4.2.1 Сущность метода
Метод основан на идентификации и количественном определении D-глюкуроно--лактона с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением рефрактометрического и ультрафиолетового детектирования.
4.2.2 Условия проведения анализа
При подготовке и проведении измерений должны быть соблюдены следующие условия:
температура окружающего воздуха | от 10 °С до 35 °С; | |||
относительная влажность воздуха | от 40% до 95%; | |||
напряжение в электросети | 220 В. |
Помещение, где проводят работы с реактивами, должно быть обеспечено приточно-вытяжной вентиляцией. Все операции с реактивами следует проводить в вытяжном шкафу.
4.2.3 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы и материалы
Жидкостной хроматограф с насосом высокого давления с подачей растворителя от 0,1 до 5 см/мин.
Хроматографическая аналитическая колонка: длина колонки - 250 мм, диаметр - 4,6 мм, заполненная октадецилсиликагелем размером частиц 5 мкм.
Хроматографическая аналитическая колонка: длина колонки - 300 мм, диаметр - 7,8 мм, с катионитом в форме Са на основе сульфированного стиролдивинилбензола в ионной кальциевой форме (8%).
Рефрактометрический детектор: предел детектирования по глюкозе 1·10 г.
Термостат колонок: температурный диапазон от 10 °С до 80 °С.
Спектрофотометрический детектор: диапазон длин волн от 190 до 950 нм.
Микрошприц МШ-25 для жидкостной хроматографии.
Ультразвуковая установка с частотой ультразвука 43-45 кГц.
Аппарат для встряхивания проб.
Весы лабораторные по ГОСТ Р 53228 с пределами абсолютной погрешности однократного взвешивания ±0,0001 г.
Колбы мерные наливные 2-50-2, 2-100-2, 2-250-2, 1-1000-2 по ГОСТ 1770.
Пипетки 4-1-2-2 или 5-1-2-2, 4-2-2-10 или 5-2-2-10, 4-2-2-25 или 5-2-2-25 по ГОСТ 29227.
Ацетонитрил для ВЭЖХ.
Шкаф сушильный, обеспечивающий нагрев до 150 °С.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или дистиллированная, фильтрованная через капроновый фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
Бумага фильтровальная с размером пор 0,5 мкм по ГОСТ 12069.
Бумажные фильтры обеззоленные марки ФОМ.
Капроновый фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
D-глюкуроно--лактон кристаллический с содержанием основного вещества не менее 99,9%.