ГОСТ 32474-2013

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Определение коэффициента распределения н-октанол/вода методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Testing of chemicals of environmental hazard. Determination of Partition Coefficient (n-octanol/water) by HPLC method

МКС 71.040.50

Дата введения 2014-08-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным унитарным предприятием "Всероссийский научно-исследовательский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и веществ" (ФГУП "ВНИЦСМВ") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии документа, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 5 ноября 2013 г. N 61-П)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 22 ноября 2013 г. N 787-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32474-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 августа 2014 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному документу OECD, Test No. 117:2004* "Коэффициент распределения (н-октанол/вода), метод высокоэффективной жидкостной хроматографии" ("Partition Coefficient (n-octanol/water), HPLC Method", IDT).

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного документа для приведения в соответствии с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6)

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Апрель 2019 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
     
     В случае пересмотра, изменения или отменены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

Введение

Настоящий стандарт разработан в рамках комплекса стандартов, относящихся к методам испытаний химической продукции, представляющей опасность для окружающей среды. Данный стандарт идентичен документу OECD по испытаниям химической продукции OECD Guideline For The Testing of Chemicals. Partition Coefficient (n-octanol/water), High Performance Liquid Chromatography (HPLC), принятому Советом ОЭСР 13 апреля 2004 года.

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает методы испытаний для определения коэффициента распределения н-октанол/вода методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

     2 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

2.1 коэффициент распределения н-октанол/вода (): соотношение равновесных концентраций вещества растворенного в двухфазной системе, состоящей из двух практически несмешивающихся растворителей.

2.2 "мертвое время": Время, необходимое, чтобы неудерживаемое вещество прошло установку.

     3 Основные положения

3.1 Коэффициент распределения н-октанол/вода () является соотношением равновесных концентраций вещества растворенного в двухфазной системе, состоящей из двух практически несмешивающихся растворителей. В случае н-октанола и воды см. формулу

,                                            (1)

где - концентрация н-октанола;

- концентрация воды.

Будучи отношением двух концентраций, является безразмерным и обычно приводится в виде десятичного логарифма.

3.2 является важным параметром в изучении трансформации химических веществ в окружающей среде. Была показана высокая значимость связи неионизированной формы вещества с его способностью к биоаккумулированию в рыбе. Также было доказано, что является удобным параметром для предсказания адсорбции веществ в почве и для установления количественной зависимости структура - активность для широкого диапазона биологических эффектов.

3.3 Значение в диапазоне от минус двух до четырех (иногда свыше 5) может быть экспериментально определено методом [2]. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) применим для диапазона значений от ноля до шести. Этот метод может требовать оценки для выбора референтного вещества и поддержки любых выводов, основывающихся на данных, полученных в тесте. Методы расчета кратко обсуждаются в приложении А к настоящему стандарту. При ВЭЖХ используется изократный метод.

_______________

Верхний предел определяется необходимостью достижения полного разделения фаз после установления распределительного равновесия и перед отбором проб для аналитического определения. Если надлежащие условия тщательно соблюдаются, то верхний лимит может быть расширен до более высоких значений .

3.4 Значения зависят от условий окружающей среды, таких как температура, рН, ионная сила и т.д., и для правильной интерпретации данных о эти условия должны быть определены в эксперименте. Для ионизируемых веществ могут быть использованы другие альтернативные методы, но в некоторых случаях более целесообразно использовать методы ВЭЖХ для рН, свойственных для окружающей среды (см. 3.8).

3.5 Обратно-фазовая ВЭЖХ выполняется на аналитических колонках, заполненных доступной в промышленных масштабах твердой фазой, содержащей длинные углеводородные цепи (например, С8, С18) химически связанной на силикагеле.

3.6 Вещество вводится в перегородки колонки между фазой подвижного растворителя и стационарной углеводородной фазой, так он транспортируется вдоль колонны по подвижной фазе. Химические вещества удерживаются в пропорции с их коэффициентом разделения углеводород-вода, где гидрофильное соединение элюируется первым, а липофильное - последним. Это время удержания описывается емкостным фактором , вычисляемым по формуле:

,                                                     (2)

где - время удержания исследуемого вещества;

- "мертвое" время, т.е. среднее время, необходимое для прохождения через колонку молекул растворителя.

Количественные методы анализа не требуются, необходимо только определение времени удерживания.

3.7 Коэффициент распределения октанол/вода тестируемого вещества может быть рассчитан экспериментальным определением его емкостного фактора , а затем подставлением значения фактора в следующую формулу

,                                           (3)

где , коэффициенты линейной регрессии.

Вышеуказанная формула может быть выведена путем построения уравнения линейной регрессии зависимости референтного вещества от емкостного фактора референтного вещества.

3.8 Обратно-фазовая ВЭЖХ дает возможность оценить коэффициент распределения в диапазоне от ноля до шести, но, в исключительных случаях, может быть расширено до покрытия диапазона от шести до десяти. Это может требовать того, чтобы подвижная фаза менялась. Этот метод не применим для сильных кислот и оснований, комплексов металлов, веществ, которые реагируют с элюентом, или поверхностно-активными веществами. Значения для ионизированной формы могут быть представлены в виде их неионизированных форм (свободная кислота или свободное основание) только путем использования соответствующего буферного раствора с рН ниже, чем для свободных кислот или выше для свободных оснований.

Примечание - - отрицательный десятичный логарифм константы диссоциации кислоты.

Кроме того, может быть представлен этот рН метрический метод для испытаний неионизированных форм веществ. Если значение определено для использования в классификации оценки опасности для окружающей среды или оценки экологических рисков, испытание должно быть представлено в диапазоне рН, соответствующему природному значению, например, рН в диапазоне от пяти до девяти.

3.9 В некоторых случаях примеси могут затруднить интерпретацию результатов из-за неопределенности в распределении пиков. Для смесей, которые приводят к нерешенным полосам, должны быть представлены вышний* и нижний пороги и процент области каждого пика. Для смесей, которые являются группой гомологов, также, должен быть указан средневзвешенный показатель , рассчитанный на основе единичных значений и соответствующих процентных значений областей. При расчете во внимание должны быть приняты все пики, которые делают вклад от 5% и более от общей площади пика.

________________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.     

(4)

Средневзвешенное значение справедливо только для веществ или смесей (например, талловое масло), состоящих из гомологов (например, серии алканов). Смеси могут быть измерены со значимым результатом при условии, что аналитический детектор имеет такую же чувствительность по отношению ко всем веществ в смеси и может иметь надлежащее разрешение.     

     4 Описание метода

4.1 Информация о тестируемом веществе

Перед тем как использовать данный метод, должны быть известны константа диссоциации, структурная формула и растворимость в подвижной фазе. Также может быть полезной информация о гидролизе.

4.2 Критерии качества

4.2.1 С целью повышения достоверности измерения, определения должны проводиться в двух параллельных тестах.

Повторяемость: значения , полученные из повторных измерений, которые выполнены в идентичных условиях и используют тот же набор референтных веществ, должны укладываться в диапазон ±0,1 единицы измерения.