Действующий

Об утверждении Методических указаний по разработке нормативов качества воды водных объектов рыбохозяйственного значения, в том числе нормативов предельно допустимых концентраций вредных веществ в водах водных объектов рыбохозяйственного значения (с изменениями на 22 декабря 2016 года)

Таблица 7.2.1.

Штаммы S. typhimurium, используемые для выявления мутагенной активности соединений


Штаммы	Основная мутация в опероне	Дополнительные мутации	Наличие фактора	Выявленный тип мутагенного эффекта
ТА 1950 ТА 1535 ТА 100	his G 46	+ urvB	-	R-BPS
	his G 46	rfa urvB	-	R-BPS
	his G 46	rfa urvB	pKM-101	R-BPS
ТА 1534 ТА 1538 ТА 98	his D 3052	+ urvB		R-FS
	his D 3052	rfa urvB	-	R-FS
	his D 3052	rfa urvB	pKM-101	R-FS
ТА 97	his D 6610	rfa urvB	pKM-101	R-FS
ТА 102	his G 428	rfa+(PAO 1)	pKM-101	R-BPS
А 1537	his С 3076	rfa urvB	-	RPS

Примечание: "+" - обозначение генов дикого типа; rfa - нарушение липополисахаридной капсулы; urvB - нарушение системы эксцизионной реакции; RPS - сдвиг рамки считывания; R-BPS - замена пар оснований.

Сущность использования системы "бактерии-микросомы" заключается в определении способности вещества или его метаболитов индуцировать генные мутации у подопытных штаммов. Если исследуемое вещество (или его метаболиты) обладают мутагенной активностью, то увеличивается количество колоний - ревертантов на чашку Петри в опыте по сравнению с контролем. Под влиянием мутагенных веществ у микроорганизмов-ревертантов происходят обратные мутации, и они приобретают способность жить на среде, лишенной гистидина или другой аминокислоты, по которой отобран тот или другой штамм.

Для выявления промутагенов производят микросомальную активацию, после которой промутагены проявляют мутагенные свойства. Методы приготовления микросомальных ферментов из гепатопан-креаса карпа или других рыб приводятся ниже.

При определении мутагенной активности веществ, нормируемых для воды рыбохозяйственных водных объектов, целесообразно использовать микросомы именно из тканей рыб, а не теплокровных животных, так как экстраполяция результатов, полученных с применением микросом печени теплокровных животных, не всегда оправдана при установлении ПДК веществ вследствие неадекватности протекания метаболических процессов у различных видов животных.

7.2.2. Проведение исследований

7.2.2.1. Оборудование:

бактерицидные облучатели;

центрифуги;

автоклавы;

термостаты;

размельчитель тканей;

водяные термостатирующие бани;

счетчик колоний;

весы;

сушильный шкаф;

дистиллятор.

Реактивы:

КНРO, лимоннокислый натрий, NADP (Rianal);

KHPO, MgCI, биотин;

KCI, MgSO, L-гистидин;

(NH)SO, БСА, нитрозогуанидин;

NaHPO, глюкозо-6-фосфат, ДМСО.


	Мутагены:	Промутагены:
	бенз/а/пирен,	2-ацетиламинофлуоредин,
	9-аминоакридин,	2-аминофлуорен.
	Циклофосфамид.