Измеряемой величиной является разность в оптической плотности растворов до и после обработки ферментом при длинах волн 334, 340 или 365 нм, которая пропорциональна массовой концентрации (массовой доле) общего диоксида серы в анализируемой пробе.
Разницу значений оптических плотностей рассчитывают как
,
где - разница оптических плотностей стандартного раствора;
- разница оптических плотностей анализируемой пробы.
Разница оптических плотностей должна находиться в интервале от 0,1 до 0,5 ед. оптической плотности (измерения при длине волны 365 нм) или от 0,1 до 0,8 ед. оптической плотности (измерения при длинах волн 334 и 340 нм). При превышении указанных значений разности оптических плотностей раствор анализируемой пробы дополнительно разбавляют дистиллированной водой. При меньшей разности оптических плотностей (менее 0,1) объем анализируемой пробы, дозируемый в кювету по 5.2, увеличивают, а объем дистиллированной воды соответственно уменьшают так, чтобы объем анализируемой пробы в кювете оставался постоянным в соответствии с таблицей 2.
Массовую концентрацию общего диоксида серы в анализируемой пробе, мг/дм, рассчитывают по формуле
, (1)
где - окончательный объем растворов в кювете по таблице 2, см;
- молекулярная масса диоксида серы, 64,06 г/моль;
- молярный коэффициент поглощения НАДФН, л·ммол·см:
- при длине волны 340 нм - 6,3,
- при длине волны 365 нм - 3,5 (ртутная лампа),
- при длине волны 334 нм - 6,18 (ртутная лампа);
- толщина поглощающего слоя в кювете, см;
- объем анализируемой пробы по таблице 2, см;
- разница оптических плотностей.
При проведении анализа по 8.2 при толщине поглощающего слоя в кювете 1 см и объеме анализируемой пробы 0,10 см формула для расчета массовой концентрации общего диоксида серы , мг/дм, преобразуется следующим образом:
. (2)
Если проба предварительно была разбавлена по 7.3.4, результат необходимо умножить на фактор разбавления .
Массовую долю общего диоксида серы в пробе для твердых продуктов, млн, рассчитывают по формуле
, (3)
где - объем мерной колбы, использовавшейся при подготовке пробы, см;
- массовая концентрация общего диоксида серы в растворе, полученного в мерной колбе в результате подготовки пробы по 7.3.3 и определяемой по формуле (1), мг/дм;