ГОСТ 12039-82 Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения жизнеспособности

3. МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ СЕМЯН
ОКРАШИВАНИЕМ ИХ ИНДИГОКАРМИНОМ И КИСЛЫМ ФУКСИНОМ

Метод основан на том, что живая плазма клеток зародыша непроницаема для раствора индигокармина, кислого фуксина и других анилиновых красителей, тогда как мертвая легко их пропускает и окрашивается.

3.1. Аппаратура, материалы и реактивы

3.1.1. Для проведения анализа применяют:

- весы лабораторные 1-4-го классов точности по ГОСТ 24104-80 с наибольшим пределом взвешивания до 200 г;

- лупу 7 увеличения;

- лезвие;

- иглу препаровальную;

- стаканчики химические по ГОСТ 23932-90;

- бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026-76;

- воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72;

- воду питьевую по ГОСТ 2874-82;

- индигокармин;

- фуксин кислый.

3.1.2. Приготовление водного раствора индигокармина

Для анализа применяют 0,1%-ный водный раствор индигокармина. Перед приготовлением 0,1%-ного раствора индигокармина устанавливают степень его растворимости. Для этого 1 г индигокармина растворяют в 1000 см воды при кипячении в течение 30 мин. Затем раствор фильтруют через предварительно взвешенный фильтр. Остаток нерастворившегося индигокармина вместе с фильтром высушивают до постоянной массы при температуре 100 °С - 105 °С. По разности массы высушенного фильтра с остатком индигокармина и чистого фильтра вычисляют количество растворившегося вещества, после чего определяют количество индигокармина, необходимое для 1000 см воды. Для получения 0,1%-ного раствора индигокармина установленное его количество кипятят в 1000 см воды в течение 30 мин, после чего раствор охлаждают и фильтруют. Фильтрат доводят до 1000 см, доливая кипяченую воду.

3.1.3. Приготовление водного раствора кислого фуксина

Для анализа применяют 0,1%-ный водный раствор кислого фуксина. В 1000 см свежепрокипяченной и охлажденной воды растворяют 1 г кислого фуксина. Раствор хранят в стеклянной посуде и используют в день приготовления.

3.2. Проведение анализа

3.2.1. Семена замачивают в воде при комнатной температуре по п.2.2.1. Затем острым лезвием каждое семя разрезают на две половинки. Поверхность среза должна быть ровной. Для этого разрез делают скользящим движением лезвия, начиная с зародыша. Половинки семян промывают несколько раз водой, чтобы удалить остатки разрушенных тканей с поверхности среза. Промытые половинки заливают 0,1%-ным раствором индигокармина или кислого фуксина так, чтобы они полностью были покрыты раствором, причем стаканчики осторожно встряхивают, чтобы раствор проник к срезам. Семена конопли, редиса и капусты окрашивают целыми.

3.2.2. Окрашивание семян в растворе индигокармина или кислого фуксина проводят в течение времени, указанного в табл.2.

Таблица 2

3.2.3. После окрашивания раствор сливают, половинки семян несколько раз промывают водой до исчезновения краски в промывной воде, раскладывают на фильтровальную бумагу и просматривают.

3.2.4. К жизнеспособным относят половинки семян или целые семена с неокрашенным зародышем, а также со слабо окрашенным кончиком корешка зародыша и слабо окрашенными пятнами на корешках и семядолях.

3.2.5. К нежизнеспособным относят половинки семян или целые семена с окрашенным зародышем, а также с интенсивно окрашенными большими пятнами на зародыше (корешках и семядолях).