МУК 4.1.2158-07 Определение остаточных количеств антибиотиков тетрациклиновой группы и сульфаниламидных препаратов в продуктах животного происхождения методом иммуноферментного анализа
4. Определение антибиотиков тетрациклиновой группы
4.1. Принцип метода ИФА
Базовым принципом для количественного определения антибиотиков тетрациклиновой группы в пищевых продуктах является твердофазный конкурентный иммуноферментный анализ на полистироловых планшетах. Метод основан на конкуренции свободного антибиотика из исследуемых образцов и антибиотика, предварительно адсорбированного на твердой фазе (лунке планшета) в составе белкового конъюгата, за центры связывания специфичных к тетрациклинам антител во вносимом растворе. После отделения не связавшихся реагентов количество антител, прореагировавших с иммобилизованным антигеном, определяют с помощью вторичных антивидовых антител, меченных пероксидазой хрена*. Количество связавшегося с антителами конъюгата вторичных антител определяют с помощью субстрат - хромогенной смеси. При этом количество определяемого антибиотика, содержащегося в исследуемом образце, обратно пропорционально регистрируемой оптической плотности продукта ферментативной реакции.
________________
* Текст соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.
4.2. Аппаратура, материалы, реактивы
Перечень и характеристики оборудования и материалов | Нормативные документы, примечания |
1 | 2 |
Фотометр планшетный вертикального сканирования, с фильтрами, соответствующими длине волны 450 нм | "Униплан", "Мультискан" или иного типа с теми же характеристиками |
Дозаторы пипеточные автоматические с переменным объемом 0,02-0,2 см | "Ленпипет", "Термолабсистемс" или иные тех же объемов |
Дозаторы пипеточные автоматические восьмиканальные с переменным объемом 0,05-0,3 см | |
Наконечники для автоматических пипеток объемом до 0,30 см | По спецификации изготовителя |
Анализатор потенциометрический, погрешность измерений рН ±0,01 или рН-м | ГОСТ 19881-74 или другие марки с аналогичными характеристиками |
Весы аналитические 120 г / 0,001 мг | ГОСТ 24104-88Е*** |
Весы лабораторные общего назначения, 2 класса точности, до 200 г / 0,1 г | ГОСТ 24104-88Е*** |
Гомогенизатор лабораторный | Типа "Ультратюрракс", "Диакс" или аналогичные |
Аквадистиллятор | В соответствии с ГОСТ 6709-72 |
Холодильник бытовой электрический | |
Стаканы химические и колбы мерные вместимостью 25, 50, 200 и 500 см | |
Пипетки градуированные, 2 класса точности 1, 2, 5, 10 см | ГОСТ 20292-74**** или аналогичные |
Часы механические сигнальные | |
Центрифуга настольная с эффективностью не менее 4000 g | По ТУ 5.375-4261 или иного типа |
Колонка для твердофазной экстракции RIDA | По спецификации изготовителя |
Цилиндры мерные вместимостью 25 см | По спецификации изготовителя |
Шейкер лабораторный для пробирок | Типа "Вортекс" |
Микроиспаритель лабораторный одноканальный | Моделей ПЭ-2300, "Мини-Вап" или других аналогичного назначения |
Насос (компрессор) мембранный | РКадет, РКадмирал или иных моделей аналогичного назначения |
Устройство для твердофазной экстракции | "Доркус", "Вакэлют" или иных моделей аналогичного назначения |
Аппарат универсальный для встряхивания | ТУ 64-1-2451-78 |
Шкаф (стол) лабораторный с вытяжным устройством | |
Набор реагентов для количественного определения тетрациклина типа "Ридаскрин Тетрациклин" | По спецификации изготовителя |
Дигидрофосфат натрия водный | хч** |
Гидрофосфат натрия | хч |
Гидрофосфат натрия двухводный | хч |
Хлорид натрия | хч |
Гидрооксид натрия | хч |
Моногидрат лимонной кислоты | хч |
Щавелевая кислота | хч |
ЭДТА-натриевая соль | хч |
Твин 20 | По спецификации изготовителя |
Метанол* или этанол 95,0% | хч |
Этилацетат | хч |
н-гексан | хч |
Ацетонитрил | хч |
Дистиллированная вода | |
метанол* - ядовитое вещество, требует мер безопасности при работе; хч** - химически чистые вещества | |
________________
*** На территории Российской Федерации действует ГОСТ 24104-2001;
**** Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91, здесь и далее. - Примечание изготовителя базы данных.