7 Подготовка к проведению анализа. Приготовление растворов
7.1 Растворы для обработки гелей при окрашивании кумасси голубым
7.1.1 Фиксирующий раствор: в колбу вместимостью 500 см помещают 100 г трихлоруксусной кислоты и доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор используют 3-4 раза.
7.1.2 Промывной раствор (обесцвечивающий): в колбу вместимостью 1000 см вносят 300 см
96%-ного этилового спирта, добавляют 600 см
дистиллированной воды и 100 см
ледяной уксусной кислоты. Раствор используют 3-4 раза.
7.1.3 Окрашивающие растворы состоят из основного и рабочего.
7.1.3.1 Основной раствор: в стеклянную плоскодонную колбу вместимостью 300 см помещают (0,400±0,001) г кумасси бриллиантового голубого, добавляют 80 см
дистиллированной воды и перемешивают в течение 10 мин. Затем добавляют 120 см
96%-ного этилового спирта и перемешивают в течение 5 мин.
7.1.3.2 Рабочий раствор: смешивают 10 см раствора по 7.1.3.1 с 90 см
раствора по 7.1.2, добавляют (0,170±0,001) г сернокислой 5-водной меди. Сульфат меди добавляют, чтобы уменьшить окрашивание фона. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.
7.1.4 Консервирующий раствор: в колбу вместимостью 1000 см вносят 40 см
глицерина, добавляют 920 см
дистиллированной воды и 40 см
уксусной ледяной кислоты.
7.1.5 Промывной раствор готовят в количестве не менее 400 см, фиксирующий, окрашивающий и консервирующий растворы - не менее 80 см
.
7.2 Растворы для обработки гелей при окрашивании серебром
7.2.1 Фиксирующий раствор: в колбу вместимостью 500 см помещают (100,00±0,01) г трихлоруксусной кислоты и доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор используют 3-4 раза.
7.2.2 Промывной раствор: в колбу вместимостью 1000 см вносят 100 см
96%-ного этилового спирта, добавляют 850 см
дистиллированной воды и 50 см
ледяной уксусной кислоты.
7.2.3 Раствор, усиливающий окраску (сенсибилизатор): в колбе вместимостью 100 см смешивают 30 см
25%-ного глутарового альдегида и 60 см
дистиллированной воды.
7.2.4 Окрашивающий раствор: в колбу вместимостью 100 см вносят (0,150 ±0,001) г азотнокислого серебра и доводят объем дистиллированной водой до метки.
7.2.5 Раствор, развивающий окраску (проявитель): в колбу вместимостью 1000 см вносят 200 см
12,5%-ного раствора углекислого натрия, 800 см
дистиллированной воды и 400 мкл 37%-ного формальдегида.
7.2.6 Раствор, останавливающий окраску: в колбу вместимостью 100 см вносят (1,60±0,01) г тиосульфата натрия и (3,70±0,01) г трис HCl и доводят объем дистиллированной водой до метки.
7.2.7 Консервирующий раствор: в колбу вместимостью 100 см вносят 10 см
глицерина и доводят объем дистиллированной водой до метки.
7.2.8 Промывной раствор готовят в количестве не менее 400 см. Фиксирующий, окрашивающий, проявляющий растворы и растворы, усиливающий окраску и останавливающий окраску, готовят в количестве не менее 80 см
. Количество дистиллированной воды - не менее 400 см
.