ГОСТ Р 53693-2009 Продукция соковая. Определение аскорбиновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     7 Проведение измерений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

7.1 Условия хроматографического анализа

Колонка аналитическая длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная октадецилсиликагелем, размер частиц 5 мкм (RP 18) по 4.3.

Элюент: раствор дигидрофосфата натрия 0,1 моль/дм по 4.20.

Температура колонки: комнатная.

Длина волны детектора 243 нм (для спектрофотометра) или диапазон 200-350 нм (для фотодиодной матрицы).

Скорость потока подачи элюента: 0,65 см/мин (ориентировочное значение).

Объем вводимой пробы: 10-20 мкл.

7.2 Условия проведения измерений

Измерения проводят при следующих лабораторных условиях:

7.3 Построение градуировочной зависимости

Проводят хроматографический анализ всех градуировочных растворов.

Регистрируют площади пиков аскорбиновой кислоты и строят градуировочный график - зависимость площади пика от массовой концентрации или массовой доли аскорбиновой кислоты в градуировочном растворе.

Процедуры построения градуировочной зависимости выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации оборудования и руководством пользователя программным обеспечением.

Градуировочную зависимость выражают линейным уравнением

.                                                        (1)

Правильность построения градуировочной зависимости контролируется значением достоверности аппроксимации ():

0,9997.

Из уравнения (1) следует, что площадь пиков стандартных растворов аскорбиновой кислоты (mAU·c или AU·с) и их массовая концентрация (мг/дм) или массовая доля (млн) находятся в соответствующей функциональной зависимости

,                                                          (2)

где - градуировочный коэффициент, [мг/дм/mAU·с], вычисляемый по формуле

,                                                  (3)

где - площадь пика аскорбиновой кислоты при анализе -го стандартного раствора;