10.1 По показателям ОП в лунках-дублях находят среднеарифметические значения. Разность значений ОП для них в процентах от среднего не должна превышать 10.
Связывание AT (или относительное поглощение) П, %, рассчитывают по формуле
, (1)
где - среднее значение ОП, измеренной в лунках с градуировочными растворами энрофлоксацина - (см. 8.2.6) или рабочими растворами экстрактов испытуемых проб;
- среднее значение ОП, измеренной в лунках с градуировочным раствором (см. 8.2.6).
По значениям процентов связывания, вычисленным для градуировочных растворов и соответствующим известным значениям массовой концентрации энрофлоксацина (мкг/дм), строят градуировочный график в полулогарифмической системе координат.
10.2 Для построения градуировочного графика используют масштабно-координатную бумагу. На ось абсцисс наносят значения логарифмов концентраций энрофлоксацина в рабочих разведениях градуировочных растворов (см. 8.2.6). По оси ординат откладывают значения процентов связывания, рассчитанные для массовых концентраций по формуле (1), и строят градуировочный график с использованием линейной зависимости.
10.3 С помощью градуировочного графика по значению процента связывания, полученного для рабочих растворов экстрактов испытуемых проб, находят логарифм массовой концентрации фторхинолонов. С помощью калькулятора вычисляют его обратное значение (антилогарифм), соответствующее массовой концентрации определяемого фторхинолона в растворе экстракта. После чего рассчитывают содержание фторхинолонов в пробе С, мкг/дм (мкг/кг), по формуле
, (2)
где с - массовая концентрация фторхинолонов в рабочем растворе экстракта испытуемой пробы, определяемая по градуировочному графику, мкг/дм;
К - коэффициент пересчета мкг/дм в рабочем растворе экстракта испытуемой пробы в мкг/дм (мкг/кг), учитывающий как разведение, так и степень извлечения фторхинолонов и равный 10.
Результаты измерений массовой концентрации (содержания) фторхинолонов С, мкг/дм (мкг/кг), округляют до целого числа.
За окончательный результат принимают среднеарифметическое двух измерений, выполненных в условиях повторяемости, если выполняется условие приемлемости
, (3)
где и - результаты определений содержания фторхинолонов, полученные в условиях повторяемости, мкг/кг;
- среднеарифметическое результатов двух определений содержания фторхинолонов в пробе, мкг/кг;
r - предел повторяемости, %, (см. таблицу 1).
10.4 Допускается использование программного обеспечения, позволяющего определять содержание фторхинолонов в пробе по средним значениям ОП, измеренным в лунках с градуировочными растворами и рабочими растворами экстрактов испытуемых проб.