Настоящий стандарт распространяется на природные пресные воды (поверхностные и подземные); питьевые воды (централизованного и нецентрализованного питьевого водоснабжения); сточные воды (в том числе очищенные), а также на растворимые в воде вещества; отработанные буровые растворы; водные вытяжки донных отложений, твердых промышленных отходов, грунтов и почв и устанавливает методы лабораторного биологического тестирования воды и водных вытяжек (далее - тестирование) для определения их токсичности с использованием зеленых пресноводных одноклеточных водорослей по изменению:
- плотности (численности) клеток водорослей при тестировании в условиях переменного воздействия света и постоянной температуры (метод А);
- плотности (численности) клеток водорослей при тестировании в условиях постоянного воздействия света и постоянной температуры (метод Б);
- интенсивности флуоресценции клеток водорослей при тестировании в условиях переменного воздействия света и постоянной температуры (метод В).
Примечания
1 Метод Б применим для оценки токсичности сточных вод, не содержащих тяжелых металлов, так как комплексообразующая способность трилона Б, содержащегося в питательной среде, искажает возможность тестирования сточных вод, загрязненных тяжелыми металлами.
2 Используемые в настоящем стандарте водоросли являются планктонными одноклеточными зелеными водорослями, принадлежащими к порядку Chlorococcales (Chlorophyta, Chlorophyceae).
Методы позволяют определять токсичность исследуемых объектов и следующие токсикологические показатели (относительно контрольной пробы):
- эффективную кратность разбавления () пробы, при которой плотность (численность) клеток водорослей (интенсивность флуоресценции) снижается на 50%, а также безвредную кратность разбавления пробы (), при которой плотность (численность) клеток водорослей (интенсивность флуоресценции) снижается не более 10% за 72 ч (96 ч) тестирования;
- эффективную концентрацию () растворов веществ, вызывающую снижение плотности (численности) клеток водорослей (интенсивности флуоресценции) на 50%, и безвредную концентрацию () растворов веществ, вызывающую снижение плотности (численности) клеток водорослей (интенсивности флуоресценции) не более 10% за 72 ч тестирования.
Примечания
1 Продолжительность тестирования 96 ч используют при определении токсичности и токсикологических показателей анализируемых проб отработанных буровых растворов, твердых промышленных отходов, донных отложений, грунтов и почв (методы А и В).
2 Определение токсичности и токсикологических показателей для сточной воды по методу Б рекомендуется проводить при продолжительности тестирования не менее 48 ч. Пример приведен в приложении А.
3 Полученные в лабораторных условиях значения и являются токсикологическими показателями и указывают на потенциальную опасность исследуемых объектов, но не могут быть использованы непосредственно для прогнозирования их воздействия на окружающую среду. Однако определенные свойства водорослей, установленные на основе тестирования (например, замедление начала роста клеток; хороший начальный рост, который не сохраняется), позволяют определить степень воздействия конкретного вещества.
4 Эффективную кратность разбавления () за 72 ч тестирования обозначают как 72 ч , за 96 ч тестирования - соответственно 96 ч , за 48 ч тестирования - 48 ч ; эффективную концентрацию () за 72 ч тестирования - как 72 ч . При этом в протоколе испытаний допускается указывать унифицированное обозначение для эффективной кратности разбавления и для эффективной концентрации как .
5 Тестирование должен выполнять обученный персонал.
6 Настоящий стандарт не предусматривает ознакомление персонала со всеми проблемами безопасности, связанными с его использованием. Пользователь стандарта несет ответственность за обеспечение соответствующих требований стандарта при проведении тестирования.
В помещении лаборатории, где проводят тестирование:
- окружающая среда не должна содержать пара или пыли, токсичной для водорослей;
- температура окружающего воздуха должна быть (23±2) °С (только для помещения с регулируемой температурой по методу Б);
- относительная влажность воздуха должна быть не более 80%;
- атмосферное давление должно быть 84-106 кПа (630-800 мм рт.ст.);
- должно быть обеспечено постоянное равномерное белое освещение в диапазоне 6000-10000 лк (только для помещения с регулируемой температурой по методу Б).