МР 4.2.0020-11

     

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Фенотипическая идентификация бактерий рода

     

Дата введения: с момента утверждения

1. РАЗРАБОТАНЫ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, г.Санкт-Петербург (Г.Я.Ценева - заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор, Л.А.Краева - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник); Харьковской медицинской академией последипломного обучения (Ж.Н.Манина - кандидат медицинских наук, доцент); Институтом экспериментальной и клинической ветеринарной медицины, г.Харьков (О.В.Шаповалова - кандидат биологических наук, С.В.Бирюкова - доктор медицинских наук, профессор); Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Ю.В.Демина - кандидат медицинских наук, заместитель начальника управления эпидемиологического надзора).

2. УТВЕРЖДЕНЫ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 11 мая 2011 г.

3. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.

Введение

В методических рекомендациях представлены современные сведения о таксономии, биологических особенностях и роли коринебактерий в патологии человека и животных. Основное внимание уделяется методам фенотипической идентификации и дифференциальной диагностики представителей рода Corynebacterium от других грамположительных палочковидных бактерий, в т.ч. С. diphtheriae, имеющих клиническое значение. Приведенные адаптированные диагностические таблицы и методики приготовления необходимых питательных сред и реагентов рекомендуются для практического применения в лабораториях клинической и ветеринарной микробиологии.

Коринебактерии часто встречаются во внешней среде и обычно колонизируют кожу и слизистые оболочки человека и животных, являясь представителями микроценозов данных биотопов. Роль этих микроорганизмов в развитии заболеваний человека и животных установлена недавно. В зависимости от биологических особенностей разные виды коринебактерий способны поражать кожу и внутренние органы, особенно у пожилых людей, пациентов с иммуносупрессией или мультиорганной патологией. В случаях инфицирования венозных или брюшных катетеров, нейрохирургических шунтов наблюдается бактериемия. Многие представители коринебактерий становятся причиной эндокардитов, пневмоний, септического артрита и остеомиелита, инфекций при протезировании, заболеваний мочеполовой системы. В связи с этим в клинической практике необходима точная идентификация бактерий данной группы, что позволит правильно и своевременно выбрать этиотропную терапию. Однако в настоящее время фенотипическая идентификация большинства видов коринебактерий затруднена из-за отсутствия информативных диагностических схем и таблиц, а также из-за дефицита оперативных сведений о роли их в патологии человека и животных.

Определяющий вклад в успешную идентификацию коринебактерий внесли автоматизированные и полуавтоматизированные системы, методы родовой и видовой идентификации на основе анализа 16S рРНК. К сожалению, использование сложных и дорогостоящих хемотаксономических исследований, проведение молекулярно-генетического анализа доступно малому числу лабораторий. В практической работе в основном применяются традиционные, общепринятые, "пробирочные" тесты. Кроме того, эти тесты незаменимы, когда идет проверка диагностической эффективности новых тест-систем. В этих случаях рутинные тесты, как "золотой стандарт", помогают решать многие спорные вопросы нетрадиционных методов идентификации возбудителей инфекционных заболеваний.

В настоящее время род Corynebacterium насчитывает 40 медицински значимых видов (и две таксонные группы). Традиционно основой их идентификации и дифференциации является метаболический профиль. Выявление фенотипических особенностей коринебактерий проводится на основе определения наличия или отсутствия сахаролитических энзимов и других ферментных систем. Однако вследствие морфологических и биохимических особенностей коринебактерий их идентификация нередко затруднена. Для получения достоверных сведений о характеристике вида становится необходимым использование наиболее информативных биохимических тестов и качественных питательных сред.

В рекомендациях представлены сведения о наиболее значимых видах коринеформных грамположительных палочек и их роли в патологии человека и животных. Помимо прописей питательных сред и необходимых комментариев по их использованию, приводятся оптимальные схемы их биохимической идентификации с минимальным и наиболее информативным набором тестов. Многие из этих методов характеризуются достаточно высокой воспроизводимостью, точностью, быстротой выполнения и приемлемой стоимостью.

В методических рекомендациях обобщены данные литературы, собственный опыт работы и опыт практических бактериологических лабораторий по морфологической и биохимической идентификации микроорганизмов рода Corynebacterium.

1. Показания и противопоказания к применению метода

Дифференцирование коринебактерий следует проводить в соответствии с приведенным ниже перечнем биохимических признаков во избежание гипо- и гипердиагностики заболеваний, которые они вызывают.

Противопоказаний нет.

2. Материально-техническое обеспечение метода

     
Оборудование

3. Описание метода

     3.1. Микробиологическая характеристика коринеформных бактерий

Коринеформные бактерии - плеоморфные палочковидные грамположительные микроорганизмы, относящиеся к классу Actinobacteria, объединенные по 16S рРНК. Проведенные хемотаксономические исследования позволили найти общие черты среди коринеформных бактерий в целом, а также дифференцировать между собой отдельных их представителей. Многие из них представляют интерес для медицины и ветеринарии. Термин "коринеформные" связан с плеоморфной палочковидной формой этих грамположительных бактерий. Термин "дифтероиды" в последнее время не употребляется, т.к. большинство видов не имеют сходства с Corynebacterium diphtheriae - основным патогенным микроорганизмом группы.