Статус документа
Статус документа

ГОСТ Р 52840-2007 Рыба и продукция из нее. Видовая идентификация рыбы методом изоэлектрофокусирования в полиакриламидном геле

     

     7 Подготовка к проведению анализа. Приготовление растворов

7.1 Растворы для обработки гелей при окрашивании кумасси голубым

7.1.1 Фиксирующий раствор: в колбу вместимостью 500 см помещают 100 г трихлоруксусной кислоты и доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор используют 3-4 раза.

7.1.2 Промывной раствор (обесцвечивающий): в колбу вместимостью 1000 см вносят 300 см 96%-ного этилового спирта, добавляют 600 см дистиллированной воды и 100 см ледяной уксусной кислоты. Раствор используют 3-4 раза.

7.1.3 Окрашивающие растворы состоят из основного и рабочего.

7.1.3.1 Основной раствор: в стеклянную плоскодонную колбу вместимостью 300 см помещают (0,400±0,001) г кумасси бриллиантового голубого, добавляют 80 см дистиллированной воды и перемешивают в течение 10 мин. Затем добавляют 120 см 96%-ного этилового спирта и перемешивают в течение 5 мин.

7.1.3.2 Рабочий раствор: смешивают 10 см раствора по 7.1.3.1 с 90 см раствора по 7.1.2, добавляют (0,170±0,001) г сернокислой 5-водной меди. Сульфат меди добавляют, чтобы уменьшить окрашивание фона. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.

7.1.4 Консервирующий раствор: в колбу вместимостью 1000 см вносят 40 см глицерина, добавляют 920 см дистиллированной воды и 40 см уксусной ледяной кислоты.

7.1.5 Промывной раствор готовят в количестве не менее 400 см, фиксирующий, окрашивающий и консервирующий растворы - не менее 80 см.

7.2 Растворы для обработки гелей при окрашивании серебром

7.2.1 Фиксирующий раствор: в колбу вместимостью 500 см помещают (100,00±0,01) г трихлоруксусной кислоты и доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор используют 3-4 раза.

7.2.2 Промывной раствор: в колбу вместимостью 1000 см вносят 100 см 96%-ного этилового спирта, добавляют 850 см дистиллированной воды и 50 см ледяной уксусной кислоты.

7.2.3 Раствор, усиливающий окраску (сенсибилизатор): в колбе вместимостью 100 см смешивают 30 см 25%-ного глутарового альдегида и 60 см дистиллированной воды.

7.2.4 Окрашивающий раствор: в колбу вместимостью 100 см вносят (0,150 ±0,001) г азотнокислого серебра и доводят объем дистиллированной водой до метки.

7.2.5 Раствор, развивающий окраску (проявитель): в колбу вместимостью 1000 см вносят 200 см 12,5%-ного раствора углекислого натрия, 800 см дистиллированной воды и 400 мкл 37%-ного формальдегида.

7.2.6 Раствор, останавливающий окраску: в колбу вместимостью 100 см вносят (1,60±0,01) г тиосульфата натрия и (3,70±0,01) г трис HCl и доводят объем дистиллированной водой до метки.

7.2.7 Консервирующий раствор: в колбу вместимостью 100 см вносят 10 см глицерина и доводят объем дистиллированной водой до метки.

7.2.8 Промывной раствор готовят в количестве не менее 400 см. Фиксирующий, окрашивающий, проявляющий растворы и растворы, усиливающий окраску и останавливающий окраску, готовят в количестве не менее 80 см. Количество дистиллированной воды - не менее 400 см.