ГОСТ 12039-82

Группа С09

     

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

СЕМЕНА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУР

Методы определения жизнеспособности

Seeds of farm crops. Methods for determination of viability

MКC 65.020.20

Дата введения 1983-07-01

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 9 июня 1982 г. N 2331 дата введения установлена 01.07.83

Ограничение срока действия снято по протоколу N 2-92 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 2-93)

ВЗАМЕН ГОСТ 12039-66

ИЗДАНИЕ с Поправками (ИУС 8-83, 4-85, 7-87).

Настоящий стандарт распространяется на семена арбуза, баклажана, бобов кормовых, вики, гороха, гречихи, дыни, капусты, катрана степного, клевера лугового, клещевины, конопли, кукурузы, льна, люпина однолетнего, люцерны синей, нута, овса, огурца, перца, подсолнечника, пшеницы, редиса, ржи, риса, сои, томата, тыквы, фасоли, ячменя и устанавливает следующие методы определения жизнеспособности:

- тетразольно-топографический (ТТМ);

- окрашиванием семян индигокармином и кислым фуксином;

- по скорости набухания семян;

- люминесцентный.

Методы применяют для получения быстрой информации о качестве семян, когда семена находятся в состоянии покоя или требуют длительного срока проращивания, и при оценке набухших, но непроросших семян после завершения установленного срока проращивания.

Термины и определения - по ГОСТ 20290-74.

1. МЕТОД ОТБОРА ОБРАЗЦОВ

1.1. Отбор образцов - по ГОСТ 12036-85.

1.2. Определение жизнеспособности проводят по двум пробам по 100 семян в каждой, отобранным из семян основной культуры, выделенных по ГОСТ 12037-81.

2. ТЕТРАЗОЛЬНО-ТОПОГРАФИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ СЕМЯН

Метод основан на способности дегидрогеназ живых клеток зародыша восстанавливать бесцветный раствор хлористого тетразола в фармазан. В результате зародыш таких семян приобретает красный (малиновый) цвет, зародыши мертвых семян остаются неокрашенными. Кроме полностью окрашенных и полностью не окрашенных, могут встречаться семена с частично окрашенными зародышами. По положению и размеру некротических пятен на зародыше семена классифицируют как жизнеспособные или нежизнеспособные.

2.1. Аппаратура, материалы и реактивы

2.1.1. Для проведения анализа применяют:

- весы лабораторные 1-4-го классов точности по ГОСТ 24104-80* с наибольшим пределом взвешивания до 200 г;

_____________

* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).

- термостаты обогреваемые и охлаждаемые с диапазоном регулирования температуры в рабочей камере от +3 °С до +35 °С, допустимые колебания температуры в рабочей камере ±2 °С;

- микроскоп биологический стереоскопический с увеличением от 3,5 до 88;

- лупу 7 увеличения;

- иглу препаровальную;

- чашки Петри;

- лезвие;

- пинцет;

- стаканчики химические или колбы вместимостью 50, 100, 1000 см по ГОСТ 23932-90;

- бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ 12026-76;

- бумагу индикаторную для определения рН раствора;

- 2, 3, 5-трифенилтетразол-хлорид (тетразол хлористый);

- калий фосфорнокислый, однозамещенный (КНРО), ч. по ГОСТ 4198-75;

- натрий фосфорнокислый двузамещенный (NaHPO·2НО), ч. по ГОСТ 11773-76;

- воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72;

- воду свежекипяченую;

- воду питьевую по ГОСТ 2874-82*.

_____________

* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51232-98 (здесь и далее).

(Поправка, ИУС 8-83).

2.1.2. Приготовление водного раствора тетразола

Для окрашивания зародышей используют 0,5%-ный водный раствор тетразола (5 г тетразола растворяют дистиллированной или свежекипяченой водой с pH 6,0-7,0 и доводят до объема 1000 см). Если значение pH воды меньше 6 или больше 7, используют буферный раствор, который готовят следующим образом:

- раствор N 1 - растворяют 9,078 г КНРО в 1000 см  дистиллированной воды;

- раствор N 2 - растворяют 11,876 г NaHPО·2НО в 1000 см  дистиллированной воды.

Затем 400 см раствора N 1 и 600 см раствора N 2 смешивают вместе. В литре буферного раствора растворяют 5 г соли тетразола. Получают 0,5%-ный раствор хлористого тетразола, pH которого равен 7,0.

(Поправки, ИУС 4-85, 7-87).

2.2. Подготовка к анализу

2.2.1. Семена замачивают в воде в течение 15-18 ч (на ночь) при температуре 20 °С, а свежеубранные семена - при температуре 10 °С - 15 °С в течение такого же времени.

Семена сои замачивают на 2-5 ч, льна - на 2 ч, клещевины - на 1 ч при температуре 30 °С. Допускается предварительно не замачивать семена, которые легко разрезаются, а также изменять срок замачивания семян.

2.3. Проведение анализа

2.3.1. Семена капусты, катрана, томата, перца, баклажана, редиса, конопли окрашивают целыми. Остальные семена разрезают вдоль на две половинки: зерновые - вдоль зародыша, зернобобовые, овощные, технические - на две семядоли вдоль корешка. Каждую подготовленную сотню половинок семян промывают несколько раз водой, полностью погружают в раствор тетразола и выдерживают в темноте. Температура и срок выдержки - в зависимости от культуры. Другая сотня половинок семян аннулируется. Обработанные семена (или половинки семян) после промывания водой раскладывают на пластинке или фильтровальной бумаге. Затем семена просматривают с помощью лупы, бинокуляра или невооруженным глазом (в зависимости от культуры и распространения некрозов), поддерживая их во влажном состоянии на протяжении всего исследования.

Каждое семя оценивается как жизнеспособное или нежизнеспособное в соответствии с чертежом окрашивания. Количество жизнеспособных семян подсчитывают. Жизнеспособные семена обозначены на чертежах знаком "+", нежизнеспособные - знаком "-".

2.3.2. Анализ семян зерновых культур

2.3.2.1. Анализ семян ржи, пшеницы, ячменя, кукурузы

Половинки семян следует поместить в химический стаканчик с водой, промыть несколько раз для удаления остатков разрезанных тканей, залить раствором тетразола и оставить на 1 ч 30 мин при температуре 20 °С или на 40-50 мин при 30 °С.

При слабом окрашивании тканей зародыша время обработки необходимо продлить на 30-60 мин. Результаты окрашивания семян приведены в приложениях 1-4.

К жизнеспособным семенам ржи (см. приложение 1, черт.2) относят семена, у которых:

- зародыш полностью окрашен (черт.2а);

- зародыш с неокрашенным первым корешком (черт.2б);

- не окрашены структуры зародыша, не затрагивающие проводящие пучки (черт.2в).

К нежизнеспособным семенам ржи (см. приложение 1, черт.3) относят семена, у которых:

- зародыш полностью неокрашен (черт.3а);

- зародыш с неокрашенной корневой частью или почечкой (черт.3б, в);

- зародыш с неокрашенными корневой частью, почечкой и центральной частью (черт.3г);

- зародыш с неокрашенным щитком (черт.3д);

- зародыш с неокрашенной центральной частью, включая стеблевую и корневую меристемы (черт.3е);

- зародыш с неокрашенной почечкой и верхним концом щитка (черт.3ж);

- зародыш с неокрашенной почечкой и щитком (черт.3з);

- некрозы (части отмирающей, отмершей ткани) на жизненно необходимых частях зародыша: щитке, почечке и корневой части (черт.3и).

К жизнеспособным семенам пшеницы (см. приложение 2, черт.2) относят семена, у которых:

- зародыш полностью окрашен (черт.2а);

- некрозы на верхнем конце щитка и колеоризе (черт.2б).

К нежизнеспособным семенам пшеницы (см. приложение 2, черт.3) относят семена, у которых:

- зародыш полностью не окрашен (черт.3а);

- зародыш с неокрашенной корневой частью или почечкой (черт.3б);

- некрозы на нижнем и верхнем концах щитка, почечке, колеоризе и частично на корневой части (черт.3в);

- не окрашены почечка и кончики щитка (черт.3г);

- не окрашены щиток и колеориза (черт.3д);

- не окрашены щиток, почечка и колеориза (черт.3е);

- некрозы на жизненно необходимых частях зародыша - щитке, почечке и корневой части (черт.3ж);

К жизнеспособным семенам ячменя (см. приложение 3, черт.2) относят семена, у которых:

зародыш полностью окрашен (черт.2).

К нежизнеспособным семенам ячменя (см. приложение 3, черт.3) относят семена, у которых: