ГОСТ 32195-2013
(ISO 13903:2005)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА

Метод определения содержания аминокислот

Feeds, compound feeds. Method for determination of amino acids

МКС 65.120

Дата введения 2015-07-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Открытым акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт комбикормовой промышленности" (ОАО "ВНИИКП") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (ТК 004)

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 14 ноября 2013 г. N 44)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 22 ноября 2013 г. N 2063-ст межосударственный стандарт ГОСТ 32195-2013 (ISO 13903:2005) введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2015 г.

5 Настоящий стандарт является модифицированным по отношению к международному стандарту ISO 13903:2005* "Корма для животных. Определение содержания аминокислот" ("Animal feeding stuffs - Determination of amino acids content", MOD) путем изменения отдельных фраз (слов, значений показателей, ссылок), которые выделены в тексте курсивом**.

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

** В оригинале обозначения и номера стандартов и нормативных документов в разделах "Предисловие", "Отбор проб", в приложении ДА и в примечаниях приводятся обычным шрифтом.  - Примечание изготовителя базы данных.    

Международный стандарт разработан Подкомитетом ISO/TC 10 "Корма для животных" Технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 "Пищевые продукты" Международной организации по стандартизации (ISO).

Дополнительные примечания, разделы, приложение и таблица выделены полужирным курсивом*.

В настоящем стандарте заменены единицы измерения объема "литр" на "кубический дециметр", "миллилитр" на "кубический сантиметр" для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5-2001, пункт 4.14.1.

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6).

Сравнение структуры международного стандарта со структурой межгосударственного стандарта приведено в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июнь 2020 г

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
     
     В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

     1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на корма, комбикорма, премиксы и устанавливает метод определения содержания свободных (синтетических и натуральных) аминокислот и общего содержания (свободных и связанных форм в сумме) отдельных аминокислот с применением аминокислотного анализатора или ВЭЖХ-оборудования. Метод позволяет определять следующие аминокислоты:

- цистин и цистеин в сумме;

- метионин;

- лизин;

- треонин;

- аланин;

- аспарагиновую кислоту;

- глутаминовую кислоту;

- глицин;

- гистидин;

- изолейцин;

- лейцин;

- фенилаланин;

- пролин;

- серин;

- тирозин;

- валин.

Методом нельзя различить соли аминокислот, а также D- и L-стереоизомеры.

Метод не распространяется на определение триптофана или гидрокси-аналогов аминокислот. Нижние пределы обнаружения и количественного определения аминокислот зависят от хроматографического оборудования и составляют:

а) для свободных форм аминокислот:

1) лизина - 0,035 г/кг;

2) метионина - 0,035 г/кг;

3) треонина - 0,03 г/кг;

б) для общего содержания (свободных и связанных форм в сумме) отдельных аминокислот:

1) лизина - 0,3 г/кг;

2) метионина - 0,25 г/кг;

3) суммы цистина и цистеина - 0,35 г/кг;

4) треонина - 0,2 г/кг.

Примечание - Нижний предел количественного обнаружения может быть изменен, но это должно быть подтверждено пользователем.

     2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения).

ГОСТ 177 Водорода перекись. Технические условия
     
     ГОСТ 1770 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
     
     ГОСТ 3118 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия
     
     ГОСТ 4204 Реактивы. Кислота серная. Технические условия
     
     ГОСТ 4233 Реактивы. Натрий хлористый. Технические условия
     
     ГОСТ 4328 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия
     
     ГОСТ 4478 Реактивы. Кислота сульфосалициловая 2-водная. Технические условия
     
     ГОСТ 5848 Реактивы. Кислота муравьиная. Технические условия
     
     ГОСТ 9293 (ИСО 2435-73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия
     
     ГОСТ 13496.0 Комбикорма, комбикормовое сырье. Методы отбора проб
     
     ГОСТ 22280 Реактивы. Натрий лимоннокислый 5,5-водный. Технические условия
     
     ГОСТ 24104 Весы лабораторные. Общие технические требования

________________

В Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".

ГОСТ 25336 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
     
     ГОСТ 29227 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов и классификаторов на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (www.easc.by) или по указателям национальных стандартов, издаваемым в государствах, указанных в предисловии, или на официальных сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. Если на документ дана недатированная ссылка, то следует использовать документ, действующий на текущий момент, с учетом всех внесенных в него изменений. Если заменен ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, то следует использовать указанную версию этого документа. Если после принятия настоящего стандарта в ссылочный документ, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение применяется без учета данного изменения. Если ссылочный документ отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

     3 Сущность метода

3.1 Определение свободных форм аминокислот

Свободные формы аминокислот экстрагируют разбавленной соляной кислотой. Экстрагированные вместе с аминокислотами азотистые макромолекулы осаждают сульфосалициловой кислотой и отфильтровывают. Фильтрат доводят до значения 2,20 ед. рН.

Аминокислоты разделяют ионообменной хроматографией, проводят реакцию с нингидрином и определяют их содержание фотометрическим детектированием при длине волны 570 нм.

3.2 Определение общего содержания (свободных и связанных форм в сумме) отдельных аминокислот

Сущность выбранного метода зависит от определяемых отдельных аминокислот.

Перед гидролизом цистин (цистеин) и метионин должны окисляться до цистеиновой кислоты и метионин сульфона соответственно.

Тирозин должен определяться в гидролизатах неокисленных проб.

Все другие аминокислоты, указанные в разделе 1, могут определяться как в окисленных, так и неокисленных пробах. Окисление проводят при температуре 0°С смесью надмуравьиной кислоты с фенолом. Избыточный окислитель разлагается дисульфидом натрия. Окисленные или неокисленные пробы подвергают гидролизу с соляной кислотой молярной концентрации 6 моль/дм в течение 23 ч. Гидролизат доводят до 2,20 ед. рН. Аминокислоты разделяют ионообменной хроматографией, дериватизируют нингидрином и детектируют при длине волны 570 нм (440 нм для пролина).

     4 Лабораторные оборудование, посуда и материалы

4.1 Колбы круглодонные К-1(2)-100(250)-19/26(29/32,34/36)-ТХС по ГОСТ 25336.

4.2 Емкость из боросиликатного стекла вместимостью 100 см с завинчивающейся крышкой с резиновой или тефлоновой прокладкой (например, Duran, Schott) термостойкая.

4.3 Шкаф сушильный с принудительной вентиляцией и регулируемой температурой (110±2)°С.

4.4 рН-метр, с погрешностью определения не более ±0,001 ед. рН.

4.5 Фильтр мембранный с размером пор 0,2 мкм.

4.6 Центрифуга.

4.7 Испаритель вакуумный роторный.