ГОСТ 33918-2016 Продукция парфюмерно-косметическая. Микробиология. Метод определения стерильности (с Поправкой)

     11 Метод мембранной фильтрации

11.1 Сущность метода

Метод мембранной фильтрации основан на фильтрации растворов через стерильные мембранные фильтры, на которых улавливается основное количество микроорганизмов, с последующим культивированием их в жидкой тиогликолевой среде и в жидкой среде Сабуро.

Преимущественно метод мембранной фильтрации используют для продукции, обладающей антимикробной активностью.

11.2 Проведение испытания

Фильтрование проводят в асептических условиях с использованием фильтрационной установки, включающей фильтровальные воронки с крышками, фильтродержатель, соединенный с колбой-приемником и насосом. Фильтродержатель состоит из фильтровального столика, на который помещают мембранный фильтр диаметром 47 мм и колбы приемника.

Примечание - Допускается использовать другое коммерчески доступное оборудование для проведения испытания на стерильность (например, "прибор Стеритест").

Фильтрование проводят под вакуумом 93,3 кПа и при скорости прохождения жидкости 55-75 см/мин.

Внутренние поверхности воронки фильтровальной установки и фильтровального столика смачивают раствором ректификованного этилового спирта объемной долей 96% и обжигают. После сгорания спирта и остывания воронки одну из воронок снимают.

Примечание - Использование одноразовых стерильных комплектов, состоящих из воронки и мембраны, позволяет исключить стадию стерилизации фильтровального прибора.

С помощью стерильного пинцета помещают мембранный фильтр на основание держателя фильтра, затем снова присоединяют фильтровальную воронку. При отключенном вакууме прибавляют 20-30 см стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора.

Пробу, подготовленную по 7.2, тщательно перемешивают и асептически переносят в воронку со стерильной дистиллированной водой или физиологическим раствором, включают вакуум и немедленно отфильтровывают.

Фильтрацию заканчивают в момент исчезновения влаги на поверхности фильтра. Дважды/трижды, при включенном вакууме, ополаскивают воронку 100 см стерильной дистиллированной водой. Вакуум отключают, снимают фильтровальную воронку и стерильным пинцетом переносят мембранный фильтр с основания. Мембранный фильтр разрезают стерильными ножницами пополам, и одну половину помещают в пробирку, содержащую жидкую среду Сабуро, а вторую половину - в пробирку, содержащую жидкую тиогликолевую среду. Важно, чтобы среда покрывала мембранный фильтр полностью.

Посевы в среде Сабуро инкубируют при температуре (22,5±2,5)°С, а посевы в тиогликолевой среде - при температуре (32,5±2,5)°С в течение 7 сут.