О дальнейшем совершенствовании мероприятий по профилактике клещевого энцефалита
Материалы для вирусологического и серологического обследования.
Сбор, транспортировка, хранение
Серологическими методами исследуют парные сыворотки крови: I пробу крови, взятую на I-II день обращения за медицинской помощью, до начала лечения специфическими сывороточными препаратами, II пробу - на III-IV неделе от начала заболевания. В случае отсутствия антител может быть проведено исследование III пробы крови, взятой по указанию лечащего врача через полтора-два месяца от начала болезни.
Вирусологическому исследованию подлежит 1 сыворотка (или плазма) крови или 10% суспензия сгустка крови в физиологическом растворе, а также спинно-мозговая жидкость, взятая с терапевтической целью. В случае летального исхода исследуют суспензии мозговой ткани, взятой из различных отделов головного, а также шейного и грудного отделов спинного мозга.
Кровь забирают из вены шприцем в количестве не менее 5 мл и переносят в стерильную пробирку. Для образования сгустка и лучшей его ретракции кровь выдерживают 30 минут при +37°С или 1-2 часа при комнатной температуре. Для получения плазмы в пробирку предварительно вносят гепарин из расчета 10 ME на 1 мл крови. Пробу направляют в лабораторию в термосе со льдом. Если это невозможно сделать в тот же день, то пробирку оставляют в холодильнике при температуре +4°С и отправляют в лабораторию через сутки. В лечебных учреждениях, находящихся в отдаленных от лаборатории районах, сыворотку крови необходимо отделить от сгустка и эритроцитов в тот же день, не допуская бактериального загрязнения, и хранить до отправления при температуре +4°С в плотно закрытых флаконах или пробирках.
В лаборатории сыворотку отсасывают стерильной пастеровской пипеткой и хранят в запаянных ампулах или флаконах с резиновыми пробками. При получении проб сывороток или плазмы, предназначенных для серологического обследования, нельзя допускать лизиса эритроцитов крови. Для этого перед розливом в ампулы или флаконы сыворотку (плазму) тщательно очищают от примеси эритроцитов с помощью центрифугирования или отстаивания при +4°С.
Материалы, предназначенные для первичного выделения или реизоляции вируса, желательно хранить до момента обследования в холодильниках при -60°С, контейнерах с сухим льдом (СО) или в жидком азоте. Менее приемлем для этих целей режим хранения при -20°С. Пробы сывороток, плазмы, спинно-мозговой жидкости перед обследованием на антитела в серологических реакциях можно сохранять длительное время (несколько месяцев) при +4°С или при отрицательной температуре. Надо иметь в виду, что в результате многократного замораживания и оттаивания материалов происходит снижение титров вируса и антител, что приводит к искажению данных обследования.
На каждую пробу, направляемую в лабораторию для серологического обследования, заполняется "Направление на анализ" (уч. ф.N 200/у) с указанием номера пробы (I, II).
Лаборатория должна обеспечить правильное хранение первых проб, пока будут собраны последующие. На ампулы с сывороткой или флаконы (емкостью 5 мл) с резиновыми пробками наклеивают этикетки с указанием лабораторного номера регистрации или очередности взятия пробы (I, II, III). Регистрацию материала, поступившего на анализ, производят в "Журнале регистрации серологических исследований" (уч. ф.N 259/у). Лабораториям областных СЭС целесообразно распределить записи следующим образом: отвести несколько страниц для каждого административного района, а больных областного города записывать в алфавитном порядке, отведя несколько страниц для каждой начальной буквы. Такая форма записи значительно упрощает регистрацию повторно поступившего материала.
Работа по сбору, хранению, транспортировке и вирусологическому обследованию материалов от больных КЭ и из природных очагов проводится при строгом соблюдении режима, обеспечивающего безопасность персонала (см. "Положение о порядке учета, хранения, обращения, отпуска и пересылки культур бактерий, вирусов, риккетсий, грибков, простейших, микоплазм, бактерийных токсинов, ядов биологического происхождения", Минздрав СССР, 1980, а также "Инструкцию о противоэпидемическом режиме работы с материалом, зараженным или подозрительным на зараженность возбудителями инфекционного заболевания I-II групп", Минздрав СССР, 1979).