 24 ч на протяжении 72 ч тестирования в каждой из колб для каждой заданной концентрации вещества и контрольной пробы рассчитывают среднеарифметические значения плотности (численности) клеток водорослей , клеток/см, и определяют соответствующие им значения логарифма ().

Пример обработки результатов тестирования анализируемой пробы вещества приведен в таблице ДЖ.1.


Таблица ДЖ.1

Массовая концентрация вещества , мг/дм

Среднеарифметическое значение плотности (численности) клеток водорослей, подсчитанное после тестирования анализируемой пробы вещества в течение

24 ч

48 ч

72 ч


, клеток/см

, клеток/см

, клеток/см

0,0 (контрольная проба)

15,0·10

5,18

31,5·10

5,50

67,2·10

5,83

1,0

13,2·10

5,12

21,8·10

5,34

36,3·10

5,56

2,5

10,7·10

5,03

15,9·10

5,20

19,4·10

24

5,29

5,0

6,6·10

4,82

7,2·10

4,86

8,1·10

4,91

Примечание - Начальная плотность (численность) клеток водорослей в начале тестирования 10 клеток/см, 4,00.



ДЖ.2 Замедление скорости роста клеток водорослей в процентах определяют одним из способов:

- графическим методом (см. ДЖ.2.1);

- расчетным методом (см. ДЖ.2.2).

ДЖ.2.1 Графический метод определения замедления скорости роста клеток водорослей

На основании полученных результатов (см. таблицу ДЖ.1) строят график скорости роста клеток водорослей для контрольной пробы и каждой заданной кратности разбавления (концентрации) анализируемой пробы в виде зависимости логарифма плотности (численности) клеток () от продолжительности тестирования, откладывая на оси ординат значение , а на оси абсцисс - продолжительность тестирования (, ч).

Пример графика скорости роста клеток водорослей Pseudokirchneriella subcapitata (Korshikov) Hindak для контрольной пробы и каждой заданной концентрации вещества анализируемой пробы по результатам тестирования в течение 72 ч (см. таблицу ДЖ.1) приведен на рисунке ДЖ.1.



- скорость роста клеток водорослей в контрольной пробе; 1 - скорость роста клеток водорослей в анализируемой пробе при 1,0 мг/дм; 2 - скорость роста клеток водорослей в анализируемой пробе при 2,5 мг/дм; 3 - скорость роста клеток водорослей в анализируемой пробе при 5,0 мг/дм

Рисунок ДЖ.1 - Пример графика среднеарифметических значений скорости роста клеток водорослей Pseudokirchneriella subcapitata (Korshikov) Hindak в контрольной пробе и при различных концентрациях вещества в течение тестирования



Замедление скорости роста клеток водорослей , %, после 72 ч тестирования определяют графически для каждой заданной концентрации вещества анализируемой пробы относительно контрольной пробы следующим образом:

a) на ось ординат из точки, соответствующей значению 72 ч логарифма скорости роста клеток водорослей в контрольной () и в анализируемой пробе () каждой кратности разбавления (концентрации), проводят прямые линии параллельно оси абсцисс до пересечения с осью ординат (например, см. рисунок ДЖ.1 для линии К и линии 3);

b) рассчитывают разность между значениями логарифмов для контрольной пробы () и анализируемых проб ().

Например, за 72 ч (см. рисунок ДЖ.1) значение для контрольной пробы (линия ) равно 5,83, для анализируемой пробы концентрацией 5,0 мг/дм (линия 3) значение равно 4,91; разность этих логарифмов составляет 0,92;

c) рассчитывают среднюю скорость роста клеток водорослей в контрольной пробе за 72 ч по разности между значениями в конце тестирования и в начале тестирования. Например, значение (см. рисунок ДЖ.1) в конце тестирования равно 5,83, а в начале тестирования равно 4,0 (см. таблицу ДЖ.1). Разность этих логарифмов составляет 1,83, что соответствует средней скорости роста клеток водорослей в контрольной пробе;

d) рассчитывают замедление средней скорости роста клеток водорослей , %, для каждой заданной кратности разбавления (концентрации) относительно контрольной пробы по формуле

,                                                    (ДЖ.1)


где - значение разности логарифмов контрольной пробы и анализируемой пробы, полученное по перечислению b);

- значение разности логарифмов для контрольной пробы, полученное по перечислению с).

Например, используя формулу (ДЖ.1) для линии 3, замедление скорости роста клеток водорослей в процентах относительно контрольной пробы (линия ) составляет