Статус документа

ГОСТ 33277-2015 Продукция соковая. Определение массовой концентрации каротиноидов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

7 Подготовка к проведению измерений

7.1 Подготовка хроматографа к работе

Включение и подготовку хроматографа к работе, вывод его на режим и выключение по окончании работы выполняют в соответствии с руководством по эксплуатации.

7.2 Приготовление подвижной фазы для жидкостной хроматографии

В мерный цилиндр вместимостью 1000 см приливают 300 см воды и 700 см тетрагидрофурана, перемешивают. Полученный раствор дегазируют под вакуумом в течение 15 мин с одновременной фильтрацией через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Допускается приготовление меньшего объема подвижной фазы, исходя из потребности в ней.

Раствор хранят в стеклянной бутылке с плотно закрытой крышкой в течение двух рабочих дней.

Перед использованием подвижную фазу дегазируют в круглодонной колбе под вакуумом на ультразвуковой бане или другим способом.

7.3 Приготовление градуировочных растворов

7.3.1 Приготовление основного градуировочного раствора А каротиноидов с массовой концентрацией -каротина, лютеина и ликопина по 50,4 мг/дм

Взвешивают по (0,0053±0,0002) г -каротина, лютеина и (0,0056±0,0002) г ликопина в стакане вместимостью 100 см, растворяют в 30 см ТГФ (см. раздел 4), затем переносят в мерную колбу вместимостью 100 см, доводят объем раствора до метки ТГФ и перемешивают.

7.3.2 Приготовление рабочих градуировочных растворов

Из основного раствора готовят не менее пяти рабочих градуировочных растворов каротиноидов путем точного разбавлениея (разведения) в соответствии с таблицей 2. Аликвоты основного раствора дозируют с использованием пипеток 1-1-2-1, 1-1-2-5, 1-1-2-10, 1-1-2-25 по ГОСТ 29227.

Приготовленные рабочие растворы рекомендуется профильтровать через мембранный фильтр.

Таблица 2 - Приготовление градуировочных растворов


N градуиро- вочного раствора (i=1...5)	Компоненты	Объем мерной колбы, см	Способ приготовления	Массовая концентрация в полученном растворе С, мг/дм
1	-каротин	50	В мерную колбу приливают 20,0 см( )раствора А, приготовленного по 7.3.1, доводят до метки тетрагидрофураном и перемешивают	20,2
	Лютеин			20,2
	Ликопин			20,2
2	-каротин	50	В мерную колбу приливают 10,0 см раствора А, приготовленного по 7.3.1, доводят до метки тетрагидрофураном и перемешивают	10,1
	Лютеин			10,1
	Ликопин			10,1
3	-каротин	50	В мерную колбу приливают 5,0 см раствора А, приготовленного по 7.3.1, доводят до метки тетрагидрофураном и перемешивают	5,0
	Лютеин			5,0
	Ликопин			5,0
4	-каротин	50	В мерную колбу приливают 2,5 смраствора А, приготовленного по 7.3.1, доводят до метки тетрагидрофураном и перемешивают	2,5
	Лютеин			2,5
	Ликопин			2,5
5	-каротин	50	В мерную колбу приливают 1,0 см раствора А, приготовленного по 7.3.1, доводят до метки тетрагидрофураном и перемешивают	1,0
	Лютеин			1,0
	Ликопин			1,0

Градуировочные растворы готовят непосредственно перед градуировкой хроматографа.