9.1 Условия проведения и выполнение анализа
9.1.1 Условия проведения анализа
Условия проведения анализа подбирают в зависимости от вида применяемого жидкостного хроматографа и хроматографической колонки.
Например, для жидкостного хроматографа с обращено-фазной хроматографической колонкой С184,6х150 мм, 5 мкм применяют следующие хроматографические условия:
элюирование проводят в изократических условиях в течение 20 мин;
состав элюента: ацетонитрил - 15%, фосфатный буфер (pH =3,4 ед. pH) - 85%;
скорость подачи элюента - 1,0 см/мин;
температура колонки - 30°С;
длина волны детектирования - 235 нм.
9.1.2 Выполнение анализа
0,02 см экстракта анализируемой пробы вводят в подготовленный к работе жидкостный хроматограф.
9.2 Идентификацию пиков хроматограммы анализируемой пробы проводят сравнением с хроматограммой градуировочного раствора по двум параметрам: времени удерживания и спектральному отношению R (отношение высот хроматографического пика на разных длинах волн).
9.3 Если время удерживания и спектральные отношения пиков хроматограммы анализируемой пробы совпадают в пределах допускаемых отклонений (0,05, 3%) с временем удерживания и спектральными отношениями соответствующих им пиков хроматограммы градуировочного раствора, результат идентификации считают положительным.
9.4 Если спектральные отношения совпадают в пределах допускаемого отклонения, а разница времени удерживания пиков хроматограммы анализируемой пробы и хроматограммы градуировочного раствора больше допускаемого отклонения, проводят хроматографический анализ соответствующего градуировочного раствора по 9.1 и сравнивают время удерживания. В случае совпадения в качестве образца используют новую хроматограмму.
В случае повторного несовпадения времени удерживания используют метод добавок, для чего к анализируемой пробе добавляют сорбиновую или бензойную кислоту с массовой долей, сравнимой с массовой долей "сомнительных" пиков, и анализируют по 9.1.
Если на хроматограмме пробы с добавкой площади "сомнительных" пиков увеличились на величину, соответствующую величине добавки, то эти пики относятся к определяемым компонентам.
Если на хроматограмме пробы с добавкой наряду с "сомнительными" пиками присутствуют пики, время удерживания и спектральные отношения которых совпадают с соответствующими параметрами добавленных веществ, то сомнительные пики не относятся к определяемым компонентам.
9.5 Если время удерживания соответствующих пиков хроматограммы анализируемого раствора и хроматограммы градуировочного раствора совпадают в пределах допускаемого отклонения, а разница спектральных отношений больше допускаемого отклонения, настоящий метод не применим к данной пробе.
9.6 Массовая доля сорбиновой и бензойной кислот и их солей в анализируемой пробе не должна превышать предельных значений массовой доли градуировочных растворов.
В случае превышения анализируемую пробу, содержащую сорбиновую и бензойную кислоты и их соли, с помощью механического дозатора разбавляют дистиллированной водой и проводят хроматографический анализ разбавленных растворов.
Если массовая доля сорбиновой и бензойной кислот и их солей в анализируемой пробе ниже предельного значения градуировочного раствора, необходимо увеличить массу пробы, но не более чем в два раза.