Методические указания по санитарно-химическому исследованию резин и изделий из них, предназначенных для контакта с пищевыми продуктами

4. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ BEЩECTB,
ВЫДЕЛЯЮЩИХСЯ ИЗ РЕЗИН

Исследование уровня миграции индивидуальных химических веществ проводят методом ТСХ, фотометрическим и др.

Для анализа используются реактивы квалификации "ОЧ", "ч.д.а.", "х.ч.".

4.1. Общие приемы работы методом тонкослойной хроматографии (ТСХ).

Данный метод используется для определения ускорителей, стабилизаторов, пластификаторов и др. в вытяжках из резин.

4.1.1. Краткое описание метода [1-6].

Тонкослойная хроматография занимает особое место среди методов разделения благодаря простоте и доступности оборудования. ТСХ - вид жидкостной хроматографии, в которой роль подвижной фазы (ПФ) выполняет жидкая фаза, а разделение смеси веществ происходит на тонком слое сорбента по мере ее продвижения. Анализируемые вещества наносят в одну точку на линию старта на расстоянии 1,5-2 см от края хроматографической пластинки в виде пятен диаметром не более 0,5 см или полоской длиной 8-10 мм, шириной 2-4 мм. Справа и слева от пробы наносят растворы "свидетелей" - стандартные растворы искомых веществ в количествах, соответствующих диапазону определяемых концентрацией. Разделение проводят в хроматографической камере, на дно которой налит слой ПФ толщиной около 0,5 см.

После подъема ПФ примерно на 10 см пластинку вынимают, отмечают границу подъема ПФ (линия фронта растворителя) и сушат на воздухе.

Определяемые вещества на пластинке обнаруживают одним из двух способов:

1) пластинку просматривают в УФ свете при длинах волн 254 или 366 нм, отмечая цвет и контуры светящихся пятен;

2) пластинку опрыскивают (проявляют) соответствующими для каждого класса соединений проявляющими реагентами. Определяемые вещества проявляются в виде окрашенных пятен. Положение пятен на хроматограмме характеризуется величиной .

- является качественной характеристикой положения вещества специфичной для него в выбранных хроматографических условиях.

- это отношение расстояния между стартом и центром зоны (пятна) к расстоянию от старта до фронта растворителя. На рис.1 представлена хроматограмма и расчет величины

Рис.1 Схема разделения смеси вещества

           
      - линия старта

      и - центры локализации зон (пятен) веществ

      - линия фронта

     1, 2 - точки нанесения индивидуальных веществ ("свидетели")

     3 - точка нанесения смеси веществ 1, 2

Идентификацию веществ проводят путем сравнения окраски пятен и величины пробы с окраской пятен и величиной "свидетелей". Наличие на пластинке при хроматографировании пробы пятна, совпадающего по величине и окраски с пятном "свидетеля" указывает на присутствие искомого соединения.

4.2. Количественное определение анализируемых веществ.

Содержание вещества в пробе на хроматограмме определяют двумя путями:

1) путем визуального сравнения размера и интенсивности окраски определяемого вещества в пробе с интенсивностью окраски и размером пятен "свидетелей" и выражают по формуле:

,

где: - искомое количество вещества в вытяжке, мг/л;

- количество вещества в исследуемом объеме в мг, вычисленное как среднее по результатам не менее двух определений;