5.1. Определение стерильности продукции должно проводиться не ранее, чем через 24 часа после стерилизации.
5.2. Для контроля стерильности используют следующие питательные среды:
- сахарный бульон Хоттингера (0,5 и 1% глюкозы);
- тиогликолевую среду;
- бульон Сабуро.
При контроле стерильности изделий, простерилизованных радиационным методом, применяют бульон Хоттингера с 1% глюкозы, простерилизованных газовым и паровым методами - с 0,5% глюкозы.
Одновременный посев изделий (или их отдельных узлов и составных частей) на 3 вышеуказанные среды обязателен. При посеве изделия или его части непосредственно в питательную среду количество среды в пробирке (колбе, флаконе и т.д.) должно быть достаточным для полного погружения изделия или его части.
5.3. Посевы в бульон Хоттингера и тиогликолевую среду выдерживают в термостате при температуре 32 град.С, бульон Сабуро - при температуре 20-22 град.С.
Посевы инкубируют в термостате при соответствующей температуре в течение 14 суток при контроле изделий, простерилизованных радиационным и газовым методами, простерилизованных паровым методом - 8 суток.
5.4. Описание состава, способа приготовления и правила контроля стерильности питательных сред, используемых при контроле стерильности изделий медицинского назначения, изложены в разделе 9.
5.5. На пробирках и колбах с посевами делают на этикетках или карандашом по стеклу надписи с указанием даты посева, N партии (серии), N образца и N пробирки (колбы, флакона).
5.6. Методика посева на стерильность различных изделий, выпускаемых промышленностью, имеет специфические особенности. Описание некоторых методик приводится в п.п.5.7.1-5.7.28. По мере освоения выпуска других стерилизованных изделий этот раздел должен быть дополнен.
5.7. При контроле продукции, простерилизованной на предприятии-изготовителе, в предбокснике наружную упаковку исследуемых изделий протирают с помощью стерильного пинцета стерильной салфеткой, смоченной 6% раствором перекиси водорода, и оставляют на стерильном лотке на 30 минут, затем ее разрезают и изделие во внутренней упаковке переносят в бокс.
Посевы производит бактериолог с помощью лаборанта, который берет исследуемый пакет, разрезает простерилизованными и фламбированными ножницами (смоченными в спирте и проведенными через пламя горелки) внутренний пакет.
5.7.1. Посев на стерильность полимерных систем для взятия и переливания крови и кровезаменителей одноразового использования (система для переливания крови, кровезаменителей и инфузионных растворов СП-1, система для вливания кровезаменителей и инфузионных растворов с одновременным измерением венозного давления ПК-03, система комбинированная для переливания крови, кровезаменителей и инфузионных растворов КР 11-01).
В пакет наливают 25-30 мл стерильного физиологического раствора, ополаскивают внутреннюю поверхность пакета и наружную поверхность системы, из пакета стерильной пипеткой отбирают часть физиологического раствора, который по 2 мл засевают в 2 пробирки с 10 мл тиогликолевой среды, в 2 пробирки с 10 мл сахарного бульона Хоттингера и 2 пробирки с 10 мл бульона Сабуро.
Не извлекая систему из пакета, стерильными ножницами снимают защитный колпачок с иглы, отрезают иглу и опускают в пробирку с 10 мл сахарного бульона Хоттингера.
Вводят в систему стерильный физиологический раствор, промывают ее, после промывания обрезают противоположный конец системы с иглой и выливают по 1 мл пробирки с 10 мл указанных питательных сред. На каждую среду берут по 2 пробирки.
5.7.2. Посев на стерильность систем для взятия крови СВ-1, систем для растворения сухих лекарственных препаратов, систем-магистралей для переливания раствора из флакона во флакон.
Стерильным пинцетом извлекают изделие из упаковки. Снимают колпачки, отрезают иглы, нарезают трубки на части длиной 2-3 см и погружают все изделие во флакон (колбу) с тиогликолевой средой. Второе изделие засевают на сахарный бульон Хоттингера, третье - на бульон Сабуро. Таким образом для посевов отбирают количество изделий, кратное трем (3, 6, 9 и т.д.).
5.7.3. Посев на стерильность контейнеров полимерных с консервантом для крови одинарных 500 мл однократного применения.
Освобождают изделие в предбокснике от внутренней упаковки, протирают наружную поверхность контейнера 6% раствором перекиси водорода, укладывают на стерильный лоток, укрывают вторым стерильным лотком, после заполнения лотка контейнерами его вносят в бокс и оставляют на 30 минут, после чего проводят посев консерванта на стерильность.
При наличии шариков в контейнере их выдавливают из основания трубки, тщательно ополаскивают внутреннюю поверхность контейнера, передавливая консервант в трубки и обратно в контейнер. Затем снимают колпачок с иглы и через иглу надавливанием на контейнер, расположенный вертикально основанием вверх, свернув всю свободную от консерванта часть контейнера, вытесняют около 2,5 мл консерванта в 2 пробирки с 10 мл сахарного бульона Хоттингера, 2 пробирки с 10 мл бульона Сабуро и 2 пробирки с 10 мл тиогликолевой среды. При наличии в консерванте антибиотика засевают по 2,5 мл консерванта в 2 флакона со 100 мл тиогликолевой среды, 2 флакона со 100 мл сахарного бульона Хоттингера и 2 флакона со 100 мл бульона Сабуро.
Штуцера в предохранительной оболочке срезают стерильными ножницами, желательно изогнутыми; извлекают штуцер пинцетом из предохранительной оболочки и помещают в пробирку с 10 мл тиогликолевой среды.
5.7.4. Посев на стерильность контейнеров полимерных с консервантом для крови и ее компонентов сдвоенных 500/300 мл однократного применения.
Подготовку изделий к посеву проводят в соответствии с п.5.7.3.
Перед посевом тщательно ополаскивают консервантом обе секции контейнера, передавливая его через соединительную трубку. При наличии в изделии шариков перед посевом выдавливают их в контейнер.
Посев консерванта проводят в соответствии с п.5.7.3.