5.1 Сущность метода заключается в экстракции витаминов А (ретинола ацетата), Е (токоферола ацетата) из премикса изопропиловым спиртом и последующем определении содержания витаминов обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографией.
5.2 Средства измерений, оборудование, материалы и реактивы
Весы лабораторные по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г и допускаемой погрешностью ±0,001 г.
Хроматограф жидкостный микроколоночный "Милихром", укомплектованный спектрофотометрическим детектором, пригодным для измерения оптической плотности при длине волны от 190 до 360 нм, самописцем или интегратором, позволяющим измерять высоту и площадь пиков, и компьютером с установленным программным обеспечением для обработки результатов измерений.
Спектрофотометр со спектральным диапазоном работы от 186 до 1100 нм.
Колонка хроматографическая одного из указанных размеров: 264, 280, 2120 мм, с числом теоретических тарелок не менее 4000, заполненная одним из следующих сорбентов: Силасорб С-18, Силасорб РНС-18, Сепарон С-18.
Насос водоструйный по ГОСТ 25336.
Баня водяная с терморегулятором.
Колбы конические со шлифом Кн-2-25(50)-14/23 ХС по ГОСТ 25336.
Пипетки 1-1(1, 2)-1 по ГОСТ 29169.
Пипетки 1-1-1(2)-1(10) по ГОСТ 29227.
Цилиндры 1(2, 3, 4)-100(500) по ГОСТ 1770.
Колбы мерные 2-25(50)-1(2) по ГОСТ 1770.
Колба К-1-500-29/32 ХС по ГОСТ 25336.
Воронка с фильтром ВФО-40-ПОР 16 ХС по ГОСТ 25336.
Холодильники ХПТ-1-100-18 ХС, ХШ-1-400-29/32 ХС по ГОСТ 25336.
Окись кальция по ГОСТ 8677.
Стандартный образец витамина А (ретинола ацетата), содержащий не менее 1 млн ME витамина А в 1 г.
Стандартный образец витамина Е (токоферола ацетата) с массовой долей не менее 99,0%.
Спирт изопропиловый (пропанол-2) по ГОСТ 9805.
Спирт этиловый ректификованный технический объемной долей 96% по ГОСТ 18300.
Спирт пропиловый (пропанол-1).
Ацетонитрил.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Примечания
1 Допускается использование других средств измерений и оборудования с техническими и метрологическими характеристиками не ниже указанных.
2 Все реактивы должны быть квалификации х.ч. или ч.д.а.
3 Допускается использование других материалов с характеристиками не ниже указанных.