Применение в качестве национального стандарта РФ прекращено

ГОСТ 28038-89 Продукты переработки плодов и овощей. Методы определения микотоксина патулина (с Изменениями N 1, 2)

4. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

4.1.Требования безопасности при проведении испытания

Помещение, в котором проводится определение патулина, должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией.

Работу с хлором следует проводить в вытяжном шкафу лаборатории с использованием индивидуальных средств защиты (резиновые перчатки, защитные очки, фильтрующие респираторы РПГ-67-В или РУ-60 MB), а также с соблюдением правил личной гигиены.

4.1а. Калибровка спектрофотометра

Готовят растворы двухромовокислого калия СrО)=0,25·10 моль/дм, СrО)=0,125·10 моль/дм, СrО)=0,625·10 моль/дм в растворе серной кислоты (HSO )=0,018 моль/дм.

Раствор серной кислоты готовят следующим образом. В мерную колбу вместимостью 2000 см пипеткой вносят 1 см серной кислоты и доводят объем водой до метки. (Допускается использовать мерную колбу вместимостью 1000 см, соответственно уменьшив вдвое объем серной кислоты). Калибровочный раствор СrО)=0,25·10 моль/дм готовят следующим образом: 78 мг двухромовокислого калия вносят в мерную колбу вместимостью 1000 см, растворяют в 100-200 см раствора серной кислоты и доводят до метки раствором серной кислоты той же концентрации. Содержимое колбы тщательно перемешивают. Остальные калибровочные растворы готовят точным разведением первого раствора в 2 и в 4 раза раствором серной кислоты.

Определяют оптическую плотность каждого раствора в кювете с рабочей длиной 1 см на спектрофотометре при длине волны 350 нм. В качестве контрольного раствора используют раствор серной кислоты. По полученным значениям оптической плотности для каждого раствора вычисляют значение молярного показателя поглощения (), дм·моль·см, по формуле

,

     
где - оптическая плотность калибровочного раствора;


- молярная концентрация двухромовокислого калия в растворе, моль/дм;

- рабочая длина кюветы, см.

По полученным значениям рассчитывают среднее значение молярного показателя поглощения () и вычисляют поправочный коэффициент () для спектрофотометра по формуле

,

     
где - стандартизованное значение молярного показателя поглощения,


=3160 дм·моль·см.

(Введен дополнительно, Изм. N 2).

4.2. Приготовление первого стандартного раствора

В сосуд с патулином, содержащий около 5 мг препарата, вносят пипеткой 10 см смеси бензола с ацетонитрилом (9:1). Содержимое сосуда аккуратно взбалтывают до полного растворения кристаллов патулина и переносят в мерную колбу вместимостью 100 см. Сосуд ополаскивают еще двумя порциями по 10 см смеси бензола с ацетонитрилом (9:1), каждый раз перенося содержимое в ту же мерную колбу. Объем в колбе доводят до метки смесью бензола с ацетонитрилом (9:1), содержимое тщательно перемешивают. 20 см полученного раствора переносят в другую мерную колбу такой же вместимости. Объем в колбе доводят до метки смесью бензола ацетонитрилом (9:1), содержимое тщательно перемешивают. Полученный первый стандартный раствор хранят в холодильнике в закрытом сосуде. Срок годности раствора патулина - 6 мес.

Точную концентрацию патулина в первом стандартном растворе определяют спектрофотометрическим методом. Для этого пипеткой 6,0 см первого стандартного раствора переносят в отгонную колбу. Раствор упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре 35-40 °С. Сухой остаток растворяют в 9,0 см этилового спирта и определяют оптическую плотность слоя раствора в кювете с рабочей длиной 1 см по отношению к контрольному раствору на спектрофотометре при длине волны 275 нм. В качестве контрольного раствора используют этиловый спирт.

Массовую концентрацию патулина в стандартном растворе (), мкг/см, вычисляют по формуле

,

     
где - молярная масса патулина, =154 г/моль;


- оптическая плотность раствора;

- коэффициент разведения, =1,5;