ГОСТ Р ИСО 13496-2013

     

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

Обнаружение красителей. Метод тонкослойной хроматографии

Meat and meat products. Detection of colouring agents. Method using thin-layer chromatography

ОКС 67.120.10

Дата введения 2015-01-01

Предисловие

1 ПОДГОТОВЛЕН Государственным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт птицеперерабатывающей промышленности" Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ "ВНИИПП" Россельхозакадемии) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 4

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 "Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность"

3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 22.11.2013 г. N 1615-ст

4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 13496:2000* "Мясо и мясные продукты. Обнаружение красителей. Метод с применением тонкослойной хроматографии" (ISO 13496:2000 "Meat and meat products - Detection of colouring agents - Method using thin-layer chromatography", IDT).

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

ИСО 13496 подготовлен Техническим комитетом ISO/ТС 34 "Пищевые продукты", Подкомитетом SC 6 "Мясо и мясные продукты".

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

6 Следует иметь в виду, что некоторые элементы международного стандарта могут быть объектом патентных прав. ISO не несет ответственность за идентификацию какого-либо одного или всех патентных прав          

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Октябрь 2019 г.

Правила применения настоящего стандарта установлены в статье 26 Федерального закона от 29 июня 2015 г. N 162-ФЗ "О стандартизации в Российской Федерации". Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод тонкослойной хроматографии для обнаружения синтетических водорастворимых красителей в мясе и мясных продуктах.

Данный метод может быть использован для обнаружения следующих красителей:

Синонимы и идентификационные номера этих красителей приведены в приложении А.

Растительные красители и растительные экстракты, не препятствующие обнаружению с помощью данного метода, приведены в приложении В.1.

Натуральные красители, которые в некоторых случаях могут препятствовать обнаружению по данному методу, приведены в приложении В.2.

     2 Нормативные ссылки          

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированных - последнее издание (включая все изменения).

ISO 3696:1987, Water for analytical laboratory use - Specification and test methods (Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний)

AOAC 46.1.08:1995, Official Methods of Analysis (AOAC International) (Официальные методы анализа)               

     3 Термин и определение

В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:

3.1 обнаружение красителей: Обнаружение наличия или отсутствия красителей с помощью метода, описанного в настоящем стандарте.

     4 Сущность метода

Красители экстрагируют из пробы горячей водой и адсорбируют на полиамидном порошке. Экстрагированные красители очищают с помощью колоночной хроматографии и затем элюируют из колонки. Идентификацию красителей проводят с помощью метода тонкослойной хроматографии.

     5 Реактивы

Используют реактивы только признанной аналитической чистоты, если не указано иное.

5.1 Вода, соответствующая по крайней мере степени чистоты 3 по ИСО 3696.

5.2 Петролейный эфир с диапазоном температуры кипения от 40°С до 60°С.

5.3 Метанол.

5.4 Аммиак, 25%-ный водный раствор, =0,910 г/см.

5.5 Кислота уксусная массовой долей 100%, =1,050 г/см.

5.6 Цитрат натрия дигидрат.

5.7 Пропан-1-ол.

5.8 Этилацетат.

5.9 2-Метил-2-пропанол.

5.10 Кислота пропионовая.

5.11 Раствор-элюент для колоночной хроматографии

Смешивают 95 объемов метанола (см. 5.3) с 5 объемами раствора аммиака (см. 5.4).

5.12 Кислота уксусная, 50%-ный раствор в метаноле

Смешивают один объем уксусной кислоты (см. 5.5) с одним объемом метанола (см. 5.3).

5.13 Полиамидный порошок, с размером частиц от 0,05 до 0,16 мм.

5.14 Песок, мелкозернистый, промытый в соляной кислоте и прокаленный.

5.15 Стандарты красителей

Чистота стандартов красителей может быть различной, поэтому необходимо знать чистоту красителей, используемых в качестве стандартов. Чистота должна определяться по методу АОАС 46.1.08.

Примечание - Сертифицированные пищевые красители также могут использоваться в качестве стандартов.

5.16 Стандартные растворы для тонкослойной хроматографии

Стандартные водные растворы каждого красителя (см. 5.15) концентрацией около 1 г/дм готовят отдельно.

Растворы индигокармина готовят в день использования. Растворы других красителей могут храниться в темноте не более трех месяцев (растворы эритрозина - в течение одного месяца).

5.17 Элюент для тонкослойной хроматографии: раствор I

В мерной колбе с одной отметкой вместимостью 1000 см взвешивают 25 г дигидрата цитрата натрия (см. 5.6) с точностью 0,1 г. Растворяют в воде, доводят до метки водой и перемешивают.

Смешивают 80 объемов полученного раствора цитрата с 20 объемами раствора аммиака (см. 5.4) и 12 объемами метанола (см. 5.3).

Для предотвращения или снижения влияния сафлора или шафрана рекомендуется использовать раствор II (см. 5.18).

5.18 Элюент для тонкослойной хроматографии: раствор II

Смешивают шесть объемов пропан-1-ола (см. 5.7) с одним объемом этилацетата (см. 5.8) и тремя объемами воды.

5.19 Элюент для тонкослойной хроматографии: раствор III

Смешивают 50 объемов 2-метил-2-пропанола (см. 5.9) с 12 объемами пропионовой кислоты (см. 5.10) и 38 объемами воды.

     6 Оборудование

Применяется обычное лабораторное оборудование, и в частности следующее.

6.1 Оборудование механическое или электрическое для гомогенизации лабораторных проб

Используют высокоскоростной измельчитель куттерного типа или мясорубку с диаметром отверстий решетки не более 4,0 мм.

6.2 Пробирки центрифужные стеклянные вместимостью 75 см.

6.3 Колбы плоскодонные вместимостью 250 см с притертыми стеклянными пробками.

6.4 Колбы круглодонные вместимостью 100 см с притертыми стеклянными пробками.

6.5 Центрифуга, обеспечивающая радиальное ускорение примерно 2000 .

6.6 Испаритель ротационный.

6.7 Колонка хроматографическая стеклянная, с пористым фильтром и краном, длиной около 20 см, диаметром около 30 мм и размером пор фильтра от 40 до 100 мкм (класс пористости Р 100 по [2]).

В колонку помещают небольшой кусок стекловаты и добавляют от 1 г до 2 г песка (см. 5.14).

6.8 Емкость из пластика вместимостью около 10 см, с крышкой.

6.9 Пластинки для тонкослойной хроматографии, покрытые слоем порошка из целлюлозы толщиной 0,10 мм, или эквивалентные пластинки.

Допускается использование готовых пластинок.

6.10 Микропипетки вместимостью около 5 мм.

6.11 рН-метр, обеспечивающий измерение с точностью до 0,1 рН.

     7 Отбор проб

Отбор проб не является частью метода, установленного настоящим стандартом. Рекомендуемый метод отбора проб приведен в [1].