ГОСТ 31959-2012 (ISO 14669:1999) Вода. Методы определения токсичности по выживаемости морских ракообразных

     5 Метод определения токсичности исследуемых объектов по выживаемости морских ракообразных видов Acartia tonsa Dana, Tisbe battagliai Volkmann-Rocco, Nitocra spinipes Boeck (Copepoda, Crustacea) (метод Б)*

________________

* Слова "исследуемых объектов"; "Acartia tonsa"; "Tisbe battagliai"; "Nitrocra spinipes"; "(метод Б)" в наименовании раздела 5 в бумажном оригинале выделены курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.

5.1 Сущность метода

Сущность метода заключается в регистрации гибели морских ракообразных видов Acartia tonsa Dana, Tisbe battagliai Volkmann-Rocco, Nitocra spinipes Boeck (Copepoda, Crustacea) в анализируемой пробе исследуемого объекта относительно контрольной пробы, определении ее токсичности и токсикологических показателей при тестировании в течение 48 ч.

Среднюю летальную кратность разбавления за 48 ч тестирования, вызывающую гибель 50% тест-организмов, обозначают 48 ч ; среднюю летальную концентрацию - 48 ч .

Примечание - Допускается проводить определение средней летальной кратности разбавления проб сточной воды (концентрации вещества), вызывающей гибель 50% тест-организмов за 24 ч [24 ч ЛКР50 (24 ч ЛК50)], или при увеличенной продолжительности тестирования до 96 ч [96 ч ЛКР50 (96 ч ЛК50)].

5.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, материалы - по 4.2 со следующими дополнениями:

Контейнеры для тестирования из химически инертных материалов [например, стеклянные химические стаканы (или чашки Петри) по ГОСТ 25336] и одноразовые чашки Петри из твердого полимерного материала с ячейками для культур организмов.

Примечание - Для снижения испарения анализируемых растворов рекомендуется для контейнеров использовать неплотно прилегающие широкие крышки.

Для ранних стадий жизненного цикла тест-организмов могут быть использованы специальные контейнеры, приспособленные для наблюдений с использованием микроскопа.

Тест-организмы: морские ракообразные видов:

- Acartia tonsa Dana;

- Tisbe battagliai Volkmann-Rocco;

- Nitocra spinipes Boeck.

Примечания

1 Для тестирования используют культуру тест-организмов одного из указанных видов.

2 Тест-организмы получают путем их культивирования в лабораторных условиях в соответствии с требованиями приложения В.

После откладывания яиц жизненный цикл тест-организмов состоит из стадий развития науплиев, копеподитов и взрослых особей. Возраст и стадия жизненного цикла тест-организма по состоянию на начало тестирования должны быть указаны в протоколе испытаний следующим образом:

- Acartia tonsa Dana: крупные копеподиты (стадия 5) или взрослые особи;

- Tisbe battagliai Volkmann-Rocco: копеподиды в возрасте (6±2) сут;

- Nitocra spinipes Boeck: взрослые особи в возрасте от 3 до 4 недель.

Модельный токсикант: 3,5-дихлорфенол, ч.д.а или по 4.2.

Морская вода (далее - вода для разбавления) - по 4.2.

Примечания

1 При тестировании по методу Б для применяемых тест-организмов недостаточно информации о возможности использования искусственной морской воды.     

2 Использование воды для разбавления (природной морской воды) с более низкой соленостью, что больше подходит для испытаний устьевой (опресненной) или жесткой воды, должно быть отражено в протоколе испытаний.

3 Nitocra spinipes Boeck допускается использовать при минерализации воды менее 1 г/дм (солености менее 1‰), a Tisbe battagliai Volkmann-Rocco - для воды с минерализацией до 20 г/дм (солености до 20‰).

Перед началом тестирования тест-организмы культивируют и выдерживают не менее 7 сут в природной морской воде такой же солености (при допускаемом предельном отклонении ±3‰), что и анализируемые пробы.