Другие нейтрализующие разбавители
A.1 Общие положения
Любой нейтрализующий разбавитель может использоваться для приготовления исходной суспензии, если он будет проверен и будет подтверждена его пригодность. Нижеприведенные нейтрализующие разбавители являются примерами соответствующих составов. Общая информация по нейтрализации приведена в приложении D.
A.2 Жидкий бульон Eugon LT 100
A.2.1 Общие положения
Данная среда содержит компоненты, которые нейтрализуют ингибирующие вещества, присутствующие в пробе (лецитин и полисорбат 80), а также диспергирующий агент (октоксинол 9).
A.2.2 Состав
- панкреатический гидролизат казеина | 15,0 г; |
- папаиновый гидролизат соевой муки | 5,0 г; |
- L-цистин | 0,7 г; |
- натрия хлорид | 4,0 г; |
- натрия сульфит | 0,2 г; |
- глюкоза | 5,5 г; |
- яичный лецитин | 1,0 г; |
- полисорбат 80 | 5,0 г; |
- октоксинол 9 | 1,0 г; |
- вода | 1000 см. |
A.2.3 Приготовление
Растворяют последовательно в горячей воде: полисорбат 80, октоксинол 9 и яичный лецитин до их полного растворения. Растворяют другие компоненты, перемешивая при нагревании. Разливают среду в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121°С в течение 15 мин. После стерилизации рН среды должен быть равен 7,0±0,2 при измерении при комнатной температуре.
A.3 Лецитин-полисорбатный разбавитель (LP)
A.3.1 Состав
- полипептон | 1,0 г; |
- яичный лецитин | 0,7 г; |
- полисорбат-80 | 20,0 г; |
- вода | 980 см. |
A.3.2 Приготовление
Смешивают и растворяют компоненты при нагревании. Охлаждают до температуры 25°С перед розливом раствора в подходящую лабораторную посуду. Стерилизуют в автоклаве при температуре 121°С в течение 15 мин. После стерилизации рН среды должен быть равен 7,2±0,2 при измерении при комнатной температуре.