ГОСТ 32587-2013 Зерно и продукты его переработки, комбикорма. Определение охратоксина А методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (с Поправкой)
5 Метод A
5.1 Сущность метода
Метод основан на экстракции охратоксина A из анализируемой пробы продукта подкисленным хлороформом, скрининге проб, которые могут содержать охратоксин A, очистке их экстрактов методом колоночной хроматографии на силикагеле и определении массовой доли охратоксина A с применением ВЭЖХ с флуориметрическим детектированием.
5.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, стандартные образцы, реактивы, посуда и материалы
5.2.1 Хроматограф жидкостный с флуориметрическим или спектрофлуориметрическим детектором, обеспечивающим возбуждение флуоресценции в спектральной области (330±20) нм и регистрацию интенсивности флуоресценции в спектральной области (465±20) нм. Применяемый детектор должен обеспечивать предел обнаружения охратоксина A не более 5 нг/см.
5.2.2 Весы неавтоматического действия по ГОСТ OIML R 76-1-2011 с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,01 г.
5.2.3 Колонка хроматографическая аналитическая, заполненная обращенно-фазовым сорбентом зернением 5 мкм, имеющая эффективность не менее 5000 теоретических тарелок по пику охратоксина A*.
________________
* Пример коммерческого продукта, удовлетворяющего указанным требованиям - хроматографическая колонка внутренним диаметром 2,1 мм и длиной 120 мм, заполненная обращенно-фазовым сорбентом Кромасил С-18 с размером частиц 5 мкм, снабженная предколонкой длиной 25 мм. Эта информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является поддержкой указанного продукта.
5.2.4 Предколонка того же внутреннего диаметра и заполненная тем же обращенно-фазовым сорбентом, что и аналитическая колонка.
5.2.5 Колонка хроматографическая стеклянная с пришлифованной пробкой длиной 200 мм и внутренним диаметром 10 мм.
5.2.6 Измельчитель проб, обеспечивающий измельчение до частиц размером менее 1 мм, например лабораторная мельница.
5.2.7 Испаритель ротационный типа ИР-1М2 или аналогичный, снабженный водяной баней с регулятором температуры в диапазоне от 20°С до 50°С.
5.2.8 Устройство для перемешивания проб (шейкер), обеспечивающее частоту встряхивания до 120 мин.
5.2.9 Насос лабораторный вакуумный, мембранный или водоструйный по ГОСТ 25336, обеспечивающий разрежение от 2,5 до 10 кПа.
5.2.10 Шкаф сушильный, обеспечивающий температуру до 200°С.
5.2.11 Холодильник бытовой по ГОСТ 16317.
5.2.12 Стандартный образец состава раствора охратоксина A в ацетонитриле массовой концентрации 50 мкг/см с допускаемой погрешностью ±2,5 мкг/см
. Допускается применение стандартных образцов состава раствора охратоксина A в других растворителях, что должно быть учтено при приготовлении исходного раствора по 5.3.3.1.
5.2.13 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода для лабораторного анализа степени чистоты 1 по ГОСТ ISO 3696.
5.2.14 Натрий сернокислый по ГОСТ 4166, безводный.
5.2.15 Кислота уксусная по ГОСТ 61, ледяная.
5.2.16 Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, оптическая плотность относительно дистиллированной воды при 200 нм не более 0,025, массовая доля воды не более 0,03%.
5.2.17 Гексан для жидкостной хроматографии, ос.ч.
5.2.18 Хлороформ по ГОСТ 20015, очищенный.
5.2.19 Кислота муравьиная по ГОСТ 5848, ч.
5.2.20 Кислота серная по ГОСТ 4204, ч.д.а.
5.2.21 Азот газообразный по ГОСТ 9293.
5.2.22 Пипетки градуированные типов 1-3 исполнений 1(1а) или 2(2а) 2-го класса точности вместимостью 1, 2, 5 см по ГОСТ 29227.
5.2.23 Цилиндры мерные исполнений 1-4 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 250 см по ГОСТ 1770.
5.2.24 Колбы мерные 2-25-2, 2-50-2, 2-100-2, 2-500-2 по ГОСТ 1770.