ГОСТ 33538-2015 Защита растений. Методы выявления и учета поврежденных зерен злаковых культур клопами-черепашками

     5 Биохимический метод выявления зерен, поврежденных клопами-черепашками

5.1 Сущность метода

Сущность биохимического метода заключается в выявлении изоэлектрическим фокусированием специфичных для клопов-черепашек сериновых протеиназ с ИЭТ от 6,0 до 7,5 в поврежденных зернах с помощью глютениновой реплики за счет гидролиза ими глютенина.

5.2 Средства измерений, аппаратура, реактивы, материалы и посуда

Весы неавтоматического действия высокого класса точности по ГОСТ OIML R 76-1 с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,01 г.

Источник проходящего и рассеянного света.

Камера холодильная с диапазоном температур от 2°С до 5°С по ГОСТ 26678.

Качалка роторная.

Мешалка магнитная.

Мешалка роторная.

Прибор для горизонтального электрофореза с терморегулируемым столиком, программируемым источником питания с электрическим напряжением 2000 В.

Термостат воздушный с диапазоном рабочих температур от 28°С до 55°С и погрешностью стабилизации температуры в опорной точке рабочей камеры и установившемся режиме ±0,25°С.

Центрифуга лабораторная со скоростью вращения не менее 10000 об/мин с адаптером для пластиковых пробирок с крышкой вместимостью 0,5 см.

Центрифуга лабораторная со скоростью вращения не менее 5000 об/мин для пробирок вместимостью 50-250 см.

Фотоаппарат цифровой с возможностью макросъемки, разрешением матрицы не менее 0,3 мегапикселей и чувствительностью ISO не менее 100.

Ацетон по ГОСТ 2603.

Буфер Трис-HCI молярной концентрации 50 ммоль/дм с pH 8,5.

Буферы электродные:

- анодный - стандартный раствор смеси аспарагиновой кислоты молярной концентрации 20 ммоль/дм и глутаминовой кислоты молярной концентрации 20 ммоль/дм;

- катодный - стандартный раствор смеси лизина молярной концентрации 20 ммоль/дм и аргинина молярной концентрации 20 ммоль/дм.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Глицерин по ГОСТ 6259.

Детергент, представляющий собой 0,01%-ный раствор неионного поверхностно-активного вещества.

Йод по ГОСТ 4159.

Кислота уксусная по ГОСТ 61.

Натрий хлористый по ГОСТ 4233.

Раствор цветных белков-маркеров ИЭТ - цитохрома с и миоглобина лошади с ИЭТ 10,6 и 7,3 соответственно.

Спирт этиловый по ГОСТ 17299 или ГОСТ 5962.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.