• Текст документа
  • Статус
Оглавление
Поиск в тексте
Документ в силу не вступил


ГОСТ 34449-2018

     
     
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ, ПРОДОВОЛЬСТВЕННОЕ СЫРЬЕ, КОРМА, КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ

Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

Food products, food raw materials, feeds, feed additives. Determination of dioxins mass fraction by gas chromatography/high-resolution mass spectrometry



МКС 65.120
67.050
67.100.20
67.120.10
67.120.20
67.200.10

Дата введения 2019-10-01

Предисловие


Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2015 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГБУ "ВГНКИ")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 июля 2018 г. N 110-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по
МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны
по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Казахстан

KZ

Госстандарт Республики Казахстан

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Россия

RU

Росстандарт

Узбекистан

UZ

Узстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 31 августа 2018 г. N 548-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 34449-2018 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 октября 2019 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ


Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

1 Область применения


Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и продовольственное сырье - мясо животных всех видов, в том числе мясо птицы, а также субпродукты, масло из коровьего молока, животный жир, корма, кормовые добавки и устанавливает метод хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения для идентификации и определения массовой доли 17 высокотоксичных полихлорированных дибензодиоксинов (ПХДД) и дибензофуранов (ПХДФ) в диапазоне измерений каждого конгенера* от 1,0 до 30,0 нг/кг (от 1,0 до 30,0 трлнГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения).

________________

* Конгенер (лат. congener: однотипный, принадлежащий к той же группе) - индивидуальное химическое соединение, входящее в группу похожих между собой соединений, имеющих сходное происхождение и структуру.


Примечания

1 ПХДД: 2,3,7,8-тетрахлордибензо-п-диоксин (2,3,7,8-ТХДД), 1,2,3,7,8-пентахлордибензо-п-диоксин (1,2,3,7,8-ПеХДД), 1,2,3,4,7,8-гексахлордибензо-п-диоксин (1,2,3,4,7,8-ГкХДД), 1,2,3,6,7,8-гексахлордибензо-п-диоксин (1,2,3,6,7,8-ГкХДД), 1,2,3,7,8,9-гексахлордибензо-п-диоксин (1,2,3,7,8,9-ГкХДД), 1,2,3,4,6,7,8-гептахлордибензо-п-диоксин (1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД), октахлордибензо-п-диоксин (ОХДД) конгенеры.

2 ПХДФ: 2,3,7,8-тетрахлордибензофуран (2,3,7,8-ТХДФ), 1,2,3,7,8-пентахлордибензофуран (1,2,3,7,8-ПеХДФ), 2,3,4,7,8-пентахлордибензофуран (2,3,4,7,8-ПеХДФ), 1,2,3,4,7,8-гексахлор-дибензофуран (1,2,3,4,7,8-ГкХДФ), 1,2,3,6,7,8-гексахлордибензофуран (1,2,3,6,7,8-ГкХДФ), 2,3,4,6,7,8-гексахлордибензофуран (2,3,4,6,7,8-ГкХДФ), 1,2,3,7,8,9-гексахлордибензофуран (1,2,3,7,8,9-ГкХДФ), 1,2,3,4,6,7,8-гептахлордибензофуран (1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ), 1,2,3,4,7,8,9-гептахлордибензофуран (1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ), октахлордибензофуран (ОХДФ) конгенеры.

2 Нормативные ссылки


В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-2017 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты**

________________

** В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009.


ГОСТ 12.2.085-2017 Арматура трубопроводная. Клапаны предохранительные. Выбор и расчет пропускной способности

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 745-2014 Фольга алюминиевая для упаковки. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия

ГОСТ 4166-76 Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4220-75 Реактивы. Калий двухромовокислый. Технические условия

ГОСТ 6995-77 Реактивы. Метанол-яд. Технические условия

ГОСТ 7269-2015 Мясо. Методы отбора образцов и органолептические методы определения свежести

ГОСТ 8285-91 Жиры животные топленые. Правила приемки и методы испытания

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 9293-74 (ИСО 2435-73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 13496.0-2016 Комбикорма, комбикормовое сырье. Методы отбора проб

ГОСТ 17681-82 Мука животного происхождения. Методы испытаний

ГОСТ 19908-90 Тигли, чаши, стаканы, колбы, воронки, пробирки и наконечники из прозрачного кварцевого стекла. Общие технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26809.2-2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 2. Масло из коровьего молока, спреды, сыры и сырные продукты, плавленые сыры и плавленые сырные продукты

ГОСТ 31467-2012 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Методы отбора проб и подготовка их к испытаниям

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Сущность метода


Метод основан на экстракции аналитов органическими растворителями, последовательной очистке экстракта с применением колоночной хроматографии на различных сорбентах и количественном анализе методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения с использованием суррогатных изотопно-меченых стандартов* - аналогов определяемых соединений, вводимых в пробу на стадии подготовки проб.

________________

* Смесь конгенеров ПХДД/ПХДФ изотопно-меченых по углероду ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, вводимая в пробу на стадии обработки для контроля полноты извлечения и количественных расчетов.


Идентификацию аналитов в анализируемой пробе проводят по временам удерживания конгенеров и соотношениям площадей пиков на масс-хроматограммах их характеристических ионов. Количественное определение проводят методом внутреннего стандарта.

4 Требования безопасности и условия выполнения измерений

4.1 Конгенеры ПХДД и ПХДФ относятся к высокоопасным соединениям. Требования безопасности при работе с препаратами, содержащими ПХДД/ПХДФ, устанавливают в соответствии с нормативными документами, действующими на территории государства, принявшего стандарт.

4.2 Применяемые в работе реактивы относятся к веществам 1-го и 2-го классов опасности по ГОСТ 12.1.007, при работе с ними следует соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005.

4.3 Помещения, в которых проводят анализ и подготовку проб, должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией.

4.4 Приготовление и дозирование растворов суррогатных изотопно-меченых и внутренних стандартов диоксинов, добавление их к анализируемой пробе, подготовку пробы к анализу проводят под тягой в вытяжном шкафу.

4.5 Пробы, подготовленные к анализу, растворы исходных стандартных образцов, аттестованных смесей следует хранить в виалах вместимостью 1,5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, закрытых навинчиваемыми или запрессованными крышками с комбинированными прокладками (силикон/тефлон), прокалываемыми микрошприцем.

4.6 При выполнении измерений с использованием хромато-масс-спектрометра следует соблюдать правила по электробезопасности по ГОСТ 12.1.019 и правила безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением по ГОСТ 12.2.085.

4.7 К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих высшее специальное образование, прошедших соответствующий инструктаж, владеющих техникой хромато-масс-спектрометрии и изучивших инструкции по эксплуатации используемых приборов.

4.8 При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- температура окружающего воздуха

от 15 до 25°C;

- относительная влажность воздуха

от 20 до 80%.

5 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы, посуда и реактивы

5.1 Для определения содержания ПХДД/ПХДФ применяют следующие средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и посуду:

- весы неавтоматического действия высокого класса точности по ГОСТ OIML R 76-1 с максимальной нагрузкой не более 200 г и пределом допускаемой погрешности ±0,1 мг;

- пипетки одноканальные переменной вместимости 10-100 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, 40-200 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, 200-1000 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, 1-5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения с допустимой относительной погрешностью дозирования по воде не более ±2,5%;

- хромато-масс-спектрометр, позволяющий проводить измерения в диапазоне масс от 50 до 600 атомных единиц массы (а.е.м.), разрешением по шкале масс не менее 10000 в режиме ионизации электронным ударом, оснащенный компьютерной системой обработки данных;

- колонку кварцевую капиллярную* длиной 30 или 60 м, диаметром 0,25 мм с неподвижной полярной фазой толщиной 0,25 мкм;

________________

* Например, типов DB-5MS или VF-5MS. Указанные типы колонки являются рекомендуемыми. Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не исключает возможности использования других типов с аналогичными характеристиками.


- компьютер с установленным программным обеспечением для управления хромато-масс-спектрометром и обработки результатов измерений;

- микрошприцы хроматографические вместимостью 10 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения с ценой деления 0,1 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения;

- испаритель ротационный со скоростью вращения от 20 до 280 об/мин и температурным диапазоном нагревательной бани от 30 до 100°C;

- модуль термостатируемый нагревательный с системой отдувки растворителей инертным газом и максимальной температурой термостатирования не менее 220°C;

- экстрактор автоматический для ускоренной экстракции растворителями под давлением с температурой экстракции от 20 до 200°C;

- баню ультразвуковую с рабочей частотой не менее 20 Гц и объемом не менее 1 дмГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения;

- шейкер переворачивающий для колб и пробирок со скоростью вращения до 100 об/мин;

- измельчитель-гомогенизатор лабораторный;

- мельницу лабораторную для измельчения кормов;

- печь микроволновую для экспрессной подготовки проб мощностью не менее 800 Вт;

- шкаф сушильный с максимальной температурой нагрева не менее 250°C и погрешностью поддержания заданной температуры ±5°C;

- печь муфельную с максимальной температурой нагрева 850°C и погрешностью поддержания заданной температуры ±5%;

- камеру лабораторную морозильную рабочим диапазоном температур от минус 15°C до минус 25°C;

- ячейки экстракционные вместимостью 33 и 66 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения;

- виалы для хроматографа с коническим дном вместимостью 1,5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, с навинчиваемыми крышками и комбинированными прокладками (силикон/тефлон);

- колонку стеклянную для колоночной хроматографии длиной не менее 100 мм и внутренним диаметром 8 мм, сужающуюся книзу;

- колонку стеклянную для колоночной хроматографии длиной не менее 150 мм и внутренним диаметром 10 мм, сужающуюся книзу;

- колонку стеклянную для колоночной хроматографии длиной не менее 300 мм и внутренним диаметром 10 мм, сужающуюся книзу;

- фильтры диаметром 3,3 см из бумаги фильтровальной по ГОСТ 12026;

- фильтры из стекловолокна диаметром 3,3 см;

- стекловату силанизированную;

- фольгу алюминиевую по ГОСТ 745;

- колбу К-1-100-14/23 ТС по ГОСТ 25336;

- колбу Кн-1-100-14/23 ТС по ГОСТ 25336;

- колбы 1-100(500)-1 по ГОСТ 1770;

- пробирки 10 по ГОСТ 19908;

- цилиндры 1-10(100)-1 по ГОСТ 1770;

- эксикаторы 2-250 по ГОСТ 25336;

- аппарат Сокслета;

- емкости из темного стекла с притертыми крышками;

- емкости из темного стекла с навинчиваемыми крышками;

- стакан 7 по ГОСТ 9147;

- ступку 3, пестик 2 по ГОСТ 9147.

5.2 Для определения содержания ПХДД/ПХДФ применяют следующие реактивы:

- азот газообразный по ГОСТ 9293, марки ос.ч.;

- оксид алюминия 60, щелочной, активность Брокмана (I);

- ацетон по ГОСТ 2603, ч.д.а.;

- гелий газообразный (сжатый) высокой чистоты, марки А;

- дихлорметан с содержанием основного вещества не менее 99,9%;

- изопропанол с содержанием основного вещества не менее 99,95%;

- калий двухромовокислый по ГОСТ 4220, х.ч.;

- н-гексан с содержанием основного вещества не менее 96,0%;

- метанол-яд по ГОСТ 6995, х.ч.;

- нонан, х.ч.;

- натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, х.ч.;

- кислоту серную концентрированную по ГОСТ 4204, х.ч., плотностью 1,84 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения;

- сорбент на основе кальцинированного диатомита (целит) с размером частиц от 0,02 до 0,10 мм (CAS N 68855-54-9);

- сорбент на основе графитизированного угля (уголь) с размером частиц от 0,177 до 0,246 мм (CAS N 7440-44-0);

- осушитель [земля диатомитовая (CAS N 61790-53-2)];

- силикагель марки 60 для колоночной хроматографии с размером частиц от 0,063 до 0,100 мм;

- толуол с содержанием основного вещества не менее 99,95%.

5.3 Стандартные растворы и градуировочные стандарты:

5.3.1 Суррогатные изотопно-меченые и внутренние стандарты ПХДД/ПХДФ, включающие:

- раствор смеси изотопно-меченых по углероду ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения конгенеров ПХДД/ПХДФ в нонане (раствор LCS), с погрешностью массовой концентрации каждого конгенера не более ±10% (см. таблицу 1).

Таблица 1 - Состав раствора LCS

Конгенер

Массовая концентрация,
нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

Конгенер

Массовая концентрация,
нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

2,3,7,8-ТХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

2,3,4,7,8-ПеХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,7,8-ПеХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,4,7,8-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,6,7,8-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

ОХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

200

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

2,3,7,8-ТХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

1,2,3,7,8-ПеХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

-

-


- раствор смеси внутренних стандартов 1,2,3,4-ТХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения и 1,2,3,7,8,9-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения в нонане (раствор ISS) массовой концентрацией каждого конгенера 200 нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, с погрешностью содержания каждого конгенера не более ±10%.

5.3.2 Набор градуировочных стандартов ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, включающий 17 токсичных конгенеров ПХДД/ПХДФ в нонане, с погрешностью массовой концентрации каждого конгенера не более ±10% (см. таблицу 2).

Таблица 2

Конгенер ПХДД/ПХДФ

Массовая концентрация, нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

2,3,7,8-ТХДД

0,5

2

10

40

200

1,2,3,7,8-ПеХДД

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,4,7,8-ГкХДД

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,6,7,8-ГкХДД

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,7,8,9-ГкХДД

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД

2,5

10

50

200

1000

ОХДД

5,0

20

100

400

2000

2,3,7,8-ТХДФ

0,5

2

10

40

200

1,2,3,7,8-ПеХДФ

2,5

10

50

200

1000

2,3,4,7,8-ПеХДФ

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ

2,5

10

50

200

1000

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ

2,5

10

50

200

1000

1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ

2,5

10

50

200

1000

ОХДФ

5,0

20

100

400

2000

2,3,7,8-ТХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,7,8-ПеХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,4,7,8-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,6,7,8-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

ОХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

200

200

200

200

200

2,3,7,8-ТХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,7,8-ПеХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

2,3,4,7,8-ПеХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,4-ТХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

1,2,3,7,8,9-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

100

100

100

100

100

5.4 Допускается применение других средств измерений и посуды, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также вспомогательного оборудования, реактивов и материалов по качеству не ниже вышеуказанных.

6 Подготовка к проведению измерений

6.1 Подготовка лабораторной посуды и материалов

6.1.1 Мойку и сушку посуды проводят в отдельном помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией. Для сушки лабораторной посуды и подготовки реактивов следует использовать отдельные сушильные шкафы.

6.1.2 Стеклянную лабораторную посуду очищают хромовой смесью с последующей последовательной промывкой дистиллированной водой, затем сушат в сушильном шкафу при температуре от 105 до 110°С.

Для приготовления хромовой смеси в фарфоровый стакан вместимостью 1000 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения помещают 50 г двухромовокислого калия и осторожно приливают по частям, тщательно перемешивая, 1 дмГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения концентрированной серной кислоты.

Хромовую смесь хранят в герметически закрытой стеклянной емкости.

6.1.3 Высушенную посуду ополаскивают органическими растворителями: толуолом (однократно), ацетоном (дважды). Затем проводят окончательную сушку посуды в сушильном шкафу при температуре от 105 до 110°C.

Процедуру промывки органическими растворителями следует проводить в вытяжном шкафу. Рекомендуется на стадиях промывки использовать ультразвуковую баню.

6.1.4 Стекловату промывают последовательно толуолом и ацетоном в ультразвуковой бане и затем сушат при температуре 200°C на алюминиевой фольге в сушильном шкафу в течение 10-15 ч.

Чистую вату хранят в герметически закрытой стеклянной емкости.

6.1.5 Силикагель высушивают в сушильном шкафу при температуре 200°C в течение 10-15 ч.

Силикагель хранят в герметически закрытой стеклянной емкости не более двух недель.

6.1.6 Безводный сернокислый натрий высушивают в сушильном шкафу при температуре 200°C в течение 10-15 ч, охлаждают в эксикаторе.

Хранят в герметически закрытой стеклянной емкости не более 1 мес.

6.2 Подготовка сорбентов и реактивов


Каждую новую партию реактивов, сорбентов, материалов проверяют на отсутствие контаминации путем проведения холостого опыта в соответствии с процедурой анализа, оценивая результаты с учетом характеристик погрешности.

6.2.1 Подготовка сорбентов

6.2.1.1 Приготовление силикагеля, импрегнированного серной кислотой

В конической колбе вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения тщательно смешивают 60 г силикагеля (см. 6.1.5) и 40 г концентрированной серной кислоты (приливают осторожно небольшими порциями), затем ставят колбу в шейкер на 30 мин. Готовый импрегнированный силикагель должен представлять собой однородную массу без комков.

Хранят в герметически закрытой стеклянной емкости в эксикаторе в течение 1 мес.

6.2.1.2 Подготовка угля

Уголь промывают последовательной экстракцией в аппарате Сокслета толуолом в течение 24 ч, затем высушивают в сушильном шкафу при температуре 150°C в течение 5 ч.

Промытый уголь хранят в герметически закрытой стеклянной емкости.

6.2.1.3 Приготовление активированной смеси угля с целитом

Смешивают 9,0 г угля (см. 6.2.1.2) и 41 г целита. Активируют смесь в сушильном шкафу при температуре 130°C в течение 6 ч.

Активированную смесь угля с целитом хранят в герметически закрытой стеклянной емкости в эксикаторе.

6.2.1.4 Активирование щелочного оксида алюминия

Щелочной оксид алюминия по 4 г помещают в кварцевые пробирки и активируют в муфельной печи при температуре 600°C в течение 16 ч.

Активированный щелочной оксид алюминия хранят в эксикаторе не более 5 сут.

6.2.2 Подготовка и приготовление реактивов

6.2.2.1 Очистку растворителей н-гексана и дихлорметана осуществляют путем перегонки с использованием стеклянной лабораторной посуды в соответствии с правилами перегонки органических веществ. Растворители с пометкой "Для анализа пестицидов" можно использовать без дополнительной очистки.

6.2.2.2 Приготовление смеси дихлорметан-н-гексан в объемном соотношении 5:95

В мерной колбе вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смешивают 5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения дихлорметана и 95 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана.

6.2.2.3 Приготовление смеси дихлорметан-н-гексан в объемном соотношении 60:40

В мерной колбе вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смешивают 60 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения дихлорметана и 40 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана.

6.2.2.4 Приготовление смеси дихлорметан-н-гексан в объемном соотношении 1:1

В мерной колбе вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смешивают равные объемы н-гексана и дихлорметана.

6.2.2.5 Приготовление смеси дихлорметан-н-гексан в объемном соотношении 25:75

В мерной колбе вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смешивают 75 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана и 25 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения дихлорметана.

6.2.2.6 Приготовление смеси дихлорметан-метанол-толуол в объемном соотношении 15:4:1

В мерной колбе вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смешивают 75 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения дихлорметана, 20 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения метанола и 5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения толуола.

6.2.2.7 Приготовление смеси н-гексан-изопропанол в объемном соотношении 1:1

В мерной колбе вместимостью 500 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смешивают равные объемы н-гексана и изопропанола.

6.2.2.8 Растворы, приготовленные по 6.2.2.2-6.2.2.7 хранят в емкостях из темного стекла с навинчиваемыми крышками не более 3 мес.

6.3 Приготовление растворов изотопно-меченых суррогатных и внутренних стандартов

6.3.1 Приготовление рабочего раствора смеси изотопно-меченых по углероду ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения конгенеров ПХДД/ПХДФ в нонане (раствор LCS-1)

Для приготовления рабочего раствора LCS-1 в виалы последовательно вносят по 200 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения раствора LCS (см. 5.3.1) и 800 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения нонана. Массовые концентрации суррогатных стандартов в рабочем растворе (нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения) приведены в таблице 3.

Таблица 3

Изотопно-меченый по углероду ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения конгенер

Массовая концентрация,
нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

Изотопно-меченый по углероду ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения конгенер

Массовая концентрация,
нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

2,3,7,8-ТХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

2,3,4,7,8-ПеХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,7,8-ПеХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,4,7,8-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,6,7,8-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

ОХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

40

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

2,3,7,8-ТХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

1,2,3,7,8-ПеХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

20

-

-


Виалы укупоривают навинчиваемыми крышками с прокладками и хранят при температуре от минус 15°C до минус 25°C не более 2 лет.

6.3.2 Приготовление рабочего раствора изотопно-меченого внутреннего стандарта (раствор ISS-1)

Для приготовления рабочего раствора ISS-1 в виалы последовательно вносят по 50 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения раствора ISS (см. 5.3.1) и 950 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения нонана. Массовая концентрация 1,2,3,4-ТХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения и 1,2,3,7,8,9-ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения составляет 10 нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения.

Виалы укупоривают навинчиваемыми крышками с прокладками и хранят при температуре от минус 15°C до минус 25°C не более 2 лет.

7 Отбор и подготовка проб

7.1 Отбор проб

7.1.1 Отбор проб мяса, субпродуктов - по ГОСТ 7269.

7.1.2 Отбор проб мяса и печени птицы - по ГОСТ 31467.

7.1.3 Отбор проб масла из коровьего молока - по ГОСТ 26809.2.

7.1.4 Отбор проб животных жиров - по ГОСТ 8285.

7.1.5 Отбор проб кормов, кормовых добавок - по ГОСТ 13496.0, кормовой муки животного происхождения - по ГОСТ 17681.

7.1.6 Пробы, отобранные по 7.1.1 и 7.1.2, при отсутствии возможности анализа в день отбора замораживают и хранят при температуре от минус 15°C до минус 25°C до проведения анализа, но не более 2 мес.

7.2 Подготовка проб

7.2.1 Мышечную ткань предварительно очищают от грубой соединительной ткани. Мясо, субпродукты измельчают на гомогенизаторе.

Пробы кормов, кормовых добавок измельчают на лабораторной мельнице.

Пробы животных жиров, масла из коровьего молока используют без подготовки.

7.2.2 Определение массовой доли сырого жира в анализируемой пробе

Для проведения ускоренной экстракции растворителями следует учитывать массовую долю сырого жира в анализируемой пробе. Для этого растирают в фарфоровой ступке 5-10 г пробы с 15-20 г сернокислого безводного натрия до получения однородной сыпучей массы. Полученную смесь помещают в экстракционную ячейку вместимостью 33 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, заполненную согласно рисунку 1.

1) Бумажный фильтр

2) Безводный сернокислый натрий - 2 г

3) Подготовленная проба (см. 7.2.2)

4) Безводный сернокислый натрий до края экстракционной ячейки

5) Бумажный фильтр


Рисунок 1 - Схема заполнения экстракционной ячейки


Заполненную ячейку помещают в экстрактор, устанавливая параметры экстракции ПХДД/ПХДФ в соответствии с таблицей 4.

Таблица 4

Параметр

Условия

Температура, °C

120

Время нагревания, мин

5

Количество циклов

2

Растворитель

н-Гексан-изопропанол 1:1 (см. 6.2.2.7)

Давление, МПа

10

Время термостатирования, мин

15

Объем растворителя от вместимости ячейки, %

50

Вместимость ячейки, смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

33

Время продувки азотом, с

100


Полученный экстракт количественно переносят из приемного флакона экстрактора в предварительно высушенную до постоянной массы круглодонную колбу вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре 60°C. Затем помещают колбу в сушильный шкаф и высушивают при температуре 105°C до постоянной массы. Охлаждают в эксикаторе и взвешивают с погрешностью ±0,001 г.

Массовую долю сырого жира X, %, вычисляют по формуле

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (1)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса колбы с экстрактом жира, высушенной до постоянной массы, г;


ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса пустой колбы, высушенной до постоянной массы, г;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса анализируемой пробы, г.

7.3 Экстракция ПХДД/ПХДФ

7.3.1 Массу анализируемой пробы для проведения экстракции вычисляют таким образом, чтобы в ней содержалось от 3 до 5 г жира.

Для проб влажностью менее 15% гомогенат пробы растирают в фарфоровой ступке с диатомитовой землей до получения сыпучей смеси и используют для ускоренной экстракции.

Для проб влажностью более 15% гомогенат пробы растирают в фарфоровой ступке с диатомитовой землей и высушивают в микроволновой печи в течение 2-3 мин или в сушильном шкафу при температуре от 90 до 110°C до сыпучего состояния. Высушенную пробу повторно растирают до однородного состояния и используют для ускоренной экстракции.

Диатомитовую землю берут из расчета 2 г осушителя на 1 г гомогената пробы.

7.3.2 Подготовленную по 7.3.1 пробу (пробы животных жиров, масла из коровьего молока используют без подготовки) помещают в экстракционную ячейку вместимостью 66 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, заполненную согласно рисунку 2.

1) Бумажный фильтр

2) Безводный сернокислый натрий - 2 г

3) Силикагель, импрегнированный серной кислотой (см. 6.2.1.1), - 15 г

4) Безводный сернокислый натрий - 2 г

5) Силикагель, импрегнированный серной кислотой (см. 6.2.1.1), - 10 г

6) Безводный сернокислый натрий - 2 г

7) Силикагель, импрегнированный серной кислотой (см. 6.2.1.1), - 5 г

8) Фильтр из стекловолокна

9) Подготовленная проба

10) 10 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения раствора LCS-1 (см. 6.3.1)

11) Диатомитовая земля до края экстракционной ячейки

12) Бумажный фильтр


Рисунок 2 - Схема заполнения экстракционной ячейки вместимостью 66 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

7.3.3 Взвешивание компонентов при заполнении экстракционных ячеек проводят непосредственно в экстракционной ячейке последовательно согласно схемам их заполнения.

7.3.4 Заполненную экстракционную ячейку помещают в экстрактор, устанавливая параметры экстракции ПХДД/ПХДФ в соответствии с таблицей 5.

Таблица 5

Параметр

Условия

Температура, °C

120

Время нагревания, мин

10

Количество циклов

2

Растворитель

Дихлорметан-н-гексан 60:40 (см. 6.2.2.3)

Давление, МПа

10

Время термостатирования, мин

5

Объем растворителя от вместимости ячейки, %

60

Вместимость ячейки, смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

66

Время продувки азотом, с

100

7.3.5 Полученный экстракт количественно переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, упаривают на ротационном испарителе при температуре от 35 до 37°C до объема от 1 до 2 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения и проводят очистку методом колоночной хроматографии по 7.4.

7.4 Очистка экстракта методом колоночной хроматографии

7.4.1 Очистка на многослойной колонке

В стеклянную колонку длиной не менее 300 мм и внутренним диаметром 10 мм (см. 5.1) помещают слой стекловаты (см. 6.1.4) и заполняют в следующем порядке:

а) 2,5 см силикагеля, импрегнированного серной кислотой (см. 6.2.1.1);

б) 0,5 см безводного сернокислого натрия;

в) 2,5 см силикагеля, импрегнированного серной кислотой;

г) 0,5 см безводного сернокислого натрия;

д) 2,5 см силикагеля, импрегнированного серной кислотой.

Каждый вносимый слой уплотняют постукиванием.

Для смачивания сорбентов через колонку пропускают 20 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-н-гексан 25:75 (см. 6.2.2.5). Под колонку подставляют чистую круглодонную колбу вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения для сбора элюата. Затем в колонку вносят концентрированный экстракт (см. 7.3.5). Стенки колбы обмывают не менее двух раз 1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-н-гексан 25:75 (см. 6.2.2.5) и вносят смывки в колонку последовательно. Элюируют аналиты 25 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-н-гексан 25:75. Элюат концентрируют на роторном испарителе до объема примерно 0,1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, приливают 1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана и переходят к очистке на колонке с активированным щелочным оксидом алюминия.

7.4.2 Очистка на колонке с активированным щелочным оксидом алюминия

В стеклянную колонку длиной не менее 150 мм и внутренним диаметром 10 мм помещают слой стекловаты (см. 6.1.4), 4 г активированного щелочного оксида алюминия (см. 6.2.1.4) и 1 см безводного сернокислого натрия. Под колонку подставляют круглодонную колбу вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения. Колонку промывают 20 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана и вносят концентрированный элюат, полученный по 7.4.1, до того как мениск растворителя достигнет сорбента, затем колонку промывают последовательно 20 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана и 20 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-н-гексан 5:95 (см. 6.2.2.2) и отбрасывают собранный элюат. Затем подставляют чистую круглодонную колбу вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения и элюируют 50 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-н-гексан 60:40 (см. 6.2.2.3). Элюат концентрируют на роторном испарителе до объема примерно 0,1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, приливают 1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана и переходят к очистке на колонке с активированной смесью угля и целита.

7.4.3 Очистка на колонке с активированной смесью угля и целита

В стеклянную колонку длиной не менее 100 мм и внутренним диаметром 8 мм помещают слой стекловаты, 0,55 г активированной смеси угля с целитом (см. 6.2.1.3) и уплотняют тампоном из стекловаты. Подставляют круглодонную колбу вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения и промывают колонку последовательно:

а) 5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения толуола;

б) 2 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-метанол-толуол 15:4:1 (см. 6.2.2.6);

в) 1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-н-гексан 1:1 (см. 6.2.2.4);

г) 5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана.

На промытую колонку наносят концентрированный элюат, полученный по 7.4.2, стенки колбы последовательно обмывают два раза 1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана и вносят смывки в колонку. Колонку элюируют последовательно:

а) дважды по 3 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения н-гексана;

б) 2 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-н-гексан 1:1 (см. 6.2.2.4);

в) 2 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения смеси дихлорметан-метанол-толуол 15:4:1 (см. 6.2.2.6).

Элюат отбрасывают, затем колонку переворачивают, подставляют чистую круглодонную колбу вместимостью 100 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения для сбора элюата и элюируют колонку 20 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения толуола с использованием одноканальной пипетки. Полученный элюат концентрируют на роторном испарителе до объема примерно 0,5 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения.

Сконцентрированный элюат количественно переносят с использованием н-гексана в виалу, предварительно добавив в нее 0,01 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения нонана. Осторожно упаривают в токе азота. Когда объем растворителя в виале достигнет примерно 0,1 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, добавляют 0,01 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения раствора ISS-1 (см. 6.3.2) и продолжают упаривание до 0,01 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения. Полученный элюат используют для определения содержания ПХДД/ПХДФ.

7.5 Приготовление холостой пробы


Приготовление холостой пробы для контроля чистоты реактивов и посуды проводят по 7.3 и 7.4, не добавляя пробу.

8 Порядок определения ПХДД/ПХДФ

8.1 Параметры хроматографических измерений

8.1.1 Хромато-масс-спектрометр включают в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации и устанавливают параметры, рекомендуемые изготовителем капиллярных колонок.

8.1.2 Например, для кварцевых капиллярных колонок длиной 30 или 60 м, диаметром 0,25 мм, с неподвижной полярной фазой толщиной не более 0,25 мкм устанавливают следующие параметры:

а) хроматографическая программа:

1) режим инжектора - без деления потока,

2) задержка продувки инжектора - 2 мин,

3) время сброса растворителя - 5 мин,

4) газ-носитель - гелий,

5) поток газа-носителя - 1,2 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения/мин,

6) инжектируемый объем - 1,0 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения;

б) программирование температуры:

1) начальная температура - 110°C,

2) изотерма - 3,0 мин,

3) программируемый нагрев - до температуры 200°C со скоростью 20,0°C/мин,

4) изотерма - 10 мин,

5) программируемый нагрев - до температуры 310°C со скоростью 4°C/мин,

6) температура инжектора - 280°C,

7) скорость потока гелия через колонку - 1,2 смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения/мин,

8) общее время определения - 60 мин;

в) режим масс-спектрометра:

1) температура интерфейса - 280°C,

2) температура ионного источника - 280°C.

8.1.3 Масс-спектрометрическое измерение проводят в режиме селективного сканирования характеристических ионов аналитов. Значения отношения массы к заряду характеристических ионов (ионы, присущие только данному соединению), используемых при измерении, приведены в таблице 6.

Таблица 6

Определяемый конгенер ПХДД/ПХДФ

Значение отношения массы к заряду характеристических ионов m/z

Тип иона

ТХДФ

303,9016

М

305,8987

М+2

ТХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

315,9419

М

317,9389

М+2

ТХДД

319,8965

М

321,8936

М+2

ТХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

331,9368

М

333,9339

М+2

ПеХДФ

339,8597

М+2

341,8567

М+4

ПеХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

351,9000

М+2

353,8970

М+4

ПеХДД

355,8546

М+2

357,8516

М+4

ПеХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

367,8949

М+2

369,8919

М+4

ГкХДФ

373,8208

М+2

375,8178

М+4

ГкХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

383,8639

М

385,8610

М+2

ГкХДД

389,8157

М+2

391,8127

М+4

ГкХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

401,8559

М+2

403,8529

М+4

ГпХДФ

407,7818

М+2

409,7789

М+4

ГпХДФ ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

417,8253

М

419,8220

М+2

ГпХДД

423,7766

М+2

425,7737

М+4

ГпХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

435,8169

М+2

437,8140

М+4

ОХДФ

441,7428

М+2

443,7399

М+4

ОХДД

457,7377

М+2

459,7348

М+4

ОХДД ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

469,7779

М+2

471,7750

М+4

8.1.4 Контроль чувствительности хромато-масс-спектрометра осуществляют введением в инжектор хроматографа 1 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения градуировочного стандарта ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения (см. 5.3.2). Полученное соотношение сигнал/шум для ТХДД должно быть не менее 10.

8.2 Градуировка хромато-масс-спектрометрической системы

8.2.1 Градуировку и расчет параметров градуировочной характеристики проводят в каждой серии анализов с использованием программного обеспечения хромато-масс-спектрометрической системы.

8.2.2 Градуировка заключается в построении зависимости площади пиков определяемых конгенеров ПХДД/ПХДФ от их концентрации. Градуировку выполняют путем анализа смесей градуировочных стандартов ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения (см. 5.3.2).

8.2.3 Для оценки фона (чистоты хромато-масс-спектрометрической системы) перед началом работы в инжектор хроматографа вносят 1 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения нонана и записывают масс-хроматограмму. На хроматограмме не должны присутствовать пики ПХДД/ПХДФ.

8.2.4 Проводят измерения градуировочных стандартов ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения (см. 5.3.2) в порядке возрастания их концентраций в условиях, приведенных в 8.1.2. Каждый раствор градуировочных стандартов измеряют два раза.

Записывают масс-хроматограмму каждого раствора и с использованием программы обработки по сигналам характеристических ионов и соответствующих суррогатных изотопно-меченых стандартов определяют времена удерживания и площади пиков, соответствующие каждому определяемому конгенеру.

8.2.5 Для каждого раствора градуировочных стандартов определяют относительный фактор отклика ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения каждого нативного (природного) конгенера ПХДД/ПХДФ относительно соответствующего изотопно-меченого конгенера, который вычисляют по формуле

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (2)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика конгенера ПХДД/ПХДФ в градуировочном растворе;


ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса соответствующего изотопно-меченого конгенера в градуировочном растворе, нг;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика соответствующего изотопно-меченого конгенера суррогатного стандарта в растворе градуировочного стандарта;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса конгенера ПХДД/ПХДФ в градуировочном растворе, нг.

Массу изотопно-меченого конгенера в градуировочном растворе m, нг, и массу конгенера ПХДД/ПХДФ в градуировочном растворе m, нг, вычисляют по формуле

m=CV, (3)


где С - массовая концентрация соответствующего конгенера в соответствующем градуировочном растворе, нг/смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения;

V - объем добавленного раствора LCS-1 или ISS-1 соответственно, смГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения.

Допустимое относительное стандартное отклонение значений относительного фактора отклика RRF не должно превышать 20% для всех градуировочных растворов.

8.2.6 При установке градуировочной характеристики используют линейную регрессию, которую считают приемлемой, если рассчитанное программным обеспечением значение квадрата коэффициента корреляции для градуировочной характеристики каждого конгенера составляет не менее 0,98. Установку градуировочной характеристики проводят при каждой серии измерений заново.

8.3 Проведение измерения

8.3.1 Для определения ПХДД/ПХДФ в инжектор хроматографа вводят 1,0 ммГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения экстракта, подготовленного по 7.3, 7.4, и проводят измерения в условиях, указанных в 8.1.2. Записывают масс-хроматограммы, идентифицируют каждый конгенер ПХДД/ПХДФ и соответствующий ему изотопно-меченый конгенер суррогатного стандарта по масс-спектру и совпадению времен удерживания.

8.3.2 Времена удерживания конгенеров ПХДД/ПХДФ определяют при анализе градуировочных растворов. Для коррекции систематических сдвигов времен удерживания нативных (природных) конгенеров при обработке хроматограмм в качестве реперных пиков используют соответствующие изотопно-меченые конгенеры ПХДД/ПХДФ.

8.3.3 Допустимое относительное отклонение абсолютных времен удерживания нативных (природных) конгенеров от абсолютных времен удерживания их изотопно-меченых аналогов не должно превышать 0,2%.

8.3.4 Соотношение интенсивностей характеристических ионов на вершине пиков не отличается более чем на 15% от значений, приведенных в таблице 7.


Таблица 7 - Допустимый интервал соотношений площадей пиков характеристических ионов

Конгенер

Измеряемое соотношение площадей пиков ионов

Допустимый интервал соотношений площадей указанных пиков ионов

ТХДФ, ТХДД

М/(М+2)

0,65-0,89

ПеХДФ, ПеХДД

(М+2)/(М+4)

1,32-1,78

ГкХДФ, ГеХДД

(М+2)/(М+4)

1,05-1,43

ГпХДФ, ГпХДД

(М+2)/(М+4)

0,88-1,20

ОХДФ, ОХДД

(М+2)/(М+4)

0,76-1,02


Анализ экстрактов проводят по 8.3.1. Вычисляют отношение площадей хроматографических пиков на масс-хроматограммах ионов М1 и М2, регистрируемых для каждого определяемого соединения и внутреннего стандарта, и сравнивают его со значением, приведенным в таблице 7. Это отношение должно находиться в пределах допустимого интервала. Если время удерживания данного конгенера совпадает со временем удерживания соответствующего изотопно-меченого внутреннего стандарта и отношение площадей пиков лежит в указанных пределах, то этот конгенер ПХДД/ПХДФ в данной пробе считают идентифицированным.

9 Обработка результатов


Массовую долю каждого конгенера ПХДД/ПХДФ в экстракте анализируемой пробы ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, нг/кг, вычисляют по формуле

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (4)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика конгенера ПХДД/ПХДФ;


ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса введенного изотопно-меченого стандарта, нг;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика соответствующего конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта ПХДД/ПХДФ;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - относительный фактор отклика для каждого конгенера ПХДД/ПХДФ, вычисленный по формуле (2);

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса пробы, взятой для анализа, кг.

Пересчет массовой доли каждого конгенера ПХДД/ПХДФ в экстракте анализируемой пробы на жировую фракцию ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, %, проводят по формуле

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (5)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - массовая доля каждого конгенера ПХДД/ПХДФ в экстракте анализируемой пробы ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, нг/кг, вычисленная по формуле (4);

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - массовая доля сырого жира, %, вычисленная по формуле (1).

10 Метрологические характеристики


Установленный в настоящем стандарте метод обеспечивает выполнение измерений массовой доли ПХДД/ПХДФ с расширенной неопределенностью результатов измерений при коэффициенте охвата k=2, указанной в таблице 8.


Таблица 8 - Показатели правильности и прецизионности метода при проведении измерений содержания ПХДД/ПХДФ

Аналит

Диапазон измерений массовой доли, нг/кг

Значение относительной расширенной неопределен-
ности ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, %, при коэффициенте охвата k=2

Показатель повторяемости (относительное стандартное отклонение повторяемости)
ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, %

Показатель воспроизво-
димости (относительное стандартное отклонение воспроиз-
водимости)
ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, %

Предел повторяе-
мости
ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, %

Индивидуальные конгенеры ПХДД/ПХДФ

От 1,0 до 4,0 включ.

84

21

42

58

Св. 4,0 до 30,0 включ.

32

8

16

22

11 Оформление результатов измерений


Результаты измерений ПХДД/ПХДФ округляют до двух значащих цифр и выражают в нанограммах на килограмм ТЭК ВОЗ* (в соответствии с ТЭФ ВОЗ для каждого конгенера, указанного в приложении А).

_________________

* Диоксиновый эквивалент токсичности (ТЭК ВОЗ) конгенеров ПХДД/ПХДФ - значение, выраженное в относительных величинах токсичности, установленных Всемирной организацией здравоохранения.


Для выражения концентрации ПХДД/ПХДФ в ТЭК ВОЗ полученные значения массовой доли конгенеров (нг/кг) умножают на соответствующий ТЭФ ВОЗ. Результаты определения ПХДД/ПХДФ выражают суммой массовых долей конгенеров (нг/кг) ТЭК ВОЗ, округленной до двух значащих цифр.

Сумму массовых долей ПХДД/ПХДФ (нг/кг) ТЭК ВОЗ принимают за окончательный результат.

Результаты определения ПХДД/ПХДФ представляют с указанием массовой доли и границ погрешности (расширенной неопределенности), 1·10ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения млнГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения (нг/кг), ТЭК ВОЗ

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (6)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - массовая доля конгенера ПХДД/ПХДФ в пробе, нг/кг;


ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - коэффициент эквивалентной токсичности i-го конгенера ПХДД/ПХДФ;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - расширенная неопределенность с коэффициентом охвата двух результатов количественного определения суммы ПХДД/ПХДФ, вычисляемая по формуле

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (7)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - значение относительной расширенной неопределенности с коэффициентом охвата двух результатов количественного определения i-го конгенера ПХДД/ПХДФ, %;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - коэффициент эквивалентной токсичности i-го конгенера ПХДД/ПХДФ.

12 Контроль качества результатов измерений


Контроль качества измерений обеспечивается выполнением следующих условий:

- анализ проб проводят сериями. Каждая серия включает до 10 проб, одну из которых анализируют дважды, и холостую пробу;

- оперативный контроль точности и правильности измерений обеспечивается анализом изотопно-меченых суррогатных стандартов - аналогов определяемых веществ, вводимых в каждую пробу на стадии ее подготовки.

Критерии качества анализа:

- отклонение результатов при двойном анализе пробы (предел повторяемости ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, %) - не превышает значения, указанного в таблице 8;

- значения величины извлечения конгенеров ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения находятся в диапазоне от 50 до 110%. Коэффициент извлечения каждого конгенера изотопно-меченого стандарта ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения вычисляют по формуле

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (8)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика каждого конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта на хроматограмме анализируемой пробы;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса введенного в анализируемую пробу изотопно-меченого внутреннего стандарта, нг, вычисленного по формуле (3);

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика каждого конгенера изотопно-меченого внутреннего стандарта на хроматограмме анализируемой пробы

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (9)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - фактор отклика каждого конгенера (RRF) для i-го раствора градуировочных стандартов;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - среднее значение фактора отклика каждого конгенера;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - количество уровней градуировки;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса введенного в анализируемую пробу изотопно-меченого суррогатного стандарта, нг, вычисленного по формуле (3);

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - относительный фактор отклика для каждого конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта, вычисляемый по концентрациям аналита и соответствующего внутреннего стандарта в градуировочном растворе и полученных для них площадей хроматографических пиков

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, (10)


где ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика каждого конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта на хроматограмме раствора градуировочного стандарта;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса изотопно-меченого внутреннего стандарта в растворе градуировочного стандарта, нг, вычисленного по формуле (3);

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - площадь пика каждого конгенера изотопно-меченого внутреннего стандарта на хроматограмме раствора градуировочного стандарта;

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения - масса изотопно-меченого суррогатного стандарта в растворе градуировочного стандарта, нг, вычисленного по формуле (3);

- чувствительность прибора определяют после каждой настройки прибора путем анализа раствора градуировочного стандарта ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, приемлемый критерий качества - соотношение сигнал:шум больше 10:1;

- линейность градуировки проверяют по результатам анализа растворов градуировочных стандартов ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения (см. 5.3.2). Допустимое относительное стандартное отклонение относительного фактора отклика ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, вычисленного по формуле (2), должно быть меньше 20%.

При невыполнении любого из перечисленных условий принимают меры по выявлению причин и повторяют анализ проб.

Приложение А (обязательное). Диоксиновый эквивалент токсичности (ТЭК ВОЗ) конгенеров ПХДД/ПХДФ

Приложение А
(обязательное)

А.1 Диоксиновый эквивалент токсичности (ТЭК ВОЗ) конгенеров ПХДД/ПХДФ приведен в таблице А.1.

Таблица А.1

Конгенер

ТЭК ВОЗ

Дибензодиоксины:

2,3,7,8-ТХДД

1,0000

1,2,3,7,8-ПеХДД

1,0000

1,2,3,4,7,8-ГкХДД

0,1000

1,2,3,6,7,8-ГкХДД

0,1000

1,2,3,7,8,9-ГкХДД

0,1000

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД

0,0100

ОХДД

0,0003

Дибензофураны:

2,3,7,8-ТХДФ

0,1000

1,2,3,7,8-ПеХДФ

0,0300

2,3,4,7,8-ПеХДФ

0,3000

1,2,3,4,7,8-ГкХДФ

0,1000

1,2,3,6,7,8-ГкХДФ

0,1000

2,3,4,6,7,8-ГкХДФ

0,1000

1,2,3,7,8,9-ГкХДФ

0,1000

1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ

0,0100

1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ

0,0100

ОХДФ

0,0003


УДК 637.07:614.3:006.354

МКС 65.120

67.050
67.100.20
67.120.10
67.120.20
67.200.10

Ключевые слова: пищевые продукты, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки, диоксины, метод определения содержания ПХДД/ПХДФ хромато-масс-спектрометрией высокого разрешения




Электронный текст документа
подготовлен АО "Кодекс" и сверен по:
официальное издание
М.: Стандартинформ, 2018

Доступ к полной версии этого документа ограничен

Текст документа вы можете получить на ваш адрес электронной почты, заказав бесплатную демонстрацию систем «Кодекс» и «Техэксперт».

Что вы получите:

После завершения процесса оплаты вы получите доступ к полному тексту документа, возможность сохранить его в формате .pdf, а также копию документа на свой e-mail. На мобильный телефон придет подтверждение оплаты.

При возникновении проблем свяжитесь с нами по адресу spp@kodeks.ru

ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

Название документа: ГОСТ 34449-2018 Продукты пищевые, продовольственное сырье, корма, кормовые добавки. Определение массовой доли диоксинов методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения

Номер документа: 34449-2018

Вид документа: ГОСТ

Принявший орган: Росстандарт

Статус: Документ в силу не вступил

Опубликован: Официальное издание. М.: Стандартинформ, 2018 год
Дата принятия: 31 августа 2018

Дата начала действия: 01 октября 2019
Информация о данном документе содержится в профессиональных справочных системах «Кодекс» и «Техэксперт»
Узнать больше о системах