МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И МЕДИЦИНСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО НАДЗОРА
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПРИКАЗ

oт 19 апреля 1995 года N 101/46


О защите населения от гриппа и
других острых респираторных заболеваний

(с изменениями на 27 января 1998 года)

____________________________________________________________________

Настоящий приказ не действует на территории Российской Федерации, за исключением приложений 4, 5, 6, 7 - приказ Минздрава России от 27 января 1998 года N 25.

____________________________________________________________________

Грипп и другие острые респираторные заболевания (ОРЗ) остаются до настоящего времени неуправляемыми инфекциями, наносящими существенный ущерб здоровью населения и экономике стран во всем мире.

За период эпидемии гриппа переболевает от 5 до 15% от общей численности населения, при этом около 50% составляют дети.

Школьники чаше всего являются первоисточниками гриппозной инфекции в семейных очагах.

Установлено, что эпидемии гриппа сопровождаются увеличением соматических заболеваний и ростом смертности, регистрируемой среди групп риска: дети раннего возраста, престарелые, больные хроническими сердечно-сосудистыми, бронхо-легочными и онкологическими заболеваниями.

В этой связи защита от гриппа приоритетно должна быть организована среди указанных групп населения. Комплексный характер защиты населения от гриппа предполагает в первую очередь специфическую профилактику с использованием живых или инактивированных вакцин, экстренную химиопрофилактику гриппа и противоэпидемические мероприятия в очагах инфекции, а также широкий круг оздоровительных, общеукрепляющих, санитарно-гигиенических и просветительных мероприятий.

В целях повышения эффективности профилактики, диагностики и лечения гриппа и других ОРЗ у взрослых и детей

приказываем:

1. Министрам здравоохранения республик в составе Российской Федерации, руководителям органов управления здравоохранения автономных образований, краев, областей, городов Москвы и Санкт-Петербурга:

1.1. обеспечить реализацию комплекса мероприятий согласно Методическим указаниям (приложения 1-7);

1.2. расширить применение средств и методов специфической и неспецифической профилактики гриппа и ОРЗ, особенно для защиты детей и групп риска населения в целях снижения заболеваемости и смертности.

2. Главным государственным санитарным врачам по республикам, краям, областям, городам федерального значения, автономной области, автономным округам, регионам на транспорте (водном, воздушном) обеспечить проведение эпидемиологического надзора за гриппом и острыми респираторными заболеваниями и контроль за профилактическими и противоэпидемическими мероприятиями по предупреждению заболеваний этими инфекциями.

утверждаем:

Методические указания

по вакцинопрофилактике гриппа у взрослых и детей (приложение 1);

____________________________________________________________________

Приложение 1 не действует на основании приказа Минздрава России от 27 января 1998 года N 25.     

____________________________________________________________________     

по неспецифической профилактике гриппа и ОРЗ (приложение 2);

____________________________________________________________________

Приложение 2 не действует на основании приказа Минздрава России от 27 января 1998 года N 25.

____________________________________________________________________          

по организации работы лечебно-профилактических учреждений и центров госсанэпиднадзора в период эпидемии гриппа в городе, населенном пункте (приложение 3);

____________________________________________________________________

Приложение 3 не действует на основании приказа Минздрава России от 27 января 1998 года N 25.

____________________________________________________________________               

по лабораторным методам диагностики гриппа и других ОРЗ (приложение 4);

по комплексной терапии тяжелых форм гриппа (приложение 5);

по клинической реабилитации и диспансерному наблюдению за больными гриппом и другими ОРЗ, осложненными острыми пневмониями (приложение 6);

по клиническим особенностям и терапии гриппа и ОРЗ у детей (приложение 7).

Контроль за выполнением настоящего приказа возложить на заместителя Министра здравоохранения и медицинской промышленности Российской Федерации Царегородцева А.Д. и заместителя председателя Государственного комитета санитарно-эпидемиологического надзора Российской Федерации Монисова А.А.

Министерствам здравоохранения республик в составе Российской Федерации, министерствам и ведомствам Российской Федерации, имеющим медицинскую службу, разрешается размножить настоящий приказ и утвержденные Методические указания в необходимом количестве экземпляров.

Считать утратившим силу приказ Минздрава СССР от 07.08.90 г. N 327 "0 защите населения от гриппа и других острых респираторных инфекций" на территории Российской Федерации.

Методические указания
по  вакцинопрофилактике гриппа
у  взрослых и детей

____________________________________________________________________
Приложение не действует на основании
приказа Минздрава России от 27 января 1998 года N 25. -
См. предыдущую редакцию.
____________________________________________________________________

Методические указания
по неспецифической профилактике гриппа и ОРЗ

____________________________________________________________________
Приложение не действует на основании
приказа Минздрава России от 27 января 1998 года N 25. -
См. предыдущую редакцию.
____________________________________________________________________

Методические указания  по организации  работы
лечебно-профилактических  учреждений
в период эпидемии гриппа в городе (населенном  пункте)

____________________________________________________________________
Приложение не действует на основании
приказа Минздрава России от 27 января 1998 года N 25. -
См. предыдущую редакцию.
____________________________________________________________________

Методические указания
по лабораторным методам диагностики гриппа
и других ОРЗ

Современные методы лабораторного обследования больных с острыми респираторными вирусными инфекциями включают изоляцию вирусов, индикацию вирусных антигенов в материалах от больных (быстрая диагностика) и выявление специфических антител в сыворотках больных в острой фазе инфекции и стадии реконвалесценции.

1. Выделение и идентификация респираторных вирусов

Частота выделения респираторных вирусов зависит от сроков взятия материалов от больных, условий их хранения, доставки и времени первичной обработки. Решающее значение имеет ассортимент и качество клеточных культур и куриных эмбрионов, на которых проводят изоляцию вирусов.

Рекомендуемый состав культур для изоляции вирусов гриппа и ОРЗ:

1) первичная культура клеток почек эмбриона человека (ПЭЧ);

2) перевиваемые культуры клеток МДСК, НеLа (или НЕр2);

3) фибробласты легкого эмбриона человека (ЛЭЧ).

Материалом для выделения вирусов служат отделяемое носа, зева, конъюнктивы, а также секционный материал (ткани легкого, кусочки бронхов и др.).

Материал отбирают с помощью стерильного тампона, который погружают затем в пробирки с 5,0 мл среды Игла или среды 199 с антибиотиками и немедленно направляют в лабораторию, где тампоны с вирусным материалом отжимают в среду, материал центрифугируют в течение 20 мин при 2000-3000 об/мин и температуре +4град.С или используют в неосветленном виде.

Кусочки секционного материала растирают в фарфоровой ступке со стеклянным песком, добавляют 10-кратное количество раствора Хенкса, взвесь ресуспендируют, после чего осветляют центрифугированием. Надосадочную жидкость используют для заражения куриных эмбрионов или тканевых культур.

1.1. Изоляция и идентификация вирусов гриппа

Для выделения вирусов гриппа исследуемые материалы после их первичной обработки вводят по 0,1 мл в амниотическую полость и по 0,2 мл в аллантоисную полость 10-дневных куриных эмбрионов.

Заражение проводят в затемненном боксе через боковую поверхность скорлупы, направляя иглу сначала в амниотическую, а затем в аллантоисную полости, предварительно сделав дополнительный прокол в скорлупе над воздушной камерой. Материалом от одного больного заражают 3 эмбриона.

Зараженные эмбрионы инкубируют в термостате 72 часа при +(33-34) град.С. После инкубации эмбрионы помещают на ночь в рефрижератор при +4 град.С.

Индикацию вируса гриппа осуществляют в реакции гемагглютинации (РГА) путем добавления 0,5 мл 1% суспензии отмытых эритроцитов кур к 0,5 мл вируссодержащего материала. Результаты РГА учитывают после 30-минутного оседания эритроцитов в лунках панелей при комнатной температуре.

При отсутствии агглютинации эритроцитов необходимо провести 3 дополнительных пассажа путем заражения эмбрионов смесью амниотической и аллантоисной жидкостей от предыдущего пассажа. В случае отрицательных результатов РГА после 3 пассажей исследование материалов прекращают.

Идентификацию вирусов гриппа проводят в РТГА.

Для этого к 0,2 мл последовательных разведений типоспецифических иммунных сывороток добавляют по 0,2 мл рабочей дозы вируса в количестве 4 гемагглютинирующих единиц (ГЕ). Одной ГЕ считают последнее разведение вируса, дающее отчетливую гемагглютинацию.

После 1-часового контакта сыворотки с вирусом при комнатной температуре в каждую лунку добавляют по 0,4 мл 1% взвеси куриных эритроцитов. Титром сыворотки считают ее последнее разведение, блокирующее 4 ГЕ вируса.

Типовую принадлежность вируса определяют по ингибиции гемагглютинации, которая должна быть зарегистрирована в разведении не менее чем 1:20.

Выделение вирусов гриппа может быть осуществлено на чувствительных культурах клеток, чаще всего МДСК. Для этого в пробирки с монослоем, отмытым физиологическим фосфатным буфером или раствором Хенкса, вносят по 0,2 мл материала от больного. Через 1 ч адсорбции при +38 град.С в культуры добавляют по 1,5 мл поддерживающей среды (199, Игла с антибиотиками) и помещают в термостат при +33 град.С.

Индикацию, типирование и дополнительные пассажи вирусов гриппа проводят, как указано выше. Кроме того, инфицированные культуры 1 раз в день микроскопируют для оценки цитопатогенного действия вирусов.

1.2. Изоляция и идентификация других возбудителей ОРЗ

Изоляцию аденовирусов, парагриппозных вирусов, РС-вируса, коронавирусов, вирусов герпеса и др. проводят на клеточных культурах (ПЭЧ, ЛЭЧ и Нер-2). Наиболее чувствительной к различным вирусам является клеточная культура ПЭЧ. В чувствительные культуры вносят по 0,2 мл материала от больного. Через 30-60 мин адсорбции вируса на клетках в культуры вносят по 0,8 мл поддерживающей среды Игла с антибиотиками (100 ед/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина) и с 2% инактивированной фетальной сыворотки. Зараженные культуры инкубируют при температуре +36 град.С до появления в них проявлений цитопатогенного действия (ЦПД).

Индикацию парагриппозных вирусов проводят по ЦПД и гемадсорбции с 0,4% взвесью эритроцитов морской свинки (20 мин при комнатной температуре), а остальных вирусов - по характерному цитопатогенному действию.

Если при первичном заражении вирус не был выявлен ни в одном из тестов, материалы дополнительно пассируют еще 2 раза в тех же условиях.

Идентификацию вирусов ОРЗ проводят в чувствительных тканевых культурах с помощью реакции нейтрализации (РН) со специфическими иммунными сыворотками. Вируссодержащую культуральную жидкость в дозе 100 ТИД50/0,2 мл в объеме О,2 мл смешивают с О,2 мл каждой из типоспецифических иммунных сывороток, взятых в разведении 1:20. Смесь вируса и сыворотки выдерживают 2 часа при комнатной температуре, после чего по 0,2 мл каждой смеси вносят в 2 пробирки с монослоем чувствительных клеток, затем в пробирки добавляют по 0,8 мл поддерживающей среды. Инфицированные и контрольные культуры клеток инкубируют при температуре +36 град.С. Параллельно типоспецифические сыворотки контролируют в отношении их активности к типовым эталонным штаммам.

Учет реакции проводят по ингибиции цитопатогенного действия (для аденовирусов, РС, простого герпеса), гемадсорбции (для парагриппозных вирусов) в день, когда типируемый вирус вызвал выраженное ЦПД клеток в контрольных культурах без сыворотки (при отсутствии дегенерации в контрольных посевах неинфицированных клеток и в контролях диагностических сывороток), в то время как эталонные штаммы полностью нейтрализованы типоспецифическими сыворотками. Тип выделенного штамма определяют по сыворотке, которая полностью предохранила клетки от дегенерации.