ГОСТ Р 54496-2011 (ИСО 8692:2004) Вода. Определение токсичности с использованием зеленых пресноводных одноклеточных водорослей

     6 Метод Б*

_________________

* Наименование раздела 6 в бумажном оригинале выделено курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.

6.1 Сущность метода

Сущность метода заключается в регистрации замедления скорости роста клеток зеленых пресноводных одноклеточных водорослей в анализируемой пробе исследуемого объекта относительно контрольной пробы, определении ее токсичности и токсикологических показателей при тестировании в течение 72 ч при постоянном воздействии света и температуры.

Примечание - Для проб сточных вод рекомендуемая процедура тестирования продолжительностью 48 ч приведена в приложении А.

6.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, материалы - по 5.2 со следующими уточнениями:

Терморегулируемая камера (например, климатостат) или помещение с регулируемой температурой, обеспечивающее поддержание температуры (23±2) °С и постоянное равномерное белое освещение в диапазоне 6000-10000 лк.

Примечание - Для светоизмерительных приборов, калиброванных в других единицах:

- сила света на среднем уровне контрольной пробы должна быть однородной в пределах ±10% и в диапазоне от 60 до 120 мкВт/мс при измерении в фотосинтетически эффективном диапазоне длин волн от 400 до 700 нм. При этом метод измерения и, в частности, тип приемника прибора, оказывают влияние на измеренное значение интенсивности света. Приемники со сферической геометрией (которые реагируют на прямой и отраженный свет под всеми углами над плоскостью измерения и ниже ее), а также "косинусоидальные" приемники (которые реагируют на свет под всеми углами над плоскостью измерения) являются предпочтительными для однонаправленных приемников и дают более высокие значения для многоточечного источника света;

- требуемая освещенность может быть достигнута с использованием от четырех до шести люминесцентных ламп универсального белого (естественного) света, то есть номинальный цвет эталона цвета 2 (цветовая температура 4300 К).

Фильтры мембранные с диаметром пор 0,2 мкм.

Автоклав, обеспечивающий рабочее давление пара (0,11±0,02) МПа и температуру (120±2) °С.

Тест-объекты (тест-организмы): зеленые пресноводные одноклеточные водоросли Desmodesmus subspicatus или Pseudokirchneriella subcapitata (Korshikov) Hindak.

Примечание - Методы культивирования водорослей приведены в ДБ.2 (приложение ДБ).

Модельный токсикант - по 5.2 или 3,5-дихлорфенол, х.ч.

Питательная среда, приготовленная в соответствии с требованиями ДА.2 (приложение ДА).

Аммоний хлористый по ГОСТ 3773, х.ч.

Калий хлористый по ГОСТ 4234, х.ч.

Калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 4198, х.ч.

Кальций хлористый 2-водный, х.ч.

Кобальт хлористый 6-водный по ГОСТ 4525, х.ч.

Магний хлористый 6-водный, по ГОСТ 4209, х.ч.

Марганец (II) хлористый 4-водный по ГОСТ 612, х.ч.

Медь двухлористая 2-водная по ГОСТ 4167, х.ч.

Натрий молибденовокислый 2-водный по ГОСТ 10931, х.ч.

Цинк хлористый по ГОСТ 4529, х.ч.

Кислота борная по ГОСТ 9656, х.ч.

Соль динатриевая этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б) по ГОСТ 10652, х.ч.

6.3 Подготовка к тестированию - аналогично 5.3 с использованием питательной среды по ДА.2.2 (приложение ДА) и тест-организмов по 6.2.