ГОСТ 13496.21-87

Группа С19

     

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ


КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

Методы определения лизина и триптофана

Feeds, mixed feeds and raw material. Methods for determining content of lisin and tryptophane

МКС 65.120

ОКСТУ 9209

Дата введения 1988-07-01

     

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Госагропромом СССР

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 27.05.87 N 1715

3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

5. Ограничение срока действия снято по протоколу N 2-92 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 2-93)

6. ПЕРЕИЗДАНИЕ. Март 2011 г.

Настоящий стандарт распространяется на все виды кормов, комбикорма и комбикормовое сырье и устанавливает хроматографические и колориметрический методы определения в них аминокислот лизина и триптофана.

Стандарт предназначается для научно-исследовательских учреждений, лабораторий агрохимической службы, республиканских и зональных лабораторий комбикормовой промышленности.

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1. Отбор проб - по ГОСТ 13496.0, ГОСТ 13586.3, ГОСТ 13979.0, ГОСТ 17681.

2. МЕТОД ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ (НА АВТОАНАЛИЗАТОРЕ АМИНОКИСЛОТ)

2.1. Сущность метода заключается в расщеплении пептидных связей белка соляной кислотой или щелочью при нагревании и избирательной сорбции аминокислот на ионообменнике жидкостной хроматографической колонки. При реакции с нингидриновым реактивом образуется окрашенный комплекс, интенсивность которого пропорциональна содержанию аминокислоты в растворе.

2.2. Средства испытаний

Для проведения испытания применяют:

измельчитель проб растений ИПР-2;

сушилку проб кормов СК-1 или шкаф сушильный лабораторный, обеспечивающий погрешность поддержания температуры не более 5 °С;

мельницу лабораторную марки МРП-2;

сито с отверстиями 11 мм или диаметром 1 мм;

весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с пределом взвешивания 200 и 500 г по ГОСТ 24104*;

________________

* С 1 июля 2002 г. вводится в действие ГОСТ 24104-2001. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008 (здесь и далее).

автоклав по ГОСТ 14106;

шкаф сушильный типа СЭШ-ЗМ или аналогичный с рабочей температурой 110 °С, максимальным перепадом температур 2 °С и периодическим колебанием температур в рабочей зоне ±0,5 °С;

аминокислотный анализатор;

устройство для выпаривания гидролизатов УВГ-1;

холодильник бытовой;

рН-метр 340;

дозатор стеклянный вместимостью 10 см;

газовую горелку однопламенную универсальную по ГОСТ 1077;

баллон с газом пропан-бутан;

ампулы стеклянные с перетяжкой вместимостью 20 см по ГОСТ 21400;

колбы мерные исполнений 1 и 2 вместимостью 50, 100, 1000 см 2-го класса точности по ГОСТ 1770;

пробирки стеклянные вместимостью 20 см по ГОСТ 1770;

пипетки градуированные исполнений 1, 2, 4, 5, 6 вместимостью 1, 2, 5, 10 см 2-го класса точности по ГОСТ 29227;

воронки стеклянные диаметром 4-6 см по ГОСТ 25336;

ступку фарфоровую;

фильтры беззольные с синей полосой диаметром 8 см по ГОСТ 12026;

набор реактивов к аминокислотному анализатору;

набор аминокислот стандартный;

кислоту соляную концентрированную по ГОСТ 3118, х. ч. и раствор соляной кислоты с концентрацией 6 моль/дм; готовят смешиванием равных объемов концентрированной соляной кислоты и дистиллированной воды (1:1);

спирт этиловый по ГОСТ 5962*;

________________

* В Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000 (здесь и далее).

бария гидроокись, 8-водную по ГОСТ 4107, х. ч.;

натрий углекислый безводный по ГОСТ 83, х. ч., раствор с массовой долей 10%;

натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 22280, х. ч. или ч. д. а.;

фенол;

натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х. ч., раствор с массовой долей 50%;

пропанол-2 (изопропиловый спирт);

воду дистиллированную по ГОСТ 6709.

Примечание. Допускается использовать аппаратуру, мерную посуду или другие мерные средства измерений, имеющие аналогичные метрологические характеристики.

2.3. Подготовка к испытанию

2.3.1. Подготовка проб

Среднюю пробу сена, сенажа, соломы или зеленой массы, отобранную по ГОСТ 27262, измельчают на отрезки длиной до 1-3 см. Корнеплоды разрезают на пластинки (ломтики) толщиной до 0,8 см. Методом квартований выделяют часть средней пробы, масса которой после высушивания должна быть не менее 100 г. Высушивание проб проводят в сушильном шкафу при температуре 60-65 °С до воздушно-сухого состояния. После высушивания воздушно-сухую пробу размалывают на мельнице и просеивают через сито. Остаток на сите измельчают ножницами или в ступке, добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

Средние пробы комбикормов, зерна, жмыхов, шротов, гранул, травяной муки или витаминной муки из древесной зелени размалывают без предварительного подсушивания и просеивают через сито.

Подготовленные пробы хранят в стеклянной или пластмассовой банке с крышкой в сухом темном месте.

2.3.2. Приготовление растворов и реактивов

2.3.2.1. Приготовление буферного раствора с рН 2,2