ГОСТ 32538-2013

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Определение биоконцентрации на рыбах в проточных аквариумах

Testing of chemicals of environmental hazard. Determination of bioconcentration in flow-through fish test

МКС 71.040.50

Дата введения 2014-08-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены".

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным унитарным предприятием "Всероссийский научно-исследовательский центр стандартизации, информации и сертификации сырья, материалов и веществ" (ФГУП "ВНИЦСМВ"); Техническим комитетом по стандартизации N 339 "Безопасность сырья, материалов и веществ" на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии документа, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 14 ноября 2013 г. N 44)

За принятие проголосовали:

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 22 ноября 2013 г. N 771-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32538-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 августа 2014 г.

5 Настоящий стандарт идентичен международному документу OECD, Test No. 305:1996* "Биоконцентрация: Определение биоконцентрации на рыбах в проточных аквариумах" ("Bioconcentration: Flow-through Fish Test", IDT).

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного документа для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6)

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Май 2019 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

Введение

В подробной обзорной статье по биоконцентрации, подготовленной Японией (февраль 1990), было рекомендовано объединить пять существующих методов по определению биоконцентрации ОЭСР (305 А-Е) в единый метод. В то же время проводилась работа по актуализации Руководства 305 Е "Исследование на рыбах в проточных аквариумах", представляющего собой измененный метод межлабораторных исследований [1]. Было достигнуто соглашение, что актуализированная версия Руководства 305 Е станет основой для объединенного метода.

Международный документ ОЭСР Тест N 305 представляет собой консолидированный вариант метода на основе пяти предыдущих методов (305 А-Е) и заменяет их. Метод описывает процедуру для определения потенциала биоконцентрации веществ в рыбе в проточных аквариумах. Исследование рекомендуется проводить в проточных условиях, однако, при условии соответствия критериям применимости (см. параграф 5.2), допускается проведение исследования в полустатическом режиме.     

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает процедуру определения возможности биоконцентрации веществ в рыбе в проточных аквариумах.

Метод дает подробное описание выполнения испытания, предоставляя при этом адекватную свободу для адаптации проекта эксперимента к условиям отдельных лабораторий, а также для выполнения различных оценок опытных веществ. Метод наиболее подходит для определения стабильных органических веществ, чьи показатели находятся в пределах от 1,5 до 6,0 (4), но также может использоваться со сверхлипофильными веществами (6,0). Предварительная оценка коэффициента биоконцентрации, иногда обозначаемая как , для таких сверхлипофильных веществ предположительно будет выше, чем ожидаемые коэффициенты биоконцентрации () в статических условиях, получаемые в ходе лабораторных экспериментов. Предварительные оценки коэффициента биоконцентрации органических веществ со значениями примерно до 9,0 могут быть получены с помощью уравнения Бинтейна и его соавторов.

Параметры, которые характеризуют потенциал биоконцентрации включают: константу величины поглощения (), константу величины выведения () и коэффициент биоконцентрации ().

Опытные вещества с меткой способны упростить анализ образцов воды и рыбы и могут использоваться в случае необходимости принятия решения, следует ли выполнять идентификацию и количественное определение продуктов распада. При измерении общего количества остатков с радиоактивной меткой (например, горением или растворением ткани), расчет производят на основе исходного соединения, аккумулированных продуктов обмена веществ и ассимилированного углерода. Поэтому значения , полученные на основе остаточного количества веществ с радиоактивной меткой, могут быть несопоставимы с , полученными на основе определенного химического анализа одного лишь исходного соединения. В исследованиях, где используются вещества с меткой, процедуры очистки помогут в определении значения , основанного на исходном соединении, а также дать оценку главным продуктам обмена веществ, в случае необходимости. Определение для исходного соединения должно основываться на концентрации исходного соединения в рыбе, а не на общем количестве меченых остатков. , полученные на основе общего количества меченых остатков, могут служить одним из критериев необходимости в идентификации продуктов распада и их количественном определении. Также возможно объединить исследование метаболизма рыбы с исследованием биоконцентрации анализом и идентификацией остаточных количеств веществ в тканях.

     2 Термины, обозначения и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

2.1 биоконцентрация/бионакопление (bioconcentration/bloaccumulation): Повышение концентрации исследуемого веществ в/на организме (определенных тканях) относительно концентрации исследуемого вещества в среде обитания.

2.2 константа величины выведения (потери) (depuration (loss) rate constant): Значение, определяющее показатель уменьшения концентрации исследуемого вещества в рыбе (или ее определенных тканях) после перемещения исследуемой рыбы из среды, содержащей исследуемое вещество, в среду, не содержащую такое вещество ( выражена в днях).

2.3 константа величины поглощения (uptake rate constant): Числовая величина, определяющая показатель повышения концентрации исследуемого вещества в/на исследуемой рыбе (или ее определенных тканях) в случае, когда рыба подвергается воздействию этого химического вещества ( выражена в днях).

2.4 коэффициент разделения октанол/вода (octanol-water partition coefficient): Соотношение растворимости химического вещества в н-октаноле и воде в состоянии равновесия, также выражается, как . Логарифм используется в качестве потенциала химического вещества к биоконцентрации в водных организмах.

2.5 плато/стационарное состояние (plateau/steady-state): Состояние, которое достигается, когда кривая графика опытного вещества, накопленного в рыбе (), и времени становится параллельной временной оси, и результаты трех последовательно проведенных анализов , выполненных с образцами, отбираемыми по меньшей мере через каждые два дня, которые не отличаются друг от друга более, чем на ±20%, а также при отсутствии значительной разницы между тремя периодами отбора образцов. Если анализируются смешанные образцы, то требуется, по меньшей мере, четыре последовательно проведенных анализа. Для медленно отбираемых опытных веществ интервал в семь дней будет самым подходящим.

2.6 фаза воздействия или поглощения (exposure/uptake phase): Время, в течение которого рыба подвергается воздействию исследуемого химического вещества.

2.7 фаза поствоздействия или очистки (потеря) [post-exposure or depuration (loss) phase]: Время, следующее за перемещением исследуемой рыбы из среды, содержащей исследуемое вещество в среду, свободную от исследуемого вещества, в течение которого изучается выведение (или чистая потеря) вещества из исследуемой рыбы (или ее определенных тканей).

2.8 фактор биоконцентрации ( или ) (bioconcentration factor): Соотношение между концентрацией исследуемого вещества в/на рыбе или определенных тканях [ в виде мг/г (частей на миллион)] и концентрацией химического вещества в окружающей среде [ в виде мг/г (частей на миллион)] в любой момент времени в течение фазы поглощения.

2.9 фактор биоконцентрации стационарного состояния ( или ) (steady state bioconcentration factor): Фактор, не меняющийся значительно на протяжении длительного периода времени, если концентрация опытного вещества в окружающей среде остается постоянной в течение всего периода времени.

2.10 фактор биоконцентрации (bioconcentration factor): Кинетический коэффициент концентрации [], рассчитанный непосредственно на основе кинетических констант скорости ( - см. ниже).

     3 Общие положения

3.1 Тест состоит из двух частей: фазы воздействия (поглощения) и фазы поствоздействия (очистки). Во время фазы поглощения отдельные группы рыб одного вида подвергают воздействию образцов исследуемого вещества, по меньшей мере, в двух концентрациях. Затем помещают в промежуточную среду, не содержащую исследуемое вещество, для прохождения фазы очистки. Данная фаза необходима всегда, за исключением случаев, когда поглощение вещества во время первой фазы оказалось незначительным (например, показатель меньше 10). Концентрацию тестируемого вещества в/на рыбе (или специальных образцах ткани) отслеживают на протяжении обеих фаз теста. Помимо тестирования с применением двух разных концентраций, контрольную группу рыб помещают в идентичные условия за исключением отсутствия в среде тестируемого вещества для соотнесения возможных негативных последствий, наблюдаемых в двух первых тестируемых группах с показателями контрольной группы и получения информации о фоновом уровне концентрации тестируемого вещества.

3.2 Фаза поглощения длится 28 сут за исключением случаев, когда стационарное состояние достигается раньше. Стационарное состояние достигается при значении концентрации исследуемого вещества в рыбе в пробах, взятых с двухдневным интервалом и различающихся не более чем на 20%.

Прогнозирование длительности фазы поглощения и времени наступления стационарного состояния может основываться на уравнениях, приведенных в приложении C.

Фазу очистки начинают с перемещения рыбы в чистый сосуд с аналогичной средой без содержания тестируемого вещества. Коэффициент биоконцентрации рассчитывают одновременно и как соотношение () концентрации в рыбе (), и в воде () в предполагаемый момент стационарного состояния, и как кинетический коэффициент биоконцентрации , являющийся соотношением констант поглощения () и выделения () при условии, что биоконцентрация может быть представлена реакцией первого порядка.

_________________

Если реакция не первого порядка, следует использовать более сложные модели (см. приложение E).

3.3 Если в течение 28 дней стадия стабильности не наступает, фаза поглощения продлевается до ее наступления или до 60 дней, в зависимости от того, что наступит раньше; после этого начинается фаза очистки.

3.4 Константа поглощения, константа очистки (потери) (или константы, для получения которых применяются более сложные модели), коэффициент биоконцентрации, а также, если возможно, предел достоверности для каждого из этих параметров рассчитываются при помощи моделей, наиболее соответствующих полученным данным по концентрации в рыбе и в воде.

3.5 Коэффициент биоконцентрации выражается функцией общего веса рыбы во влажном состоянии. В определенных целях могут использовать специальные образцы ткани или органы (например, мышцы, печень), если рыба достаточно велика, кроме того, рыба может быть разделена на филе и внутренности. Так как для многих органических веществ существует зависимость между потенциальной биоконцентрацией и липофильностью, наличествует соответствующая взаимосвязь между количеством жира в тестируемой рыбе и наблюдаемым уровнем биоконцентрации тестируемых веществ. Таким образом, для снижения воздействия этой причины вариативности в результатах теста, для веществ с высокой липофильностью (т.е. имеющих 3) биоконцентрацию следует определять относительно количества жировой ткани в дополнение к весу всей туши. Содержание жира должно, по возможности, определяться на том же биологическом материале, что и применяемый для определения биоконцентрации тестируемого вещества.

     4 Подготовка к испытанию

     4.1 Подготовка исследуемого вещества