Об утверждении Методических указаний по разработке нормативов качества воды водных объектов рыбохозяйственного значения, в том числе нормативов предельно допустимых концентраций вредных веществ в водах водных объектов рыбохозяйственного значения (с изменениями на 22 декабря 2016 года)

5. Установление максимальной допустимой концентрации вещества для зоопланктонных ракообразных

Из представителей зоопланктонных ракообразных в морских токсикологических исследованиях используют жаброногого рачка артемию салину (Artemia salina). Помимо жаброногого рачка часто используют культивируемые в лабораторных условиях различные виды мизид в возрасте 3-5 суток. В опыт берут организмы на самых чувствительных стадиях развития (после выклева, при переходе на активное питание, линьке и т.п.).

Из природных вод к лабораторным условиям адаптируют крупные организмы доминирующих видов зоопланктонных ракообразных, таких как калянус, идэя, калянипеда (Calanus finmarchicus, Idyaea furcata - северные моря России; Calanipeda aquaedulcis - Каспийское море); ракообразных семейства мизид и чилимов (дальневосточные моря).

5.1. Артемия салина
     

    5.1.1. Характеристика тест-объекта

Жаброногий рачок - артемия салина (Artemia salina L.) удобен в качестве тест-объекта, что определяется его эвригалинностью, доступностью в любое время года исходного материала (яиц), возможностью длительного хранения яиц (в течение нескольких лет), легкостью содержания и культивирования в воде разной солености. Адаптация при этом не требуется.

При благоприятных условиях выклев науплиев артемий из яиц происходит за 1-2 суток (при 25°С - в течение 24 часов; при 20°С в течение 48 ч). В течение первых дней жизни науплии не потребляют оформленной пищи, находятся на эндогенном питании. На 4-е сутки науплии переходят на активное питание оформленной пищей. В зависимости от температурных условий артемий достигают половозрелого состояния в течение 3-4 недель после вылупления из яиц.

В связи с различной устойчивостью артемий к токсикантам на разных стадиях развития, в токсикологических экспериментах ставят опыты с развивающимися яйцами, науплиальными стадиями артемий и взрослыми особями, используя каждую стадию как отдельный тест-объект.

Из всех стадий развития артемий, наиболее чувствительным тест-объектом являются науплии в возрасте 1 суток (переход ортонауплиуса в метанауплис). Данная стадия используется как тест-объект в экспериментах при разработке ПДК вещества.

5.1.2. Условия лабораторного содержания

Используется обычное лабораторное оборудование, приборы, посуда и реактивы, в том числе:

микрокомпрессоры;

микроскоп биологический, обеспечивающий увеличение в 100-200 раз;

оксиметр;

рН-метр;

прибор для определения солености воды;

мембранные фильтры (размер пор 0,45 мкм и 3-5 мкм);

дистиллированная вода;

стеклянные бутыли на 20 л - 2 штуки;

стаканы лабораторные на 50, 100, 300, 500, 1000 см;

чашки Петри;

градуированные пипетки на 10, 5, 1, 0,1 мл;

пипетки Пастера стеклянные, вместимостью 2 см с укороченным и оплавленным концом для пересадки рачков;

реактивы марки "хч", а также морская соль;

двухромовокислый калий КCrO марки "хч" или стандарт-титр калия двухромокислого;

сухие яйца Artemia salina L. (хранятся в холодильной камере).

Исследование с артемиями (Artemia salina L.) проводят при искусственном или естественном освещении, температуре 20 ± 2°С, от выклева из яйца (односуточные науплии) до половозрелого состояния (21 сутки) на природной морской воде или на искусственной морской воде определенной солености.

При проведении экспериментов с артемиями на искусственной морской воде, последняя служит контролем в экспериментах.

В связи с эндогенным питанием науплиусы артемий не нуждаются в подкормке в течение четырех суток после выклева. В дальнейшем в качестве корма для них используют культуры одноклеточных перидиниевых водорослей из родов Phaeodactylum и Exuviella, или желто-зеленых жгутиковых водорослей Nephrochloris salina, выращиваемых на среде Гольдберга.