ГОСТ Р 53485-2009 Материалы текстильные. Метод определения токсичности

     6 Проведение испытаний

Для проведения испытаний используют водные экстракты текстильных материалов, контрольные растворы, а также размороженную суспензионную кратковременную культуру клеток млекопитающих - сперму быков по ГОСТ 26030.

Порядок приготовления перечисленных растворов приведен в 6.1-6.3.

6.1 Приготовление опытного раствора

Исследованию подвергают водные экстракты элементарных проб текстильного материала или образцов одежды.

6.1.1 В качестве экстрагента используют дистиллированную воду по ГОСТ 6709.

6.1.2 Для приготовления экстракта используют одну из отобранных по 5.1 элементарных проб массой (1,0±0,01) г.

6.1.3 Элементарную пробу помещают в колбу с притертой пробкой, заливают дистиллированной водой, тщательно перемешивают, добиваясь полного смачивания текстильного материала водой. При плохом смачивании частей элементарной пробы материала водой допускается применение утяжелителей нейтрального состава (например, пластиковые или стеклянные шарики).

Опытным раствором является экстракт с добавлением сухих реактивов глюкозы и цитрата натрия (в пропорции: на 10 мл испытуемого раствора - глюкозы - 0,4 г, цитрата натрия - 0,1 г).

6.1.4 Экстракцию проводят в суховоздушном термостате [3] при температуре (40±2) °С в течение 24 ч.

6.2 Приготовление контрольного раствора

6.2.1 В качестве контрольного раствора используют глюкозо-цитратный раствор: из расчета на 10 мл дистиллированной воды - глюкоза - 0,4 г, цитрат натрия - 0,1 г.

Контрольный раствор одновременно является разбавителем для оттаивания замороженной спермы.

6.3 Оттаивание замороженной спермы

6.3.1 Для оттаивания замороженной спермы в пробирку отбирают разбавитель в объеме, указанном в паспорте на сперму быка, и ставят ее в термостат анализатора изображения АТ-05 [1] с температурой (40±1,5) °C.

6.3.2 Анатомическим пинцетом извлекают из сосуда Дьюара гранулу спермы и опускают ее в пробирку с нагретым до (40±1,5) °С раствором, приготовленным по 6.3.1. Сразу после размораживания содержимое пробирки тщательно перемешивают, встряхивая пробирку, и ставят обратно в термостат на 5-6 минут.

6.4 Проведение испытаний

Индекс токсичности определяют при сравнении экспериментальных данных опытного раствора с контрольным.

6.4.1 Температура проведения испытаний - (40±1,5) °С. Испытуемые растворы (контрольный и опытный) в течение эксперимента должны постоянно находиться при указанной температуре.

Контрольный и опытный растворы (в количестве по 0,4 мл каждого) отбирают в пробирки с притертыми пробками и ставят в блок термостата анализатора изображения AT-05 при температуре (40±1,5) °С.

6.4.2 В пробирки с контрольным и опытным растворами помещают по 0,1 мл полученной по 6.3 суспензии сперматозоидов.

6.4.3 Заполняют по 5 капилляров анализатора изображения AT-05 контрольным и опытным растворами.

6.4.4 Капилляры устанавливают в каретку и помещают ее в анализатор изображения AT-05 [1].

6.4.5 Нажатием кнопки "СТАРТ" анализатора изображения AT-05 начинают процесс испытаний (накопление экспериментальных данных).

Процесс испытаний, обработка результатов эксперимента, вычисление индекса токсичности, коэффициента вариации и всех характеристик эксперимента выполняются автоматически анализатором изображения типа AT-05.

6.4.6 При подвижности сперматозоидов порядка 10% от первоначальной активности в опытных капиллярах останавливают процесс накопления экспериментальных данных нажатием кнопки "СТОП".

6.4.7 При получении значения коэффициента вариации величины интенсивности движений сперматозоидов более 15% эксперимент повторяют, начиная с 6.3.

Если значение коэффициента вариации меньше или равно 15%, то результаты испытаний считают статистически значимыми. Результаты испытаний оформляют протоколом.

Протокол испытаний должен содержать значение индекса токсичности с точностью до 0,1 и отвечать требованиям ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025