4.1. В колбы со средами по п.3.13 вносят чистые культуры микроорганизмов, выращенные по п.4.9, каждую в отдельную колбу:
для испытаний реактивных и дизельных топлив 0,2-0,3 см культуры;
для испытаний бензинов 0,5 см культуры.
Одну колбу оставляют со стерильной средой (для контроля).
Культуру Pseudomonas aeruginosa для заражения среды отбирают из водного слоя; суспензию гриба Cladosporium resinae предварительно взбалтывают.
4.2. Зараженные среды в каждой колбе взбалтывают для равномерного распределения посевного материала, разливают в пробирки и смешивают с испытуемыми образцами в следующих соотношениях:
для реактивных и дизельных топлив - по 3 см среды и образца;
для бензинов - 10 см среды и 1 см образца; пробирки немедленно закупоривают корковыми пробками.
4.3. Стерильную среду разливают в пробирки в тех же количествах, что в п.4.2, и применяют для контроля.
4.4. Для контроля жизнеспособности используемых микроорганизмов в пробирки с зараженной средой добавляют незащищенное топливо.
4.5. Для контроля изменений образцов за счет действия присадки в пробирки со стерильной средой добавляют защищенное топливо.
4.6. Для контроля изменений образцов за счет температурного режима условий испытаний в пробирки со стерильной средой добавляют незащищенное топливо.
4.7. Пробирки, подготовленные по пп.4.2-4.5, помещают в термостат при (29±2) °C.
4.8. Образцы, зараженные грибом Cladosporium resinae, выдерживают в термостате 21 сутки.
4.9. Образцы, зараженные Pseudomonas aeruginosa, микобактериями, дрожжами и накопительными культурами, выдерживают в термостате 7 суток при непрерывном встряхивании; для этого пробирки с образцами помещают на встряхивательный аппарат (150-300 об/мин), установленный в термостате.
4.10. При появлении признаков роста микроорганизмов в образцах до указанных сроков испытания прекращают.
4.11. Параллельно испытывают не менее трех образцов.