ГОСТ 34677-2020 Продукты пищевые, продовольственное сырье. Иммуноферментный метод определения остаточного содержания линкозамидов (с Поправками)

     8 Проведение иммуноферментного анализа

8.1 Общие положения

8.1.1 Замена компонентов набора реагентов на реагенты из тест-систем других партий не допускается.

8.1.2 Окрашивание раствора хромогена (см. приложение А) является признаком порчи и делает невозможным его применение для анализа.

8.1.3 На всех стадиях проведения анализа необходимо избегать воздействия прямого солнечного света.

8.1.4 Для каждого реактива и раствора используют отдельные съемные наконечники пипеточных дозаторов переменной вместимости. Внесение растворов в лунки проводят осторожно, не касаясь наконечниками их дна и стенок.

8.1.5 Каждый раствор экстрактов проб (см. 7.4) и рабочие градуировочные растворы (см. 7.2.6.2) анализируют в двух повторностях (для каждой пробы проводят два параллельных анализа, одновременно подвергнутых процедуре подготовки по 7.4).

8.2 Подготовка тест-системы к проведению анализа

8.2.1 Перед использованием тест-систему вынимают из холодильника и выдерживают не менее 30 мин при температуре от 18°С до 25°С.

8.2.2 Оставшиеся стрипы* планшета незамедлительно помещают в оригинальную упаковку, закрывают и убирают в холодильник.

________________

* Стрип - полоска из восьми лунок.

Примечание - Приведены расходы реактивов на три стрипа, что достаточно для анализа четырех проб. Для другого числа проб количество используемых стрипов и смешиваемых объемов реагентов изменяют в соответствии с количеством анализируемых проб.

8.3 Проведение анализа

8.3.1 Из планшета извлекают необходимое число стрипов. Неиспользованные стрипы тщательно заклеивают пленкой для заклеивания планшетов и хранят в закрытом фольгированном полиэтиленовом пакете с зип-локом** при температуре от 2°С до 8°С в течение всего срока годности тест-системы.

________________

** Зип-лок - замок, обеспечивающий герметизацию пакета.

8.3.2 В лунки планшета вносят по 0,05 см рабочих градуировочных растворов - (см. 7.2.6.2) и растворов анализируемых проб.

Каждый раствор вносят в двойной повторности (лунки-дубли).

Внесение растворов проводят согласно приложению Б.

Далее в каждую лунку вносят по 0,05 см рабочего раствора ФК (см. 7.2.8). Содержимое лунок аккуратно перемешивают постукиванием по ребру планшета. Стрипы заклеивают пленкой или закрывают крышкой, инкубируют при температуре от 18°С до 25°С в течение 1 ч в защищенном от света месте, после чего содержимое лунок сливают.

8.3.3 В лунки планшета вносят по 0,2 см раствора ОТ (см. 7.2.7), оставляют на 1-2 мин и сливают, удаляют остатки жидкости путем легкого постукивания рамки с лунками по поверхности стола, накрытого листом сухой фильтровальной бумаги. Процедуру промывания повторяют еще два раза.

8.3.4 В лунки планшета вносят по 0,1 см раствора РС (см. 7.2.9), аккуратно перемешивают легким постукиванием по ребру планшета и инкубируют в темноте при температуре от 18°С до 25°С в течение 15 мин.

8.3.5 Добавляют по 0,1 см стоп-реагента N 6 (см. приложение А), аккуратно перемешивают легким постукиванием по ребру планшета.

8.3.6 Помещают планшет в иммуноферментный анализатор и измеряют значения ОП при длине волны 450 нм. Измерение необходимо провести в течение 30 мин после добавления стоп-реагента N 6. Значения допускаемого относительного расхождения между двумя измерениями ОП экстрактов анализируемых проб и рабочих градуировочных растворов не должно превышать 10%.