ГОСТ 9.023-74 Единая система защиты от коррозии и старения (ЕСЗКС). Топлива нефтяные. Метод лабораторных испытаний биостойкости топлив, защищенных противомикробными присадками

3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЯМ

3.1. Материалы, реактивы, оборудование и посуда, применяемые для испытаний, приведены в приложении 1.

3.2. Посуду, вымытую и высушенную, закрывают ватными пробками, заворачивают в бумагу и стерилизуют в сушильном шкафу при 160 °C в течение 2 ч.

3.3. Для выращивания культур и испытаний готовят среды в соответствии с приложением 2.

3.4. Минеральные среды для предварительного выращивания Pseudomonas aeruginosa, микобактерий, дрожжей и накопительных культур разливают в пробирки:

для испытаний реактивных и дизельных топлив - по 3 см;

для испытаний бензинов - по 10 см.

3.5. Для предварительного выращивания гриба Cladosporium resinae сусловый агар разливают в пробирки по 7-8 см.

3.6. Минеральные среды, водопроводную воду и корковые пробки стерилизуют в автоклаве при 121 °С (1 ати), а сусловый агар при 112 °С (0,5 ати) в течение 20-30 мин.

После стерилизации сусловый агар охлаждают в наклонном положении для получения скошенной поверхности.

3.7. В пробирки со средами, приготовленными по пп.3.3 и 3.5, добавляют испытуемое топливо без присадки (каждое в отдельную пробирку);

реактивного или дизельного топлива - 3 см;

неэтилированного бензина - 1 см.

В приготовленные среды с топливом пересевают пипеткой культуры бактерий, дрожжей или накопительные культуры в количестве 0,3 см.

3.8. На скошенную поверхность суслового агара, приготовленного по пп.3.4-3.5, пересевают бактериологической петлей гриб Cladosporium resinae, 1 петлю на пробирку.

3.9. Пробирки с пересеянными культурами помещают в термостат на 10 суток при (29±2)  °C для выращивания культур, которые служат посевным материалом для испытаний.

Содержание клеток в 1 см посевного материала для культур Pseudomonas aeruginosa, микобактерий, дрожжей и накопительных культур должно быть не менее 1·10.

3.10. Для испытаний допускается использовать ранее выращенные культуры, хранящиеся в холодильнике по п.2.7.

3.11. Для испытаний готовят суспензию спор гриба Cladosporium resinae, выращенного по п.3.9, переносом их бактериологической петлей со скошенного суслового агара в стерильную водопроводную воду из расчета 3-4 петли на 10 см воды.

Суспензия пригодна для использования в течение 6 ч с момента приготовления.

3.12. Для определения противомикробного действия других присадок их вносят в образцы топлив в количествах, соответствующих программе испытаний.

3.13. Минеральные среды для испытаний разливают:

для испытаний реактивных и дизельных топлив - в колбы вместимостью 100 см по 20 см;

для испытаний бензинов - в колбы вместимостью 250-300 см по 50 см.