ГОСТ Р 59075-2020 Средства дезинсекционные. Методы определения показателей токсичности

     4 Методы определения показателей токсичности инсектицидных средств

Перед началом проведения испытаний необходимо собрать следующую информацию:

а) характеристику токсичности действующего вещества ИС и вспомогательных веществ с определением общетоксических, специфических и отдаленных эффектов;

б) физико-химические свойства ИС;

в) ПДК или ОБУВ действующего вещества ИС в воздухе рабочей зоны, в атмосферном воздухе городских и сельских поселений.

4.1 Аппаратура, реактивы и материалы

4.1.1 Эксикатор по ГОСТ 25336.

4.1.2 Микрометр по ГОСТ 6507.

4.1.3 Камера требуемого объема по НД изготовителя.

4.1.4 Часы по ГОСТ 27752.

4.1.5 Вода дистиллированная по ГОСТ Р 58144.

4.1.6 Раствор Хенкса.

4.2 Определение значения при введении в желудок проводят по [1] путем введения ИС через желудочный зонд. Продолжительность наблюдения после введения составляет 14 дней. Вычисление проводят методом пробит-анализа.

4.3 Определение значения при нанесении на кожу проводят по [1] с регламентированным количеством наносимого ИС. Продолжительность наблюдения после нанесения составляет 14 дней.

4.4 Определение острой токсичности при вдыхании проводят по насыщающим концентрациям паров ИС, которые создают в эксикаторах. Испытание проводят на белых мышах по [1].

4.5 Изучение влияния ИС на слизистую оболочку глаз и кожу проводят на одном из двух видов подопытных животных - кроликах или морских свинках по [1]. Раздражающее действие на слизистые оболочки глаз оценивают после однократного внесения 50 мг ИС в конъюнктивальный мешок. Местное раздражающее действие на кожные покровы изучают при однократных или повторных аппликациях 500 мг ИС от двух до четырех недель в течение 4 ч (пять дней в неделю). ИС наносят на выстриженный участок боковой поверхности тела размером 56 см (78 см) для кроликов и 25 см (55 см) для морских свинок. После окончания времени экспозиции за состоянием слизистой оболочки глаза и кожных покровов наблюдают в течение двух недель.

4.6 Кожно-резорбтивное действие ИС определяют "пробирочным тестом" (метод погружения хвоста в испытуемое ИС) на мышах или крысах по [1]. Ежедневное время экспозиции составляет от 2 до 4 ч, по окончании которого наблюдение за животными продолжают в течение двух недель. О кожно-резорбтивном действии ИС судят по гибели подопытных животных, клиническим проявлениям общетоксического или специфического действия, макроскопическим патоанатомическим изменениям.

4.7 Определение сенсибилизирующего действия проводят с использованием максимизационного адъювантного теста на морских свинках (GPMT) Магнуссона и Клигмана по ГОСТ 32375, комбинированной сенсибилизацией морских свинок по методу О.Г.Алексеевой и А.И.Петкевич по [2] или на белых мышах методом определения ГЗТ по [2]. Силу аллергенной активности определяют по классификации для пестицидов и агрохимикатов по [3].

4.7.1 При определении сенсибилизирующего действия методом О.Г.Алексеевой и А.И.Петкевич по [2] в кожу наружной поверхности уха у животных подопытной группы вводят 0,02 см раствора, содержащего 200 мкг испытуемого ИС (на дистиллированной воде). Животным контрольной группы в кожу наружной поверхности уха вводят 0,02 см дистиллированной воды. Через 10 сут в качестве первого испытания животным подопытной и контрольной групп на предварительно выстриженный участок бока наносят испытуемое ИС. У подопытных животных регистрируют реакцию кожи: наличие или отсутствие эритемы, толщину кожной складки. Второе испытание проводят после семи дополнительных аппликаций на кожу предварительно подготовленного противоположного бока у животных подопытной и контрольной групп.

После окончания эпикутанных аппликаций у животных проводят провокационную капельную кожную пробу, РСЛЛ. Правомерно использование и других методов, как специфической аллергодиагностики, так и неспецифических.

4.7.2 Реакцию ГЗТ проводят на мышах массой (20±0,5) г. В подопытную и контрольную группы берут по 10 мышей, которых сенсибилизируют 10 ммоль или 100 мкг испытуемого ИС однократно внутрикожно в основание хвоста. Сенсибилизирующая доза ИС эмульгируется в 60 мкл смеси ПАФ раствора Хенкса рН 7,5, приготовленной в соотношении 1:1. Животным контрольной группы вводят 60 мкл данной смеси без добавления испытуемого ИС.

Для выявления сенсибилизации через 5 сут в подушечку стопы одной из задних лапок мышей вводят такое, как при сенсибилизации, количество испытуемого ИС (10 ммоль или 100 мкг), растворенного в растворе Хенкса. Через 24 ч измеряют инженерным микрометром толщину обеих задних лапок в миллиметрах. О величине отека судят по разнице в толщине обеих задних лапок.

Индекс реакции , %, вычисляют по формуле

,                                                             (1)

где и - толщина лапки в испытании и контроле соответственно, мм.

Достоверным считают значение ИР более 5%.

4.8 Определение ингаляционной опасности ИС проводят в двух направлениях: оценивают его опасность в рабочих концентрациях и норме расхода в момент проведения дезинсекции (определение зоны острого биоцидного эффекта - ) и в условиях круглосуточного пребывания в обработанном ИС помещении, исходя из сроков биоцидного действия (определение зоны подострого биоцидного эффекта - ).