Приложение
к письму Минздрава России
от 06.03.2017 г. N 27-3/548

     
Определение уровня популяционного иммунитета у взрослого населения Российской Федерации к сезонным и потенциально пандемическим вирусам гриппа

    
Методические рекомендации

Методические рекомендации (MP) разработаны ФГБУ "НИИ гриппа" Министерства здравоохранения Российской Федерации (авторский коллектив: д.м.н., проф. А.А.Соминина, О.С.Коншина, Е.М.Войцеховская, к.б.н. Е.В.Кузнецова, к.м.н. B.C.Вакин, к.м.н. Е.А.Смородинцева).

21 ноября 2016 г.

Введены впервые.

Аннотация

Контроль за состоянием противогриппозного популяционного иммунитета (ПИ), являющегося следствием естественной циркуляции вирусов гриппа и вакцинации, имеет важное значение для определения пропорции восприимчивого населения к постоянно меняющимся циркулирующим вирусам гриппа и прогнозирования этиологии и тяжести предстоящих сезонных эпидемий. В последние годы установлены корреляции между уровнем ПИ и тяжестью эпидемий в отдельных городах страны. Низкий уровень ПИ является фактором риска быстрого развития тяжелых эпидемий. Кроме того, ПИ является чутким индикатором начала циркуляции нового пандемического вируса, как это было установлено в 2009 г.

Определение уровня популяционного иммунитета является составной частью традиционного надзора за гриппом. В соответствии с действующей системой надзора (Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 31 марта 2005 г. N 373) надзор за гриппом осуществляется на регулярной основе в ряде региональных опорных баз (ОБ) - Федеральных бюджетных учреждениях здравоохранения "Центр гигиены и эпидемиологии" (ФБУЗ ЦГиЭ), сотрудничающих с Федеральным центром по гриппу и ОРЗ (ФЦГ) и Национальным центром по гриппу ВОЗ (НЦГ) при ФГБУ "Научно-исследовательский институт гриппа" Министерства здравоохранения Российской Федерации. Исследованию подлежат сыворотки здоровых доноров крови в возрасте от 18 до 60 лет. Исследования проводятся дважды в год - в предэпидемический период (октябрь) и постэпидемический период (апрель). Каждая ОБ исследует по 100 сывороток доноров в указанные выше сроки. Результаты в виде протоколов исследований представляются в ФГБУ "НИИ гриппа" Минздрава России, где они обрабатываются и анализируются.

В целях стандартизации исследований и приведения их в соответствие международным требованиям при подготовке настоящих Методических рекомендаций были использованы разделы Руководства ВОЗ (WHO Global Influenza Surveillance Network: Manual for the laboratory diagnosis and virological surveillance of influenza, 2011) и российские стандарты постановки РТГА (МУ 3.3.2.1758-03, Методы определения показателей качества иммунобиологических препаратов для профилактики и диагностики гриппа).

1. Область применения

1.1. Метод предназначен для определения уровня популяционного иммунитета к вирусам гриппа в предэпидемический по гриппу период и по окончании эпидемии путем выявления антител к сезонным вирусам гриппа A(H1N1)pdm09, A(H3N2), В (Викторианской и Ямагатской линий) с последующими расчетами средних геометрических титров антител и процента серонегативных лиц к каждому из возбудителей.

1.2. В случае регистрации появления на эпидемической орбите потенциально пандемических вирусов или вспышек неясной этиологии метод рекомендуется использовать для обнаружения антител к известным, патогенным для человека и животных вирусам гриппа A(H5N1), A(H5N6), A(H5N8), A(H2N2), A(H7N9), A(H9N2) с использованием диагностических препаратов, разработанных в ФГБУ "НИИ гриппа" Минздрава России.

2. Введение

Популяционный иммунитет (ПИ) основной массы взрослого населения в возрасте 18-60 лет к современным вирусам гриппа, являющийся отражением их циркуляции на территории страны и активной иммунизации населения гриппозными вакцинами, служит одним из основных факторов, влияющих на развитие, этиологию и тяжесть эпидемий.

Исследования сывороток взрослых доноров позволяют оценить уровень ПИ в реакции торможения гемагглютинации (РТГА), по результатам которой определяют средние геометрические титры (СГТ) антител и процент восприимчивого населения (серонегативных лиц) к циркулирующим вирусам.

При постановке РТГА рекомендуется применение единой методологии с использованием стандартизованных препаратов гриппозных диагностикумов, резистентных к неспецифическим ингибиторам сывороток человека, а в качестве контроля их активности и специфичности - диагностических сывороток, содержащих антитела к антигенно актуальным вирусам гриппа. Для обеспечения специфичности реакции рекомендуется использование исключительно куриных эритроцитов.

3. Описание метода

     3.1 Преимущества метода

- РТГА проста в исполнении, экономична и обеспечивает возможность быстрого определения специфических антител к различным субтипам возбудителей сезонных эпидемий и потенциально пандемическим вирусам.

- Метод рекомендован ВОЗ также для оценки иммуногенности гриппозных вакцин.

- Защитными титрами антител, обеспечивающими защиту от гриппа в 50% случаев, принято считать титры в РТГА, равные 1:32 и выше.

- Метод может быть использован в практических вирусологических лабораториях, что позволяет определять содержание противовирусных антител в сыворотках людей в непосредственной близости к очагам необычных вспышек респираторных заболеваний.

   3.2 Показания и противопоказания к применению метода

Показания к применению метода:

- Определение уровня популяционного иммунитета взрослого населения к современным штаммам вируса гриппа.

- Расшифровка этиологии вспышек респираторных заболеваний, вызванных вирусами, которые не удается идентифицировать традиционными методами (ПЦР, иммунофлуоресцентный анализ) при использовании препаратов для детекции потенциально пандемических вирусов гриппа.

- Раннее распознавание распространения в популяции нового пандемического штамма вируса.

Противопоказания: Отсутствие материально-технического обеспечения

   3.3 Материально-техническое обеспечение

3.3.1. Материалы

- Планшеты круглодонные для иммунологических реакций

- Эритроциты кур

- Фосфатно-солевой буферный раствор, рН 7,4±0,2 (ФСБ)

- Раствор лимоннокислого натрия

- Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72

- Наконечники к дозаторам, стерильные, одноразовые

- Пробирки с пробками, объемом 5 мл, стерильные, одноразовые

- Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие, РУ N ФСР 2009/05253 от 09.07.2009 г.;

- Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СДГ), РУ N ФСР 2009/05257 от 09.07.2009 г.

3.3.2. Оборудование

- Ламинарный бокс 2 класса защиты

- Дозатор одноканальный, со сменным объемом 20-200 мкл,

- Дозатор одноканальный, со сменным объемом 100-1000 мкл

- Дозатор одноканальный, со сменным объемом 1000-5000 мкл

- Дозатор 8-канальный, со сменным объемом 20-200 мкл