ГОСТ 20264.2-88

Группа С09

     

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ПРЕПАРАТЫ ФЕРМЕНТНЫЕ

Методы определения протеолитической активности

Enzyme preparations.
Methods for determination of proteolytic activity

     

МКС 07.100.30
         65.120
ОКСТУ 9291

Дата введения 1989-01-01

     

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством медицинской и микробиологической промышленности СССР

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 02.03.88 N 440

3. ВЗАМЕН ГОСТ 20264.2-74

4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

5. Ограничение срока действия снято по протоколу N 3-93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 5-6-93)

6. ИЗДАНИЕ с Изменением N 1, утвержденным в декабре 1989 г. (ИУС 4-90)

Настоящий стандарт распространяется на ферментные препараты и устанавливает методы определения протеолитической активности ферментных препаратов микробного происхождения.

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ - по ГОСТ 20264.0

     
2. МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ (ПС)
(модифицированный метод Ансона)

2.1. Метод основан на гидролизе казеината натрия исследуемым ферментным препаратом до пептидов и аминокислот с последующим их определением.

За единицу протеолитической активности принята способность фермента превращать за 1 мин при температуре 30 °С казеинат натрия в неосаждаемое трихлоруксусной кислотой состояние в количестве, соответствующем 1 мкмолю тирозина.

Протеолитическую активность выражают числом указанных единиц в 1 г испытуемого препарата.

Активность грибных и бактериальных протеиназ определяют при значениях рН в следующих диапазонах:

2,5±0,2 и 5,5±0,2 - кислые протеиназы;

7,2±0,2 - нейтральные протеиназы;

9,5±0,2 - щелочные протеиназы.

2.2. Аппаратура, материалы, реактивы, растворы

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104*;

________________

* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001.

2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г;

1-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г или 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 20 г.

Прибор для определения рН среды в диапазоне от 0 до 14 с погрешностью измерения ±0,1 единиц рН.

Мешалка магнитная любого типа, обеспечивающая 3000 об/мин.

Термостат любого типа, обеспечивающий температуру нагрева 40±0,2 °С.

Колориметр фотоэлектрический лабораторный, обеспечивающий измерения в интервалах длин волн 630-670 нм с погрешностью ±1% (по коэффициенту пропускания) или 0,01 (по оптической плотности).

Секундомер.

Термометры 0-150 °С по ГОСТ 28498 с ценой деления 1 °С.

Холодильник бытовой любой марки.

Электроплитка с терморегулятором по ГОСТ 14919.

Баня водяная любого типа.

Холодильник ХСВО 10 ХС по ГОСТ 25336.

Стаканы любого типа и исполнения вместимостью 100, 250, 600, 1000 и 2000 см по ГОСТ 25336.

Стаканчики для взвешивания СВ-19/9 или СВ-24/10 по ГОСТ 25336.

Колбы типов П и Кн любого исполнения вместимостью 100, 250, 500, 1000 см по ГОСТ 25336.

Колбы типов К-1-2000-45/40 ТС, К-2-200-45/40 ТС по ГОСТ 25336.

Колбы мерные исполнения 1 или 2, любого класса точности, наливные вместимостью 50, 100, 200, 250, 500, 1000 и 2000 см по ГОСТ 1770.

Пробирки П1-16-150 ХС, П2-16-180 ХС по ГОСТ 25336.

Цилиндры любого исполнения вместимостью 50 и 100 см по ГОСТ 1770.

Пипетки любого исполнения вместимостью 1, 2, 5 и 10 см по ГОСТ 29227.

Бюретки по ГОСТ 29251.

Воронки стеклянные типа В по ГОСТ 25336.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Кислота уксусная по ГОСТ 61, раствор концентрации 0,1 моль/дм.

Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, раствор с массовой долей кислоты 85% и раствор концентрации 0,1 моль/дм.

Кислота борная по ГОСТ 9656, раствор концентрации 0,1 моль/дм.

Натрий вольфрамовокислый 2-водный по ГОСТ 18289.

Натрий молибденовокислый по ГОСТ 10931.

Литий сернокислый.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, концентрированная, раствор концентрации 1 моль/дм и 0,2 моль/дм.