Метод основан на принципе сорбции белков на твердой фазе с последующим образованием комплексов антиген-антитело, выявляемых субстрат-индикаторным раствором. Добавляемый затем в лунки антиген специфически связывается с антителами. На слой антигена наносят исследуемые сыворотки людей в нужных разведениях. При наличии в них специфических антител последние связываются с антигеном. Для выявления связывания на слой антител наносят иммуноглобулин против глобулинов сыворотки людей, конъюгированный с пероксидазой хрена. Количество сорбирующегося конъюгата пропорционально количеству связавшихся с антигеном антител сыворотки людей. Это можно определить по степени окрашивания, используя субстрат-индикаторный раствор (ортофенилендиамин + перекись водорода), компоненты которого в результате действия пероксидазы конъюгата окрашивают раствор в коричневато-желтый цвет.
Испытание ИФМ, проведенное в нескольких вирусологических лабораториях санэпидстанций в процессе обследования больных КЭ людей, вакцинированных и населения, показали, что этот метод может полностью заменить РТГА, РСК. С помощью ИФМ выявляют антитела к вирусу КЭ раньше и в более высоких разведениях сывороток, чем в РТГА, а также чаще определяют изменение напряженности специфического иммунитета, необходимое для подтверждения клинического диагноза.
Институтом полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР разработана "тест-система иммуноферментная для определения антител к вирусу клещевого энцефалита", представляющая собой комплект биологических и химических препаратов. Испытание нескольких серий этой тест-системы в ГИСК им.Л.А.Тарасевича Минздрава СССР подтвердили высокую чувствительность и специфичность ИФМ. Подготовлена инструкция по изготовлению и контролю тест-системы и инструкция по ее применению. Планируется выпуск коммерческого комплекта препаратов (тест-системы).