МУ 3.5.2435-09 Методы изучения и оценки спороцидной активности дезинфицирующих и стерилизующих средств
3. Тест-микроорганизмы для изучения и оценки спороцидной активности ДС, СС и их субстанций
При изучении спороцидной активности ДС и их субстанций в качестве тест-микроорганизмов используют:
Bacillus cereus, шт. 96;
Bacillus subtilis, шт. 7;
сибиреязвенная живая сухая вакцина СТИ-1 для людей;
Bacillus anthracis, шт. 81/1 (рХ01
, рХ02
), или шт. 27 (рХ01
, рХ02
).
При изучении спороцидной активности СС и их субстанций в качестве тест-микроорганизмов используют:
Bacillus cereus, шт. 96;
Bacillus subtilis, шт. 7;
Bacillus licheniformis, шт. G BKM В-1711D;
Geobacillis stearothermophilis, шт. BKM B-718.
Тест-микроорганизмы выбирают в зависимости от действующего вещества (ДВ) и от назначения спороцидного ДС, СС и его субстанции.
3.1. Требования к тест-микроорганизмам
Тест-микроорганизмы должны иметь типичные морфологические, культуральные, биохимические свойства, присущие данному виду (прилож.1), и обладать стандартной устойчивостью к эталонным ДС и СС [10]: хлорамину 10%, перекиси водорода 6%, глутаровому альдегиду 2,5% (рН 7,2), сухому горячему воздуху при (160±3) °С, водяному текучему пару при 100 °С, водяному насыщенному пару под избыточным давлением при (121±1) °С.
Показатели устойчивости тест-микроорганизмов к вышеперечисленным средствам приведены в табл.1.
Таблица 1
Устойчивость спор тест-микроорганизмов к эталонным дезинфицирующим и стерилизующим средствам
Тест-культура | Время гибели тест-микроорганизмов, не менее (мин), при действии | ||||||
название и штамм | количество спор в тест-объекте | хлорамина 10% | перекиси водорода 6% | глутарового альдегида 2,5% | сухого горячего воздуха (160±3) °С | водяного текучего пара (100 °С) | водяного насыщенного пара под избыточным давлением (121±1) °С |
Тест-микроорганизмы для изучения и оценки дезинфицирующих средств и их субстанций | |||||||
Bacillus cereus, шт. 96 | (1-5)·10 | 360 | 60 | 60 | - | 6-7 | - |
Bacillus subtilis, шт. 7 | (1-5)·10 | 360 | 60 | 180 | - | 6-7 | - |
Сибиреязвенная живая сухая вакцина СТИ-1 для людей | (1-5)·10 | 360 | 60 | 60 | - | 6-7 | - |
Bacillus anthracis, шт. 81/1 или 27 | (1-5)·10 | 360 | 60 | 60 | - | 6-7 | - |
Тест-микроорганизмы для изучения и оценки стерилизующих средств и их субстанций | |||||||
Bacillus cereus, шт. 96 | (1-5)·10 | 360 | 60 | 60 | - | 6-7 | - |
Bacillus subtilis, шт. 7 | (1-5)·10 | 360 | 60 | 180 | - | 6-7 | - |
Bacillus licheniformis G BKM B-1711D | (1-5)·10 | - | - | - | 30 | - | - |
Geobacillis stearothermophilis, шт. BKM B-718 | (1-5)·10 | - | - | - | - | - | 15 |
Дальнейшие исследования проводят с использованием наиболее устойчивого к проверяемому ДС тест-микроорганизма.
Музейные штаммы тест-микроорганизмов хранят в холодильнике при температуре (6±2) °С в виде сухой культуры в ампулах (после лиофильной сушки) не более двух лет [13].
Тест-микроорганизмы, не обладающие указанной устойчивостью, подлежат замене.
Спороцидную активность ДС, СС и их субстанций определяют, используя тест-микроорганизмы в споровой форме [12].
3.2. Методика приготовления суспензии спор тест-микроорганизмов