Методические указания
по лабораторной диагностике клещевого энцефалита
Методические указания разработаны Институтом полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР при участии Омского научно-исследовательского института природно-очаговых инфекций Минздрава РСФСР.
Методические указания разрешается размножить в необходимом количестве экземпляров.
При заболевании человека более всего поражается нервная ткань, хотя наблюдаются поражения и других органов: печени, сердца, почек, селезенки, лимфатических узлов. Период циркуляции вируса в крови больного непродолжителен, обычно не превышает времени лихорадочного состояния. Вирус обнаруживают в первые дни лихорадки (3-5-й день) в крови, в спинно-мозговой жидкости, в мозгу умерших. Исчезновение вируса из крови происходит в процессе активации неспецифических и специфических элементов иммунной системы.
Тип иммунного ответа формируется в первые дни после контакта вирусного антигена с клетками иммунной системы, зависит от генетически обусловленной чувствительности организма и вирулентности штамма возбудителя. Иммунный ответ направлен не только против свободного вируса, но и против зараженных клеток, распознавание и разрушение которых до сборки в них инфекционных вирионов играет важную роль в выздоровлении. Лимфоциты, которым принадлежит ведущая роль в формировании специфического иммунитета, сенсибилизируются антигенами вируса. Степень сенсибилизации имеет прямую связь с последующим развитием патологического процесса и формой инфекции.
В крови заболевших КЭ появляются специфические антитела: первыми - иммуноглобулины класса М, которые затем постепенно заменяются иммуноглобулинами класса G. Тормозящие гемагглютинацию антитела нередко обнаруживают уже в первые дни заболевания. Их титр может достигать наивысшего уровня на II-III неделе от начала заболевания. В части случаев (до 30-40%) высокую их концентрацию определяют уже на I неделе. В отдельных случаях (1-3%) формирование антител настолько замедлено, что их выявляют лишь на VI-VII неделе в невысоком титре. Комплементсвязывающие антитела появляются несколько позже. В большинстве случаев на I неделе от начала заболевания они либо отсутствуют, либо их концентрация невелика. Однако у части больных (до 15%) высокий титр антител этого вида обнаруживают даже на I неделе. Наивысшие показатели накопления комплементсвязывающих антител обычно определяют на VI-IX неделях от начала болезни. В некоторой части случаев (до 60%) эти антитела отсутствуют вплоть до IV-V недели, вследствие замедленного их формирования. Вируснейтрализующие антитела обычно появляются в конце I - начале II недели. Титр их повышается на протяжении 3-4 недель и затем сохраняется без изменения в течение многих лет жизни переболевшего. Тормозящие гемагглютинацию антитела обычно присутствуют в крови реконвалесцентов несколько лет, их титр снижается постепенно, но иногда резко падает уже в стадии ранней реконвалесценции. Комплементсвязывающие антитела сохраняются в крови переболевших не так долго: уже через год после болезни у 40% реконвалесцентов их титр может снижаться до неопределяемого, у остальных они могут быть выявлены в течение разного срока вплоть до 7 лет. При определении антител иммуноферментным методом (ИФМ) специфические антитела обнаруживают несколько раньше, чем подавляющие гемагглютинацию, и в более высоких разведениях сывороток. Наивысшую концентрацию антител чаще всего выявляют на II-III неделе от начала заболевания. При быстром формировании иммунитета высокие показатели ИФМ можно получить уже в начале заболевания. В случаях замедленной продукции антител в иммуноферментном тесте можно выявить антитела при отрицательных показателях РТГА.
В некоторой части случаев заболевание КЭ наблюдается у лиц вакцинированных и естественно иммунизированных. Известны единичные случаи повторного заболевания КЭ. Недостаточная для полного предотвращения заболевания напряженность иммунитета может быть обусловлена свойствами вирусного штамма, количеством вируса, попавшего в организм, временным ослаблением резистентности организма или совокупностью этих факторов. Заболевания на фоне грундиммунитета, как правило, протекают в более легкой форме, специфические антитела выявляются уже в первые дни заболевания.
При диагностике КЭ оптимальным является выделение вируса от больного в острой стадии заболевания (вирусологическое обследование больного) и обнаружение нарастания титра специфических антител (серологическое исследование парных проб крови).