Статус документа
Статус документа

ГОСТ Р 52830-2007 (ИСО 7251:2005) Микробиология пищевых продуктов и кормов. Метод обнаружения и определения количества презумптивных бактерий Escherichia coli. Метод наиболее вероятного числа

     5 Разведение, питательные среды и реактивы


Для текущей лабораторной практики применяют ГОСТ Р 51446.

5.1 Разведения

В общем случае согласно ГОСТ Р 51426, для молочных продуктов - [1].

5.2 Селективная обогатительная среда (бульон с лаурилсульфатом)

5.2.1 Состав среды - в соответствии с таблицей 1.

Таблица 1

Состав среды

а)
Для среды двойной концентрации

b)
Для среды одинарной концентрации

Ферментативный перевар растительных и животных тканей, г

40,0

20,0

Лактоза, г

10,0

5,0

Моногидрофосфат калия (KНРO), г

5,5

2,75

Дигидрофосфат калия (KHPO), г

5,5

2,75

Хлорид натрия, г

10,0

5,0

Лаурилсульфат натрия [СН(СН)OSONa], г

0,2

0,1

Вода, см

1000

1000



5.2.2 Приготовление среды

Растворяют компоненты среды или готовую дегидратированную питательную среду в воде, при необходимости подогревают. Устанавливают уровень рН, чтобы после стерилизации он соответствовал (6,8±0,2) при температуре 25 °С.

Среду одинарной концентрации разливают по 9 см в пробирки 16х160 мм (см. 6.4) с пробирками-поплавками Дарема (Уленгута) (см. 6.6), среду двойной концентрации разливают по 10 см в пробирки 18х180 мм (см. 6.4) с пробирками-поплавками Дарема (Уленгута) (см. 6.6).

Стерилизуют в автоклаве (см. 6.1) 15 мин при температуре 121 °С.

После стерилизации пробирки-поплавки Дарема (Уленгута) не должны содержать пузырьков воздуха.

5.3 ЕС-бульон (селективная среда)

5.3.1 Состав:

ферментативный перевар казеина

20,0 г;

лактоза

5,0 г;

желчные соли N 3 [2]

1,5 г;

моногидрофосфат калия (KНРО)

4,0 г;

дигидрофосфат калия (KНPO)

1,5 г;

хлорид натрия

5,0 г;

вода

1000 см.

5.3.2 Приготовление среды

Растворяют компоненты среды или готовую дегидратированную питательную среду в воде, при необходимости подогревают. Устанавливают уровень рН, при необходимости, чтобы после стерилизации он соответствовал (6,8±0,2) при температуре 25 °С.

Среду разливают по 10 см в пробирки 16х160 мм (см. 6.4) с пробирками-поплавками Дарема (Уленгута) (см. 6.6).