ГОСТ Р 56236-2014 (ИСО 6341:2012) Вода. Определение токсичности по выживаемости пресноводных ракообразных Daphnia magna Straus

     6 Метод B

6.1 Сущность метода

Сущность метода заключается в регистрации иммобилизации пресноводных ракообразных тест-организмов Daphnia magna Straus в анализируемой пробе исследуемого объекта относительно контрольной пробы, определении ее токсичности и токсикологических показателей при тестировании в течение 48 ч.

Тестирование проводят попеременно в темноте и в режиме светового дня (16 ч свет/8 ч темнота) при температуре (20±2)°С и равномерном белом освещении в диапазоне от 500 до 1000 лк.

    6.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, материалы - по 5.2 со следующими дополнениями.

Помещение с контролируемым температурным режимом или климатическая камера.

Примечание - Тестирование допускается проводить в инкубаторе при температуре (20±2)°С в тест-контейнерах.

Тест-контейнеры и емкости из химически инертного материала и достаточной вместимостью (например, стеклянные пробирки и стаканы).

Пипетки для отбора тест-организмов достаточным диаметром для захвата тест-организмов, позволяющие захватить лишь малое количество среды.

Микропипетки из инертного пластика с луковицей на конце.

Емкости для отбора проб.

Сита (сетки 1,0 и 0,3 мм), которые могут быть использованы для перемещения взрослых тест-организмов в маточную культуру и позволяют отделить молодь от взрослых.

Тест-организмы: неонаты Daphnia magna Straus.

Примечание - Методы культивирования дафний приведены в B.4 (приложение B).

Модельный токсикант - по 5.2.

Примечание - Двухромовокислый калий (KCrO) является канцерогенным веществом, которое может быть токсично при вдыхании; использование коммерчески доступных растворов с заданной концентрацией KCrO для приготовления исходного раствора эталонного вещества может снизить риск вдыхания токсичной пыли в лаборатории.

Культивационная вода, приготовленная в соответствии с требованиями приложения Е.

Калий хлористый по ГОСТ 4234, х.ч.

Магний сернокислый 7-водный по ГОСТ 4523, х.ч.

Натрий углекислый однозамещенный по ГОСТ 4201, х.ч.

Кислота борная по ГОСТ 9656, х.ч.

6.3 Отбор проб для тестирования - по разделу 4.
     

    6.4 Подготовка к тестированию - аналогично 5.3 с использованием культивационной воды (Е.2, приложение Е) и тест-организмов (B.2, приложение B).

Примечание - Проверку физиологической чувствительности тест-организмов по отношению к модельному токсиканту (двухромовокислому калию) проводят по 5.3.3 в условиях тестирования по 6.5. При этом используют данные, приведенные в таблице А.4 (приложение А) и соответствующие статистические методы математического анализа для определения 24 ч ЭК модельного токсиканта.

Значения 24 ч ЭК модельного токсиканта должно находиться в пределах 0,6-2,1 мг/дм.

6.5 Проведение тестирования

6.5.1 Проводят тестирование по 5.4, с использованием тест-организмов по B.2 (приложение B).

Тестирование проводят в течение (48±2) ч при температуре (20±2)°С в помещении с регулируемой температурой (или в терморегулируемой камере) при переменном воздействии равномерного белого освещения в диапазоне 500-1000 лк (16 ч свет/8 ч темнота).

При проведении тестирования рекомендуется использовать одинаковые емкости.