Энзиматическое агар-диффузное определение фосфорорганических инсектицидов в продуктах животного происхождения
Принцип метода. В основу метода* положен принцип количественного определения антибиотиков, модифицированный Санди для определения остатков фосфорорганических пестицидов в растениях. Фосфорорганические пестициды диффундируют в содержащий холинэстеразу слой агара и угнетают фермент. Затем слой с агаром обрабатывают ацетилхолином, при энзиматическом расщеплении которого образуется уксусная кислота. Она изменяет окраску содержащегося в агаре индикатора - бромтимолового синего. Диаметры или площади участков агара с измененной окраской зависят от концентрации инсектицида в растворе. Сильные ингибиторы холинэстеразы могут быть определены сразу, а слабые (эфиры тио- и дитиофосфорной кислот) - после активации.
________________
* А.А.Непоклонов, В.К.Метелица (ВНИИВС).
Хлороформ
Спирт этиловый 96°-ный
Ацетон, ч.д.а.
Агар
Бромтимоловый синий (индикатор)
Едкий натр
Нормальная лошадиная сыворотка
Насыщенный водный раствор брома
0,1 М раствор тиосульфата натрия
Ацетилхолин
Индикаторная бумага (рН 6,6-8,1) или рН-метр
Стандартные растворы инсектицидов в этиловом спирте или ацетоне
Гомогенизатор
Водяная баня
Ножницы
Стеклянные воронки
Круглодонные колбы на 25, 50, 100 и 1000 мл
Делительные воронки на 100 мл
Бюксы на 25 и 50 мл с пришлифованными крышками