ГОСТ Р ИСО 10993-5-2009

Группа Р20

     

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ИЗДЕЛИЯ МЕДИЦИНСКИЕ

ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ МЕДИЦИНСКИХ ИЗДЕЛИЙ

Часть 5

Исследования на цитотоксичность: методы

Medical devices. Biological evaluation of medical devices. Part 5. Tests for cytotoxicity

ОКС 11.100.20

ОКП 94 4000

Дата введения 2010-09-01

     
Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Автономной некоммерческой организацией "Институт медико-биологических исследований и технологий" (АНО "ИМБИИТ")

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 422 "Оценка биологического действия медицинских изделий"

3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 2 декабря 2009 г. N 541-ст

4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 10993-5:1999 "Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 5. Исследования на цитотоксичность: методы in vitro" (ISO 10993-5:1999 "Biological evaluation of medical devices - Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity").

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации, сведения о которых приведены в дополнительном приложении А

5 ВЗАМЕН ГОСТ Р ИСО 10993.5-99

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

Введение

Соблюдение положений стандартов серии ИСО 10993 "Оценка биологического действия медицинских изделий" позволит обеспечить системный подход к исследованию биологического действия медицинских изделий.

Целью этих стандартов не является безусловное закрепление единообразных методов исследований и испытаний за группами однородных медицинских изделий в соответствии с принятой классификацией их по виду и длительности контакта с организмом человека. Поэтому планирование и проведение исследований и испытаний должны осуществлять специалисты, имеющие соответствующую подготовку и опыт в области санитарно-химической, токсикологической и биологической оценок медицинских изделий.

Стандарты серии ИСО 10993 являются руководящими документами для прогнозирования и исследования биологического действия медицинских изделий на стадии выбора материалов, предназначенных для их изготовления, а также для исследований готовых изделий.

В серию ИСО 10993 входят следующие части под общим названием "Оценка биологического действия медицинских изделий":

Часть 1 - Оценка и исследования;

Часть 2 - Требования к обращению с животными;

Часть 3 - Исследования генотоксичности, канцерогенности и токсического действия на репродуктивную функцию;

Часть 4 - Исследование изделий, взаимодействующих с кровью;

Часть 5 - Исследования на цитотоксичность: методы in vitro;

Часть 6 - Исследование местного действия после имплантации;

Часть 7 - Остаточное содержание этиленоксида после стерилизации;

Часть 9 - Основные принципы идентификации и количественного определения потенциальных продуктов деградации;

Часть 10 - Исследование раздражающего и сенсибилизирующего действия;

Часть 11 - Исследование общетоксического действия;

Часть 12 - Приготовление проб и стандартные образцы;

Часть 13 - Идентификация и количественное определение продуктов деградации полимерных медицинских изделий;

Часть 14 - Идентификация и количественное определение продуктов деградации изделий из керамики;

Часть 15 - Идентификация и количественное определение продуктов деградации изделий из металлов и сплавов;

Часть 16 - Моделирование и исследование токсикокинетики продуктов деградации и вымывания;

Часть 17 - Установление пороговых значений для вымываемых веществ;

Часть 18 - Исследование химических свойств материалов;

Часть 19 - Исследование физико-химических, морфологических и топографических свойств материалов;

Часть 20 - Принципы и методы исследования иммунотоксического действия медицинских изделий.

По причине широкого применения исследований цитотоксичности in vitro и распространенности их использования при оценке широкого круга медицинских изделий и материалов, целью настоящего стандарта ИСО 10993 является не обозначение одного исследования, а, скорее, определение схемы испытаний, которая требует принятия решений посредством серии шагов. Такой подход должен привести к выбору наиболее подходящего исследования.

Приводятся три категории исследований: экстракционный метод, метод прямого контакта и метод опосредованного контакта.

Выбор одной или нескольких из этих категорий зависит от характера оцениваемого образца, потенциального места использования и характера использования.

Затем этот выбор определяет детали приготовления испытуемых образцов, приготовление клеточных культур, а также способ, при помощи которого клетки подвергаются воздействию образцов или их экстрактов.

В конце периода воздействия проводится оценка наличия и степени эффекта цитотоксичности. Настоящий стандарт ИСО 10993 намеренно предоставляет свободу при выборе типа оценки. Такая стратегия делает доступными целый ряд испытаний, что отражает подход многих групп, поддерживающих биологические испытания in vitro.

Многочисленные используемые методы и конечные точки, измеряемые при определении цитотоксичности, могут быть объединены в категории по типу оценки:

a) оценка повреждения клеток морфологическим способом;

b) оценка повреждения клеток;

c) оценка роста клеток;

d) оценка специфических аспектов клеточного метаболизма.

Следовательно, существует несколько альтернативных способов получения результатов в каждой из этих четырех категорий. Исследователь должен быть осведомлен о категориях испытаний, а также знать, к какой из них относится определенная методика, для того, чтобы проводить сравнения с другими результатами на схожих медицинских изделиях или материалах и для проведения межлабораторных испытаний.

При планировании испытаний необходимо учитывать природу испытуемого материала. Многие факторы оказывают значительное влияние на тест-систему, что может привести к ложным результатам. Например, известно, что натуральный латекс может стимулировать неблагоприятную биологическую реакцию в клетках млекопитающих из-за содержания природных растительных протеинов, что не исключает его применения в медицинских изделиях при условии отсутствия раздражающего и сенсибилизирующего действия.

     1 Область применения

Настоящий стандарт устанавливает методы исследования цитотоксичности медицинских изделий in vitro.

Данные методы предусматривают проведение инкубации клеточной культуры непосредственно либо путем диффузии:

a) с экстрактами из изделия и (или)

b) в контакте с изделием.

Данные методы разработаны для определения in vitro биологической реакции клеток млекопитающих по определенным биологическим параметрам.

     2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты, содержащие положения, которые могут рассматриваться как разделы настоящего стандарта.

ИСО 10993-1 Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 1. Оценка и исследования

ИСО 10993-12:1996 Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 12. Приготовление проб и стандартные образцы

     3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины по ИСО 10993-1, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 отрицательный контрольный образец: Материал, который, подвергаясь исследованию в соответствии с настоящим стандартом, не проявляет цитотоксичности.

Примечание - Назначение отрицательного контрольного образца - продемонстрировать фоновую реакцию клеток, например, в качестве отрицательного контрольного образца использовались полиэтилен высокой плотности* - для синтетических полимеров, стержни из окиси алюминия и керамики - для стоматологических материалов.

________________

* Полиэтилен высокой плотности может быть приобретен в Фармакопее США (Rockville, Maryland, USA) и FDA, Исследовательском Институте Хатано (Ochiai 729-5, Hadanoshi, Kanagawa 257-Japan). Эта информация приведена для удобства пользователя настоящим стандартом и не является рекламой этой продукции со стороны ИСО.

3.2 положительный контрольный образец: Материал, который, подвергаясь исследованию в соответствии с настоящим стандартом, проявляет цитотоксичность, при этом результаты воспроизводимы.

Примечание - Назначение положительного контрольного образца - продемонстрировать соответствующую реакцию тест-системы. Например, стабилизированный оловоорганический поли(винилхлорид)* используют в качестве положительного контрольного образца для твердых материалов и экстрактов, разведения фенола - в качестве положительного контрольного образца для экстрактов.

________________

* Оловоорганический поли(винилхлорид) в качестве положительного контрольного образца можно приобрести в SIMS Portex Ltd, Hythe, Kent, CT21 6JL, UK, (продукт N 499-300-000). Полиуретаны ZDEC и ZDBC доступны от FDA, Исследовательского Института Хатано (Ochiai 729-5, Hadanoshi, Kanagawa 257 - Japan). Эта информация приведена для удобства пользователя настоящим стандартом и не является рекламой этой продукции со стороны ИСО.

3.3 контроль реактива: Модельная среда без исследуемого материала, которая подвергается воздействию условий и процедур исследования.

Примечание - Для целей настоящего стандарта это определение заменяет приведенное в ИСО 10993-12, пункт 3.1.

3.4 посуда для культуры: Посуда, приемлемая для культуры клеток, включая стеклянные чашки Петри, пластмассовые чашки для культуры, пластмассовые флаконы для культуры или пластмассовые планшеты и микротитровальные пластины.

Примечание - Используют посуду, соответствующую требованиям класса ткани и подходящую для использования с клетками млекопитающих.

3.5 субконфлуэнтность: Примерно 80% конфлуэнтности, т.е. завершение логарифмической фазы роста.

     4 Подготовка образцов

4.1 Основные положения

Исследование проводят:

a) на экстракте из материала и (или)

b) на самом материале.

Материал должен представлять собой конечный продукт или часть конечного продукта, предназначенного для применения. Подготовка образцов должна быть в соответствии с ИСО 10993-12.

4.2 Приготовление экстрактов из материала
     

    4.2.1 Принципы экстракции

Условия приготовления экстрактов должны приближаться к условиям клинического применения, но быть более жесткими, чтобы определить потенциальную токсическую опасность, не вызывая значительных изменений в исследуемом материале, таких как сплавление, плавление или растворение кусочков материала, или изменение химической структуры.