7.1. Вводные замечания
Генотоксичность вещества исследуется на генном, хромосомном или геномном уровне. По этим данным устанавливается его максимальная допустимая концентрация для рыбохозяйственных водных объектов по показателю "генотоксичность".
Для выявления мутаций на генном уровне рекомендуется тест Эймса.
Для выявления хромосомных аберраций в хроническом опыте проводят следующие исследования генетического аппарата на клетках различных тканей рыб:
а) учет частоты хромосомных аберраций и нарушений митотического аппарата деления клеток эпителия хрусталика на стадии анафазы и телофазы;
б) учет частоты хромосомных аберраций на стадии метафазы на жаберном эпителии;
в) учет частоты образования микроядер (микроядерный тест) в эритроцитах.
Оценка генотоксичности вещества по нарушению дифференциальной активности генов может проводиться на политенных хромосомах из слюнных желез хирономид.
В обязательную программу генетических исследований должно входить изучение генных мутаций и хромосомных аберраций одним из методов. Вы их выделили жирным шрифтом. При подозрении, что вещество воздействует на митотическую активность клеток и обладает канцерогенностью, необходимо провести дополнительно исследования по выявлению воздействия вещества на дифференциальную активность генов.
Исследуемые концентрации вещества в эксперименте должны укладываться в диапазон от пороговой концентрации (или ниже) до концентрации выше значения ПДК вещества в 5 раз.
7.2. Учет генных мутаций (тест Эймса)
7.2.1. Характеристика тест-объекта
Наиболее удобными, быстрыми и экономичными способами выявления мутагенной активности являются методы с использованием бактерий. Широкое применение находит тест-система с использованием бактерии сальмонелла тифимуриум (Salmonella typhimurium) (таблица 7.2.1). Эти методы основаны на аналогичности генетических механизмов повреждения и репарации ДНК у клеток низших и высших организмов.